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文档简介
1、一、填空题1核酸的基本结构单位是 。220世纪50年代,Chargaff等人发现各种生物体DNA碱基组成有 的特异性,而没有 的特异性3DNA双螺旋中只存在 种不同碱基对。T总是与 配对,C总是与 配对。4核酸的主要组成是 , 和 。5两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于 中,RNA主要位于 中。6核酸分子中的糖苷键均为 型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为 键。核苷与核苷之间通过 键连接形成多聚体。7嘌呤核苷有顺式,反式二种可能,但天然核苷多为 。8X射线衍射证明,核苷中 与 平面相互垂直。9核酸在260nm附近有强吸收,这是由于 。10给动物食用3H标记的 ,可使DNA带有放射性,而RN
2、A不带放射性。11双链DNA中若 含量多,则Tm值高。12双链DNA热变性后,或在pH2以下,或pH12以下时,其OD260 ,同样条件下,单链DNA的OD260 。13DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈 。14DNA所处介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围越 ,溶解温度越 ,所以DNA应保存在较 浓度的盐溶液中,通常为 mol/L的NaCl溶液。15DNA分子中存在于三类核苷酸序列:高度重复序列、中度重复序列和单一序列。tRNA,rRNA以及组蛋白等由 编码,而大多数蛋白质由 编码。16硝酸纤维素膜可结合 链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交,称 印迹法。17
3、变性DNA的复性与许多因素有关,包括 , , , , 等。18DNA复性过程符合二级反应动力学,其Cot1/2值与DNA的复杂程度成 比。19双链DNA螺距为3.4nm,每匝螺旋的碱基数为10,这是 型DNA的结构。20RNA分子的双螺旋区以及RNA-DNA杂交双链具有与 型DNA相似的结构,外形较为 。21NAD+,FAD和CoA都是 的衍生物。22维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是 ,其次,大量存在于DNA分子中的弱作用力如 , 和 也起一定作用。23tRNA的三级结构为 形,其一端为 ,另一端为 。24测定DNA一级结构的方法主要有Sanger提出的 法和Maxam,Gilbert提出
4、的 法。25引起核酸变性的因素很多,如 , 和 等。26Oligo(dT)-纤维素可以用来分离纯化真核生物的 。二、是非题1脱氧核糖核苷中的糖环3位没有羟基。2若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpGpApC,则另一条链的碱基顺序为pGpApCpCpTpG。3若种属A的DNA Tm值低于种属B,则种属A的DNA比种属B含有更多的A-T碱基对。4原核生物和真核生物的染色体均为DNA与组蛋白的复合体。5核酸的紫外吸收与溶液的pH值无关。6生物体内存在的游离核苷酸多为5-核苷酸。7Z型DNA与B型DNA可以相互转变。8生物体内,天然存在的DNA分子多为负超螺旋。9真核细胞染色体DNA结构特点
5、之一是具有重复序列,高度重复序列一般位于着丝点附近,通常不转录。10mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。11tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。12真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3-OH。13目前为止发现的修饰核苷酸大多存在于tRNA中。14对于提纯的DNA样品,测得OD260/OD2801.8,则说明样品中含有RNA。15核酸变性或降解时,出现减色效应。16DNA样品A与B分别与样品C进行杂交实验,得到的杂交双链结构如下图:那么说明样品A与C的同源性比样品B与C的同源性高。17基因表达最终产物都是蛋白质。18核糖体不仅存在于细胞质中,也存在于线粒体和叶绿体
6、中。三、选择题(下列各题均有五个备选答案,其中只有一个正确答案)1下列突变中,哪一种致死性最大?( )(A)胞嘧啶取代腺嘌呤 (B)沉降系数下降(C)插入三个核苷酸 (D)插入一个核苷酸(E)丢失三个核苷酸2双链DNA热变后( )(A)黏度下降 (B)沉降系数下降(C)浮力密度下降 (D)紫外吸收下降(E)都不对3下列复合物中除哪个外,均是核酸与蛋白质组成的复合物( )(A)核糖体 (B)病毒(C)端粒酶 (D)RNase P(E)核酶(ribozyme)4艾滋病病毒HIV是一种什么病毒( )(A)双链DNA病毒 (B)单链DNA病毒(C)双链RNA病毒 (D)单链RNA病毒(E)不清楚5RN
7、A经NaOH水解,其产物是( )(A) 5-核苷酸 (B)2-核苷酸(B) 3-核苷酸 (D)2-核苷酸和3-核苷酸的混合物(E)2-核苷酸、3-核苷酸和5-核苷酸混合物6反密码子UGA所识别的密码子是( )(A)ACU (B)ACT (C)UCA (D)TCA (E)都不对7对DNA片段作物理图谱分析,需要用( )(A)核酸外切酶 (B)DNase I(C)DNA连接酶 (D)DNA聚合酶I(E)限制性内切酶四、思考问答题1(1)T7噬菌体DNA,其双螺旋链的相对分子质量为2.5107。计算DNA链的长度(设核苷酸对的平均相对分子质量为650) (2)相对分子质量为130106的病毒DNA分
8、子,每微米的质量是多少? (3)编码88个核苷酸和tRNA的基因有多长? (4)编码细胞色素C(104个氨基酸)的基因有多长?(不考虑起始和终止序列) (5)编码相对分子质量为9.6万的蛋白质的mRNA,相对分子质量为多少?(设每个氨基酸的平均相对分子质量为120) (6)噬菌体DNA长17m,一突变体DNA长15m,问该突变体缺失了多少碱基对?2对一双链DNA而言,若一条链中(A+G)/(T+C)=0.7,则(1)互补链中(A+G)/(T+C)=?(2)在整个DNA分子中(A+G)/(T+C)=?(3)若一条链中(A+T)/(G+C)=0.7,则互补链中(A+T)/(G+C)=?(4)在整个
9、DNA分子中(A+T)/(G+C)=?3试述三种主要的RNA的生物功能(与蛋白质生物合成的关系)。4Hershey-Chase所做的噬菌体转染实验中,为什么32P只标记在DNA分子中,而35S只标记在蛋白质的外壳上?如果用35S标记的噬菌体去感染细菌,那么在子代病毒中是否会出现带35S标记的病毒?如果是用32P标记的噬菌体重复实验,那么在子代病毒中是否可以找到带32P标记的病毒?5某双链DNA样品,含28.9摩尔百分比的腺嘌呤,那么T,G,C的摩尔百分比分别为多少?6试述下列因素如何影响DNA的复性过程。 (1)阳离子的存在 (2)低于Tm的温度 (3)高浓度的DNA链7用稀酸或高盐溶液处理染
10、色质,可以使组蛋白与DNA解离,请解释。8线粒体电子转移链中的一种重要蛋白质:酵母细胞色素氧化酶由7个亚基组成,但是只有其中的4种亚基的氨基酸顺序由酵母核内DNA编码,那么其余三种亚基的氨基酸顺序所需的信息来自何处?9胰脱氧核糖核酸酶(DNase I)可以随机地水解溶液中的DNA的磷酸二酯键,但是DNase I作用于染色体DNA只能使之有限水解,产生的DNA片段长度均为200bp倍数。请解释。参考答案一、填空题1核苷酸2种 组织3二 A G4碱基 核糖 磷酸5细胞核 细胞质6 糖苷 磷酸二酯键7反式8碱基 糖环9在嘌呤碱基和嘧啶碱基中存在于共轭双键10胸腺嘧啶11G-C对12增加 不变13窄1
11、4宽 低 高 115中度重复序列 单一序列16单 Northerm17样品的均一度 DNA的浓度 DNA片段大小 温度的影响 溶液的离子强度18正19B20A 粗短21腺苷酸22碱基堆积力 氢键 离子键 范德华力23倒L 氨基酸接受臂 反密码子24双脱氧法 化学断裂法25温度升高 酸碱变化 有机溶剂26MRNA二、是非题1错。脱氧核糖核苷中的糖环2位没有羟基。2错。另一条链的碱基顺序为:pGpTpCpCpApG。3对。DNA的Tm值与DNA中所含的G-C对含量成正比,即与A-T对含量成反比。4错。真核生物的染色体为DNA与组蛋白质的复合体,原核生物的染色体DNA与碱性的精胺、亚精胺结合。5错。
12、核酸的紫外吸收与溶液的pH值相关。6对。天然存在的游离核苷酸一般为5-核苷酸。7对。天然B型DNA的局部区域可以出现Z型DNA,说明B型DNA与Z型DNA之间可以相互转变的。8对。负超螺旋DNA容易解链,便于进行复制、转录等反应。9对。高度重复序列一般位于着丝点附近,与纺锤体形成有关,通常不转录。10错。mRNA是细胞内种类最多、但含量很低的RNA。细胞内含量最丰富的RNA是rRNA。11.对。不同tRNA中额外环大小差异很大,因此可作为tRNA分类的指标。12对。真核生物成熟mRNA的5为帽子结构,即m7G(5)ppp(5)N-,因此5端也是3-OH。13对。目前为止发现的修饰核苷酸大多是在
13、tRNA中找到的。14错。对于提纯的DNA样品,如果测得的OD260/OD2801.8,则说明样品中有蛋白质残留。15错。核酸变性或降解时,碱基堆叠被破坏,碱基暴露,光吸收增加,称为增色效应。16对。同源DNA在适合条件下,可以杂交,杂交程度与同源性成正比。17错。基因表达的产物可以是蛋白质或RNA。18对。线粒体和叶绿体具有自己的一套复制、转录、翻译体系,因此也含有核糖体。三、选择题1(D)插入一个核苷酸会导致移码突变,即从突变处开始,后面有所有氨基酸序列变化,造成编码的蛋白质产物的结构、功能的很大变化,这往往是致死性的。插入或或丢失三个核苷酸只造成编码的蛋白质增加或减少一个氨基酸;单个碱基
14、的相互取代也最多影响这个碱基所在的密码子编码的氨基酸,对编码的蛋白质产物的结构、功能影响较小。2(A)双链DNA热变性后细长的双螺旋结构被破坏,形成无规卷曲,因此黏度下降,沉降系数和浮力密度增加,变性后碱基堆积被破坏,核苷酸暴露,紫外吸收增加。3(E)核酶是具有催化能力的RNA,因此不是核酸与蛋白质组成的复合物。4(D)艾滋病病毒HIV是一种单链RNA病毒。5(D)RNA经NaOH水解先生成2,3-环核苷酸,再水解为2或3-核苷酸,得到2-核苷酸和3-核苷酸的混合物。6(C)密码子是mRNA上的三个相邻的、编码氨基酸的碱基,与反密码子反向互补配对,因此反密码子UGA所识别的密码子是UCA。7(
15、E)对DNA片段作物理图谱分析,需要将DNA用限制性内切酶切成一组片段,以特异序列为标记,确定这些片段的位置,即得到DNA和物理图谱。四、问答题1(1)(2.5107/650)0.34=1.3104nm=13m (2)650/0.34=1.9103/nm=1.9106/m (3)880.34nm=30nm=0.03m(4)10430.34=106nm0.11m(5)(96000/120)3320=76800(6)(1715)103/0.34=5.88103bp2.(1)设DNA的两条链分别为和,那么=,=,=,=,因为,()()()()0.7所以,互补链中()()10.71.43(2)在整个分
16、子中因为,A=T,G=C,所以,A+G=T+C,(A+G)/(T+C)=1(3)假设同1,则A+T=T+A,G+C=CG,所以,(A+T)/(G+C)=(A+T)/(G+C)=0.7(4)(A+T+A+T)/(G+C+G+C)=2(A+T)/(G+C)=0.73.mRNA是信使RNA,它将DNA上的遗传信息转录下来,携带到核糖体上,在那里以密码的方式控制蛋白质分子中的氨基酸的排列顺序,作为蛋白质合成的直接模板。rRNA是核糖体RNA,与蛋白质共同构成核糖体,核糖体不仅是蛋白质合成的场所,还协助或参与了蛋白质合成的起始。tRNA是转运RNA,与合成蛋白质所需的单体:氨基酸形成复合体,将氨基酸转运
17、到核糖体中mRNA的特定位置上。4因为DNA分子含大量磷酸基团,不含硫,而蛋白质中部分氨基酸含硫,但都不含磷,所以32P只标记在DNA分子中,而35S只标记在蛋白质的外壳上。如果用35S标记的噬菌体重复实验,那么在子代病毒中就会出现带32P标记的病毒。因为噬菌体感染细菌时其蛋白质外壳并不进入细菌体内,子代噬菌体的蛋白质外壳是在细菌体内新合成的,因此不带标记。如果用32P标记的噬菌体重复实验,那么在子代病毒中就会出现带32P标记的病毒。因为噬菌体感染细菌时其核酸部分将进入细菌体内,并作为遗传物质传给子代噬菌体,因此在子代病毒中可以找到带32P标记的病毒。5因为,A=28.9%所以,T=A=28.
18、9%,G=C=(10.2892)/2=0.211=216(1)阳离子可以中和DNA中带负电荷的磷酸基团,减弱DNA链间的静电作用,促进两条互补的多核苷酸链的相互靠近,从而促进DNA的复性。(2)温度升高可使DNA变性,因此温度降低到熔点以下可以促进DNA的复性。(3)DNA链的浓度增加可以加快互补链随机碰撞的速度,从而促进DNA的复性。7组蛋白与DNA之间的结合依靠的是组蛋白带正电的碱性基团与DNA带负电荷的磷酸基团之间的静电引力,如果用稀酸处理复合物,则磷酸基团质子化而失去所带的负电荷,复合物解离。如果用高盐溶液处理复合物,则阳离子与磷酸基团结合而取代了组蛋白,导致组蛋白与DNA解离。8除了
19、核内DNA外,原核生物酵母细胸胞的线粒体内还含有少量DNA,这些DNA编码题中其余三种亚基的氨基酸顺序。9真核生物染色体DNA含有核小体结构,核小体是由大约200bp的DNA双链围绕组蛋白核心组成的,彼此相连成念珠状结构,即染色体DNA。围绕组蛋白核心的DNA不被DNase I水解,而核小体与核小体之间起连接作用的DNA的磷酸二酯键对DNase I敏感,因此水解产生长约200bp的DNA片段。一、选择题1 酶促反应的初速度不受哪一因素影响( )AS BE CpHD时间 E温度2对于一个符合米氏方程的酶来说:当S=Km;I=k1时,I为竞争性抑制剂,则为( ) AVmax2/3 BVmax1/3
20、 CVmax1/2 DVmax1/4 EVmax1/63下列有关某一种酶的几个同工酶的陈述哪个是正确的?( ) A由不同亚基组成的寡聚体 B对同一底物具有不同专一性 C对同一底物具有相同的Km值 D电泳迁移率往往相同 E结构相同来源不同4别构酶与不同浓度的底物发生作用,常呈S形曲线,这说明( ) A别构酶是寡聚体 B别构酶催化几个独立的反应并最后得到终产物 C与单条肽链的酶相比,别构酶催化反应的速度较慢 D别构酶结合一个底物后,将促进它与下一个底物的结合,并增强酶活力 E产物的量在不断增加5关于米氏常数Km的说法,哪个是正确的( ) A饱和底物浓度时的速度 B在一定酶浓度下,最大速度的一半 C
21、饱和底物浓度的一半 D速度达最大速度半数时的底物浓度 E降低一半速度时的抑制剂浓度6如果要求酶促反应=Vmax90%,则S应为Km的倍数是( ) A45 B9 C8 D5 E907在下面酶促反应中的Vmax为( ) AK3Et BK2/K3 CK2/K1D(K2+K3)/K1 E都不对8酶的纯粹竞争性抑制剂具有下列哪种动力学效应?( ) AVmax不变,Km增大 BVmax不变,Km减少 CVmax增大,Km不变 DVmax减少,Km不变 EVmax和Km都不变9作为催化剂的酶分子,具有下列哪一种能量效应?( ) A增高反应活化能 B降低反应活化能 C增高产物能量不平 D降低产物能量不平 E降
22、低反应自由能10酶分子经磷酸化作用进行的化学修饰主要发生在哪个氨基酸上?( ) APhe BCys CLys DTrp ESer11下列哪种酶能使水加到碳-碳双键上,而又不使键断裂?( ) A水化酶 B酯酶 C水解酶 D羟化酶 E脱氢酶 12下列哪种肠胃道消化酶不是以无活性的酶原方式分泌的?( ) A核糖核酸酶 B胰蛋白酶 C糜蛋白酶 D羧肽酶 E胃蛋白酶13下面关于酶的描述,哪一项不正确?( ) A所有的蛋白质都是酶 B酶是生物催化剂 C酶是在细胞内合成的,但是可以在细胞外发挥催化功能 D酶具有专一性 E酶在强碱、强酸条件下会失活14下列关于牛胰蛋白酶的解释,哪一项是错误的?( ) A它是一
23、种蛋白质 B它可以催化蛋白质氧化分解 C它来自牛的胰脏 D它发挥作用时,对底物具有选择性 E不需要辅酶15测定酶活力时,下列条件哪个不对( ) ASE BS=Et CPO D测初速度 E最适pH16在测定酶活力时,用下列哪种方法处理酶和底物才合理?( ) A其中一种用缓冲液配制即可 B分别用缓冲液配制,然后混合进行反应 C先混合,然后保温进行反应 D其中一种先保温,然后再进行反应 E分别用缓冲液配制,再预保温两者,最后混合进行反应17下列哪一种酶是简单蛋白质?( ) A牛胰核糖核酸酶 B丙酮酸激酶 C乳酸脱氢酶 D烯醇化酶 E醛缩酶18下列哪一项不是辅酶的功能?( ) A转移基团 B传递氢 C
24、传递电子 D某些物质分解代谢时的载体 E决定酶的专一性19下列关于酶活性部位的描述,哪一项是错误的?( ) A活性部位是酶分子中直接与底物结合,并发挥催化功能的部位 B活性部位的基团按功能可分为两类:一类是结合基团,一类是催化基团 C酶活性部位的基团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的基团 D不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位 E酶的活性部位决定酶的专一性20下列关于乳酸脱氢酶的描述,哪一项是错误的?( ) A乳酸脱氢酶可用LDH表示 B它是单体酶 C它的辅基是NAD+ D它有六种结构形式 E乳酸脱氢酶同工酶之间的电泳行为不尽相同21下列哪一项不是酶具有高催化效率的因素?( ) A
25、加热 B酸碱催化 C“张力”和“形变” D共价催化 E邻近定位效应22当S=4Km时,=( ) AVmax BVmax4/3 CVmax3/4 DVmax4/5 EVmax6/523能够与DIEP结合的氨基酸残基是以下哪一种?( ) ACys BSer CPro DLys EGlu24下列哪一种抑制剂不是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂?( ) A乙二酸 B丙二酸 C丁二酸 D-酮戊二酸 E碘乙酸25下列关于别构酶的叙述,哪一项是错误的?( ) A所有别构酶都是多聚体,而且亚基数目往往是偶数 B别构酶除了活性部位外,还含有调节部位 C亚基与底物结合的亲和力因亚基构象不同而变化 D亚基构象改变时,要发
26、生肽键断裂的反应 E酶构象改变后,酶活力可以升高也可以降低26下列哪一项不是Km值的功能( ) AKm值是酶的特征物理常数,可用于鉴定不同的酶BKm值可以表示酶与底物之间的亲和力,Km值越小、亲和力越大 CKm值可以预见系列反应中哪一步是限速反应 D用Km值可以选择酶的最适底物 E比较Km值可以估计不同酶促反应速度27磺胺药物治病原理是( ) A直接杀死细菌 B细菌生长某必需酶的竞争性抑制性剂 C细菌生长某必需酶的非竞争性抑制剂 D细菌生长某必需酶的不可逆抑制剂 E分解细菌的分泌物28有机磷农药作为酶的抑制剂是作用于酶活性中心的( ) A巯基 B羟基 C羧基 D咪唑基 E氨基29丙二酸对琥珀酸
27、脱氢酶的影响是属于( ) A产物反馈抑制 B产物阻遏抑制 C非竞争性抑制 D竞争性抑制 E不可逆抑制30酶的不可逆抑制的机制是由于抑制剂( ) A使酶蛋白变性 B与酶的催化中心以共价键结合 C与酶的必需基团结合 D与活性中心的次级键结合 E与酶表面的极性基团结合31谷丙转氨酶的辅酶是( ) ANAD+ BNADP+ C磷酸吡哆醛 D烟酸 E核黄素32酶的活性中心是指( ) A酶分子上的几个必需基团 B酶分子与底物结合的部位 C酶分子结合底物并发挥催化作用的关键性三维结构区 D酶分子中心部位的一种特殊结构 E酶分子催化底物变成产物的部位33酶原激活的实质是( ) A激活剂与酶结合使酶激活 B酶蛋
28、白质的变构效应 C酶原分子一级结构发生改变从而形成或暴露出酶的活性中心 D酶原分子的空间构象发生了变化而一级结构不变 E以上都不对34同工酶的特点是( ) A催化作用相同,但分子组成和理化性质不同的一类酶 B催化相反应,分子组成相同,但辅酶不同的一类酶 C催化同一底物起不同反应的酶的总称 D多酶体系中酶组分的统称 E催化作用,分子组成及理化性质相同,但组织分布不同的酶35变构酶的底物浓度曲线呈S形,它说明( ) A此变构酶为具负性同效应的酶 B此变构酶中,底物分与其中一亚基结合后能促进其他亚基与底物的结合 C变构酶是米氏酶的一种特例 D变构酶所催化的反应包括一系列步骤 E此变构酶的多个底物分子
29、同时与酶快速结合36酶的高效率在于( ) A增加活化能 B降低反应物的能量水平 C增加反应物的能量水平 D降低活化能 E以上都不对37酶促反应的初速度( ) A与S成正比 B与S无关 C与Km成正比 D与I成正比 E与温度成正比38米氏常数在推导过程中引入了哪项假设?( ) A酶浓度为底物浓度的一半 B由于ES在存在使底物初始浓度降低 C由于酶浓度很大,所以E基本不变 D忽略反应ESE+S的存在 E由于PO,所以不考虑反应E+PES的存在39将米氏方程改为双倒数方程后( ) A1/与1/S成反比 B以1/对1/S作图,其横轴为1/S C与S成正比 DKm值在纵轴上 EVmax值在纵轴上40竞争
30、性抑制作用特点是指抑制剂( ) A与酶的底物竞争酶的活性中心 B与酶的产物竞争酶的活性 C与酶的底物竞争非必需基团 D与酶的底物竞争辅酶 E与其他抑制竞争酶的活性中心二、填空题1测定酶活力的主要原则是在特定的 、 条件下,测定酶促反应的 速度。2使酶具有高催化效应的因素是 、 、 、 和 。3全酶由 和 组成。 4酶对 的 性称为酶的专一性,一般可分为 、 和 。5L-精氨酸只作用于L-精氨酸,而对D-精氨酸无作用,因为此酶具有 专一性。6同工酶是一类 相同、 不同的一类酶。7醛缩酶属于第 大类的酶。8磺胺类药物能抑制细菌生长,因为它是 的结构类似物,能 性地抑制 酶活性。 9pH对酶活力的影
31、响原因有 和 。10在某一酶溶液中加入GSH能提高此酶活力,那么可以推测 基可能是酶活性中心的必需基团。11乳酸脱氢酶是以 辅酶的,它的酶蛋白由 个亚基构成,其亚基可分 型和 型,根据不同类型亚基的组合,乳酸脱氢酶可分为 种同工酶。12目前认为酶促反应的机制是 。13如果一个酶对A、B、C三种底的米氏常数分别为Kma、Kmb和Kmc,且KmaKmbKmc,则此酶的最适底物是 ,与酶亲和力最小的底物是 。14欲使酶促反应速度达到最大速度的90%,此时底物浓度应是此酶Km值的 倍。15调节酶类一般分为(主要)两大类 和 。16激酶是一类催化 的酶。17影响酶促反应速度的因素有 。18依酶促反应类型
32、,酶可以分为六大类为 。19pH对酶活力的关系是一种 曲线,其原因是 。20酶经分离提纯后保存方法是 。21酶的专一性分为两大类 。22根据调节物分子不同,别构效应分为 和 。根据调节物使别构酶反应速度对S敏感性不同分为 和 。三、是非判断题1一般酶和底物大小差不多。2酶的分类是依据其催化反应类型。3酶影响它所催化反应的平衡。4酶影响它所催化反应的平衡的到达时间。5如果有一个合适的酶的存在,达到化学能阈所需的活化能就减少。6在酶已被饱和的情况下,底物浓度地增加能使酶促反应初速度增加。7当ES复合物的量增加时,酶促反应速度也增加。8酶促反应的米氏常数与所用的底物无关。9在极低底物浓度时,酶促反应
33、初速度与底物浓度成正比。10如果已知在给定酶浓度时的Km和Vmax,则可计算在任何底物浓主度时的酶促反应初速度。11对于酶的催化活性来说,酶蛋白的一级结构是必需的,而与酶蛋白的构象关系很大。12在酶的活性部位,仅仅只有侧链带电荷的氨基酸残基直接参与酶的催化反应。13测定酶活时,一般测定+P比测定-S更为准确。14在酶催化过程中,ES复合物的形成是可逆的。151/Km愈大,表明酶与底物的亲和力越小。16辅酶、辅基在酶催化作用中,主要是协助酶蛋白的识别底物。17变构剂与酶的催化部位结合后使酶的构象改变,从而改变酶的活性,称为酶为变构作用。18酶原激活过程实际就是酶活性中心形成或暴露的过程。19酶经
34、固定化后,一般稳定性增加。20作为辅因子的金属离子,一般并不参与酶活性中心的形成。四、名词解释题1全酶2酶的辅助因子3辅酶的辅基4酶活力5酶的活力单位(U)6酶的比活力7酶的转换数:Kcat8米氏常数Km9激活剂10抑制剂11不可逆抑制作用与可逆抑制作用12竞争性抑制作用13非竞争性抑制作用14酶的专一性15酶的活性中心16多酶体系17调节酶18别构效应19别构酶20酶原激活21寡聚酶22同工酶23诱导酶五、问答及计算题1在酶的纯化过程中通常会丢失一些活力,但偶尔亦可能在某一纯化步骤中酶活力可超过100%,产生这种活力增高的原因是什么?2试述使用酶作催化剂的优缺点。3如果你从刀豆中得到了一种物
35、质,很可能是脲酶,你怎样确定它是蛋白质,如何判断它是否是酶?4试简述Km的意义及应用。5当S=0.5Km ;S=4Km; S=9Km;S=99Km时,计算占Vmax的百分比。6某酶制剂2mL内含脂肪10mg,糖20mg,蛋白质25mg,其酶活力与市售酶商品(每克含2000酶活力单位)10mg相当,问酶制剂的比活力是多少?7酶定量测定中要控制哪些条件?为什么?8何谓米氏常数,它的意义是什么?9米氏方程的实际意义和用途是什么?它有什么局限性?10别构酶有何特性?参考答案:一、选择题1、D2、B3、A4、D5、D6、B7、A8、A9、B10、E11、A12、A13、A14、B15、B16、E17、A
36、18、E19、D20、B21、A22、D23、B24、E25、D26、E27、B28、B29、D30、B31、C32、C33、C34、A35、B36、D37、A38、E39、B40、A二、填空题1温度;pH;初2酸碱催化;共价催化;邻近定向效应;分子张力的形成;低介电区的形成3酶蛋白;辅助因子4底物;选择性;立体异构专一性;绝对专一性;相对专性5立体异构6功能;组成或结构7四8对氨基苯甲酸;竞争;二氢叶酸合成酶9影响酶和底物的基团解离;使酶变性10巯基(-SH)11NAD;四;M;H;五12通过诱导契合过程来降低反应的活化能13C;A14915别构酶;共价调节酶16磷酸基团转移并伴随能量转移反
37、应17 S,E,pH,温度,激活剂,抑制剂18氧化还原酶类;移换酶类;水解酶类;裂合酶类;异构酶类;合成酶类19钟罩形;酶在最适pH条件下活力最大,高于或低于最适pH时,酶活力均下降20浓缩低温保存;冰冻干燥保存21结构专一性和立体异构专一性22. 同促效应;异促效应;正协同效应;负协同效应三、是非判断题1错2对3错4对5对6错7对8错9对10对11错12错13对14对15错16错17错18对19对20错四、名词解释题1全酶是酶的一种,由酶蛋白和辅助因子构成的复合物称为全酶。2酶的辅助因子构成全酶的一个组分,主要包括金属离子及水分子有机化合物,主要作用是在酶促反应中运输转移电子、原子或某些功能
38、基的作用。3辅酶的辅基大多数情况下,可通过透析或其他物理方法从全酶中除去,与酶蛋白结合松弛的辅助因子叫辅酶。以共价健和酶蛋白牢固结合,不易用透析等方法除去的辅助因子叫辅基。二者的区别只在于与酶蛋白结合的牢固程度不同,无严格绝对的界限。4酶活力也称酶活性 ,指酶催化一定化学反应的能力,可用在一定条件下,它所催化的某一化学反应的速度表示。单位:浓度/单位时间。5酶的活力单位(U)酶活力的度量单位。1961年国际酶学委员会规定:1个酶活力单位是指特定条件下,在1min内能转化1mol底物的酶量,特定条件:温度25,其他条件采用最适,另外也存在人们普通采用的其他酶活力单位。6酶的比活力即酶含量的多少,
39、定为每毫克酶蛋白所具有的酶的活力单位,一般用U/mg蛋白表示。7酶的转换数:KcatKcat指每秒钟每个酶分子转换底物的微摩尔数,代表酶的催化效率。8米氏常数Km米氏常数Km:是米氏酶的特征常数之一。在反应中Km=(K2+K3)/K1,Km值的物理意义在于它是当酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。单位是:mol/L等。9激活剂凡能提高酶活性的物质均称为激活剂。其中大部分为离子或简单的有机化合物,另外还有对酶原起激活作用的具有蛋白质性质的大分子物质。10抑制剂能使酶分子上的某些必需基团(主要指酶活性中心上的一些基团)发生变化,从而引起酶活力下降,甚至丧失,致使酶反应速度降低的物质。11
40、不可逆抑制作用与可逆抑制作用前者是某些抑制剂通常以共价键与酶蛋白中的基结合,而使酶失活,不能用透析、超滤等物理方法除去的抑制作用。后者则指抑制剂以非共价键与酶蛋白中的基团结合,可用透析等物理方法除去而使酶重新恢复活性。12竞争性抑制作用竞争性抑制剂因具有与底物相似的结构所以与底物竞争酶的活性中心,与酶形成可逆的EI复合物,而使EI不能与S结合,从而降低酶反应速度的可逆抑制作用。这种抑制作用可通过增加底物浓度来解除。13非竞争性抑制作用非竞争性抑制剂与酶活性中心以外的基团结合,形成EI或ESI复合物,从而不能进一步形成E和P,因此使酶反应速度降低的可逆抑制作用,不能通过增加底物浓度的方法解除。1
41、4酶的专一性即特异性,是指酶催化特定的底物发生一定的化学反应生成特定产物的特性。15酶的活性中心指在一级结构上可能相距甚远,甚至位于不同肽链上的少数几个氨基酸残基或这些残基上的基团通过肽链的盘绕折叠而在三维结构上相互靠近,形成一个能与底物结合并催化其形成产物的位于酶蛋白表面的特化的空间区域。对需要辅酶的酶来说,辅酶分子 或其上的某一部分结构常是活性中心的组成部分。16多酶体系在细胞内的某一代谢过程中,由几个酶形成的反应链体系,称为多酶体系。一般分为可溶性的、结构化的和在细胞结构上有定位关系的三种类型。17调节酶在多酶体系中某些酶因其本身活性受到严格的调节控制从而对代谢反应起调节作用,此类酶统称
42、为调节酶。18别构效应调节物(或效应物)与别构酶酶分子的别构中心结合后,诱导出或稳定住酶分子的某种构象,使酶活性中心对底物的结合与催化作用受到影响,从而调节酶的反应速度及代谢过程,此效应称为酶的别构效应。19别构酶一种一般具多个亚基,在结构上除具有酶的活性中心外,还具有可结合调节物的别构中心的酶,活性中心负责酶对底物的结合与催化,别构中心负责调节酶反应速度。20酶原激活某些酶先以无活性的酶原形式合成及分泌,然后在到达作用部位时由另外的物质作用,使其失去部分肽段从而形成或暴露活性中心形成有活性的酶分子的过程。如胃蛋白酶原是无活性的,它在胃液中经胃酸的作用或有活性的胃蛋白酶的作用变成有活性的胃蛋白
43、酶分子。21寡聚酶由两个或两个以上亚基组成的酶分子,相对分子质量一般从35000到几百万以上的酶。22同工酶指催化同一种化学反应,而其酶蛋白本身的分子结构组成及理化性质有所不同的一组酶。23诱导酶指当生物体或细胞中加入特定诱导物后,而诱导产生的酶,称为诱导酶。它的含量要诱导物诱导下显著增高,这种诱导物往往是该酶的底物或底物类似物。五、问答及计算题1在酶的纯化过程中通常会丢失一些活力,但偶尔亦可能在某一纯化步骤中酶活力可超过100%,产生这种活力增高的原因是什么?答:在酶的纯化过程中,如果某一纯化步骤中酶活力超过了100%,则很有可能是由于此酶的激活剂(包括别构激活剂)的加入或抑制剂的丢失所造成
44、的。这些激活剂或抑制剂你可能原先并不知道。2试述使用酶作催化剂的优缺点。答:优点:专一性高,副反应很少,后处理容易。催化效率高,酶用量少。反应条件温和,可以在近中性的水溶液中进行反应,不需要高温、高压。酶的催化活性可以进行人工控制缺点:酶易失活,酶反应的温度、pH、离子强度等要很好控制。酶不易得到,价格昂贵。酶不易保存。3如果你从刀豆中得到了一种物质,很可能是脲酶,你怎样确定它是蛋白质,如何判断它是否是酶?答:第一步:首先判断此物质是否是蛋白质,如用双缩脲反应或其他蛋白质显色反应来进行鉴定。另外也可以用酸或碱水解,同时用甲醛滴定法来检测水解程度(此物质若是蛋白质则应有蛋白质的显色反应,酸碱水解
45、时游离氨基酸的含量随时间而升高)。第二步:将此蛋白质加入到含有尿素的缓冲体系中进行催化反应,用奈氏试剂检测是否有氨的生成。将此蛋白质加热后再作此反应,检测是否还有氨的生成(此蛋白质若是脲酶则应有氨的生成。将此蛋白质加热后再作此反应,检测是否还有氨的生成(此蛋白质若是脲酶则应有氨的生成,而蛋白质加热后则不再有氨的生成)。4试简述Km的意义及应用。答:Km值是当酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。首先当Km值近似等于K2/K1时,它代表了酶与底物的亲和力的大小;利用酶对不同底物的不同Km值,我们可以找出酶的最适底物。其次,Km值是酶的一种特征性常数;利用它我们可以判断区分酶的种类。最后,利用Km值可以换算S与的关系。5当S=0.5Km ;S=4Km; S=9Km;S=99Km时,计算占Vmax的百分比。答:33.3% Vmax;80% Vmax;90% Vmax;9901% Vmax。6某酶制剂2mL内含脂肪10mg,糖20mg,蛋白质25mg,其酶活力与市售酶商品(每克含2000酶活力单位)10mg相当,问酶制剂的比活力是多少?答:比活力=总活力/mg蛋白市售商品比活力为2000U/1000mg=2U/mg商品酶总活力为10mg2(U/mg)=20U其比活力为:20U/25mg=08U/mg蛋白7酶定量测定中要控制哪些条件?为什么?答:酶量
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