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文档简介
1、阿司匹林血药浓度测定,一、实验目的,1.掌握阿司匹林血样的处理方法 2.掌握血药浓度-时间曲线的测定方法 3.掌握单室模型血管外给药药物动力学参数的提取方法,二、实验原理,阿司匹林在体内转化为水杨酸盐。把混合试剂加到家兔口服阿司匹林后采集不同时间的血清样本中,升汞沉淀蛋白质,而铁盐与水杨酸作用显紫色,在一定温度范围内,显色强度与水杨酸的浓度成正比。在540nm波长处测定紫色溶液的吸光度(A),再根据标准曲线进行浓度换算,即得到给药后不同时间的血药浓度值。采用残数法求出Cmax,tmax,K,t1/2,V等有关药动学参数,三、试 剂,1.混合试剂。(升汞+硝酸铁) 2.水杨酸标准溶液(500g/
2、ml,四、实验内容,1.血清水杨酸标准曲线的制作 取刻度离心管5只,各加入空白血清0.5ml,依次加入水盐酸标准液0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml,各加蒸馏水至2.0ml,加入混合试剂4.0ml,振摇混合,离心10min,分离上清液。测定吸收度,并以2ml蒸馏水加4ml混合试剂作空白对照。在540nm处测定上清液的吸收度(A,2.血药浓度测定,1)实验家兔的准备及给药方法 体重2.53kg,耳完整无缺,静脉清晰,血流通畅无阻滞的健康家兔 ,提前12h禁食 口服片剂剂量为50100mg/kg 给药时,二人协作,一人坐好,将兔躯干体夹于两腿之间,左手握住双耳,固定头部,右手抓住前肢,另一
3、人将开口器横放于兔口中,将舌压在开口器下面,固定开口器,用镊子夹住药片,从开口器洞孔送入咽部,用20ml水冲服下,2)实验家兔取血时间和方法,取血时间:给药后,在0.25 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 4 5 7 9h分别取兔耳静脉血2ml 取血方法 :家兔耳静脉切口法 固定家兔,在兔耳静脉处剪毛,用酒精棉球擦洗,并用手弹打耳根部,使局部充血,用手术刀片在耳缘静脉远心端进行横切,滴血取血样1.52ml。取血毕,用干棉球压住出血口数分钟即可止血,下次取血时,可在原刀口出进行。,出血太慢时,可用二甲苯涂擦兔耳,使其充血,3)分离血清及测定,将血样置于室温下,1030min凝血,若室温在10以下,可将血样置于37水浴中或孵箱内保持2h左右,加速血清渗出,待血清渗出后,离心(2500转/min),分离上清液(血清)。 吸取血清0.5ml置试管中,按实验内容1从各加蒸馏水至2.0ml起操作,在540nm处测定上清液的吸收度A,并在标准曲线方程计算出水杨酸的浓度,五、实验数据处理,1.作图:在座标纸上以血药浓度-时间描点作图。 2.用线性回归法法求出口
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