张玉梅《医学微生物学》革兰染色实验2015_第1页
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文档简介

1,实验室七 革兰染色 Gram Stain,一、原理,1、原理,鉴别染色法,于1884年由丹麦医师Gram创立,G:肽聚糖层较薄,交联度低,含较多脂质,用乙醇等有机溶剂脱色时类脂质融解,增加了细胞的通透性,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫和碘复合物溶出,呈复染后的红色。 G:细胞壁厚且结构交联致密,用脱色剂处理时,肽聚糖层孔径缩小,且不含类脂,通透性降低,结晶紫和碘复合物牢固结合在细胞壁上,呈初染时的紫色,初染-媒染-脱色-复染,3,初染:结晶紫1分钟,水冲甩干; 媒染:卢戈氏碘液1分钟,水冲甩干; 脱色:95%酒精30秒钟,水冲甩干; 复染:稀释复红1分钟,水冲甩干,涂片,干燥,固定,染色,镜检,二、步骤,4,三、结果,鉴别细菌,指导临床用药,研究细菌的致病性,四、意义,6,革兰氏染色成败与否与许多因素有关 1、菌龄 2、涂片厚薄 3、脱色时间(最为关键

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