消化道寄生虫的病原检查

1、第十九节 消化道寄生虫的病原检查,注意： 保证粪便新鲜，一般不超过24小时 盛粪便的容器须干燥、洁净，无污染； 容器外贴有标签， 受检粪量一般为510g，或不少于30g， 要严格按照粪检程序进行操作，以免漏检,1. 直接涂片法 用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法简便，连续作3次涂片，可提高检出率。 （1）蠕虫卵检查：滴一滴生理盐水于洁净的载玻片，用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便块，在生理盐水中涂抹均匀；涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜。一般在低倍镜下检查，如用高倍镜观察，需加盖片。应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵内含卵细胞

2、或幼虫,2）原虫检查 活滋养体检查：涂片应较薄，方法同查蠕虫卵。气温愈接近体温，滋养体的活动愈明显。必要时可用保温台保持温度。 包囊的碘液染色检查：直接涂片方法同上，以一滴碘液代替生理盐水。如碘液过多，可用吸水纸从盖片边缘吸去过多的液体。若同时需检查活滋养体，可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液，取少许粪便在碘液中涂匀，再盖上盖片。涂片染色的一半查包囊；末染色的一半查活滋养体,二、厚涂片透明法（改良加藤法） 取约5mg（已用100目不锈钢筛除去粪渣）粪便，置于载玻片上，覆以浸透甘油孔雀绿溶液的玻璃纸片，轻压，使粪便铺开（2025mm）。置于3036温箱中约半小时或25约1小时。待粪膜稍干，即

3、可镜检。 玻璃纸准备：将玻璃纸剪成2230mm大小的小片，浸于甘油孔雀绿溶液（含纯甘油100ml、水100ml和3孔雀绿1ml的水溶液）中，至少浸泡24小时，至玻璃纸呈现绿色。 使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。如粪膜厚，透明时间短，虫卵难以发现；如透明时间过长，则虫卵变形，也不易辨认,定量透明法 适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数。此法系应用改良聚苯乙烯作定量板，大小为40301.37mm，模孔为一长圆孔，大小为84mm，两端呈半圆形，所取的粪样平均为41.7mg。操作时将大小约44cm的100目尼龙网或金属筛网覆盖在粪便标本上，自筛网上用刮片刮取粪便，置定量板于载玻片上，用一手的两

4、指压住定量板的两端，将刮片上的粪便填满模孔，刮去多余粪便。掀起定量板，载玻片上留下一个长形粪样，然后在粪条上覆盖含甘油孔雀绿溶液的大小约为5.02.6cm的玻璃纸条，展平后加压，使玻璃纸下的粪便铺成长椭圆形。经12小时粪便透明后置镜下计数。将所得虫卵数24，再乘上述粪便性状系数，即为每克粪便虫卵数,三、浮聚法：利用比重较大的液体，使原虫包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面。常用的方法有两种： （1）饱和盐水浮聚法：此法用以检查钩虫卵效果最好。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于漂浮杯（高3.5cm，直径约2cm的圆形直筒瓶）中，加入少量饱和盐水调匀，再慢慢加入饱和盐水到液面略高于瓶口，但不溢出为止。此时在

5、杯口覆盖一载玻片，静置15分钟后，将载玻片提起并迅速翻转，镜检,2）硫酸锌离心浮聚法：此法可用于检查原虫包囊，球虫卵囊和蠕虫卵。取粪便约1g，加1015倍的水，充分搅碎，按离心沉淀法过滤，反复离心34次，至水清为止，最后倒去上液，在沉渣中加入比重1.18的硫酸锌液（33的溶液），调匀后再加硫酸锌溶液至距管口约1cm处，离心1分钟。用金属环取表面的粪液置于载玻片上，加碘液一滴，镜检,3）蔗糖离心浮聚法：此法适用于检查粪便中隐孢子虫的卵囊。取粪便约5g，加水1520ml，以260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤液离心510分钟，吸弃上清液，加蔗糖溶液（蔗糖500g，蒸馏水320ml，石炭酸6.5ml）

6、再离心，然后如同饱和盐水浮聚法，取其表液膜镜检（高倍或油镜）。卵囊透明无色，囊壁光滑，内有一小暗点和发出淡黄色的子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大，常紧贴于盖片之下，但1小时后卵囊脱水变形不易辨认，故应立即镜检。也可用饱和硫酸锌溶液或饱和盐水替代蔗糖溶液,浓聚法,1沉淀法：原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底，有助于提高检出率。但比重较小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。 （1）重力沉淀法：取粪便2030g、加水成混悬液，经金属筛（4060孔）或2、3层湿纱布过滤，再加清水冲洗残渣；过滤粪液在容器中静置25分钟，倒去上液，重新加满清水，以后每隔1520分钟换水一次（34次），直至上液清晰

7、为止。最后倒去上液，取沉渣作涂片镜检。如检查包囊，换水间隔时间宜延长至约6小时换一次,2）离心沉淀法：将上述滤去粗渣的粪液离心（15002000rpm/min）12分钟，倒去上液，注入清水，再离心沉淀，如此反复沉淀34次，直至上液澄清为止，最后倒去上液，取沉渣镜检,3）醛醚沉淀法： 置粪便12g于小容器内，加水1020ml调匀，将粪便混悬液经2层纱布（或100目金属筛网）过滤，离心（2000rpm/min）2分钟；倒去上层粪液，保留沉渣，加水10ml混匀，离心2分钟；倒去上液，加10甲醛7ml。5分钟后加乙醚3ml，塞紧管口并充分摇匀，取下管口塞，离心2分钟，即可见管内自下而上分为4层。取管底

8、沉渣涂片镜检。如检查原虫包囊，可加卢戈氏液染色，加盖片镜检,六、钩蚴培养法 钩虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫。如冷开水约1ml于洁净试管内（110cm），将滤纸剪成与试管等宽但较试管稍长的T字型纸条，用铅笔书写受检者姓名或编号于横条部分。取粪便约0.20.4g，均匀地涂抹在紧竖条纸条的上部23处，再将纸条插入试管，下端浸泡在水中，以粪便不接触水面为度。在2030条件下培养。培养期间每天沿管壁补充冷开水，以保持水面位置。3天后肉眼或放大镜检查试管底部。钩蚴在水中常作蛇形游动，虫体透明。如未发现钩蚴，应继续培养观察至第5天。气温太低时可将培养管放入温水（30左右）中数分钟后，再行检查,五、肛

9、门拭子检查法 适用于在肛周产卵（蛲虫），或常在肛门附近发现带绦虫的虫卵检查。 1棉签拭子法：先将棉签浸泡在生理盐水中，取出时挤去过多的盐水，在肛门周围擦拭，随后将棉签放入盛有饱和盐水的试管中，用力搅动，迅速提起棉签，在试管内壁挤干盐水后弃去，再用饱和盐水法，覆盖一载玻片，5分钟后取载玻片镜检,2 可将擦拭肛周的棉签放在盛清水的试管中，经充分浸泡，取出，在试管内壁挤去水分后弃去。试管静置10分钟，或经离心后，倒去上液，取沉渣镜检。 3透明胶纸法：用长约6cm，宽约2cm的透明胶纸粘擦肛门周围的皮肤，取下胶纸，将有胶面平贴玻片上，镜检,八、淘虫检查法 为考核驱虫疗效，常需从粪便中淘取蠕虫进行鉴定与计数。取患者服药后2472小时的全部粪便，加水搅拌，用筛（40目）或纱布滤出粪渣，经水反复冲洗后，倒在盛有清水的大型玻皿内。检查混杂在粪渣中的虫体时，应在玻皿下衬以黑纸,带绦虫孕节