外科学教学课件：输血相关血清学检测及诊断

1、输血相关血清学检测及诊断,Part I 输血相关血清学检测的历史与重要性Part II 输血相关血清学检测Part III 输血相关血清学诊断,Contents,Part I 输血相关血清学检测的历史与重要性,划时代的发现,1900年,Part I 输血相关血清学检测的历史与重要性,6.14,1930年诺贝尔生理和医学奖,纪念血型之父 Karl Landsteiner,Part I 输血相关血清学检测的历史与重要性,Part II 输血相关血清学检测,血型： 红细胞血型-存在于红细胞膜表面的特异性的同种抗原。 血小板血型-存在于血小板膜表面的特异性的同种抗原。 不规则抗体：通常指抗A、抗B、抗

2、AB以外的红细胞血型抗体,重要概念,Part II 输血相关血清学检测,ABO和Rh血型,红细胞血型 -ABO血型：A、B、H三种多糖抗原形成四种血型，长三角A、B、O各30%左右，AB10% -Rh血型：D、C、c、E、e五种蛋白抗原,D、C、c、E、e,红细胞膜,RhD阳性：99.6 RhD阴性：0.4,ABO血型及频率,Rh血型及频率,各种ABO血型个体的血清与红细胞,定型原理,血凝试验-特异性抗体和有相应抗原的红细胞在液体或固体介质中发生肉眼可见的凝集反应,Robert Royston Amos (Robin) Coombs. （1921-2006,血型抗体不仅有IgM类型的抗体，还有

3、IgG类型的抗体,红细胞不规则IgG抗体鉴定 Coombs试验,Part II 输血相关血清学检测,抗球蛋白试验(Coombs test)检测IgG抗体的原理,血凝试验和coombs试验 奠定了现代血型血清学检测的基础 血型鉴定和不规则抗体检测 是输血相关检测的两大重要内容,增强IgG抗体检测敏感度的方法,1.凝胶法（柱凝集法） 2.使用增强剂 3.酶法,PEG,抗体筛选细胞的应用,交叉配血,定义：用受血者血清与供血者红细胞（主侧）以及受血者红细胞与供血者血清（次侧）交叉配血,盐水、抗人球、 聚凝胺三种介质配血,热放散法,酸放散法,化学/有机试剂放散法,血小板抗体检测 固相红细胞吸附技术,Pa

4、rt II 输血相关血清学检测,针对血小板输注无效是否存在同种免疫性因素，可检测血小板抗体,哪些临床情况影响血型鉴定,不符合孟德尔遗传的ABO血型,什么情况下做输血相关血清学检测,输血前后： 手术（血型+抗筛+交叉配血） 贫血 （血型+抗筛+交叉配血） 妊娠（血型+抗筛+抗体效价+血小板抗体检测） 血型相关的免疫反应（血型+coombs/血小板抗体检测,Part III 输血相关血清学诊断,AIHA红细胞破坏的方式,一）血管外破坏 WAIHA、药物性溶贫,AIHA红细胞破坏的方式,二）血管内破坏,AIHA患者需要做Coombs试验,AIHA的常用抗体放散方法,间接抗人球结果,血清中的自身抗体的

5、反应格局 抗体检出比例 使用更敏感方法后的检出比例,DAT阳性的AIHA的血清学特征,CAD患者在做Coombs试验时，可检出冷凝集素,1/3WAIHA患者存在室温下反应的冷凝集素 WAIHA患者血浆中的37 oC反应的IgM凝集素,冷热溶血试验是诊断PCH 的重要实验室依据 D-L抗体：7s IgG冷反应性抗体 37时 20以下时 温度再次升高后,AIHA的输血决策,WAIHA患者： 对于存在急性溶血表现的患者 没有明显的溶血表现且存在重度贫血的患者,CAD患者的输血： 应尽量减少冷反应性自身抗体的干扰，检出具有临床意义的同种抗体 保温输注，并严密监控,PCH患者的输血： PCH成年患者 P

6、CH患儿 罕见的p表型红细胞仅在对随机献血者血液输注无效的患者中考虑,HTR的血清学诊断,HTR( hemolytic transfusion reactions):溶血性输血反应 当临床发现溶血症状时，必须进行coombs试验 输血史？ 输血前后血样检测，DAT+需进行放散试验 检测患者和供者相应的红细胞抗原,HSCT患者的相关血清学检查,HPCs缺乏ABO抗原 ABO血型相容不是HSCT的必要条件 但ABO及其他血型不合的HSCT会给其输血治疗造成困难,AABB TM,18th,主侧ABO不相容的HSCT 受者移植前抗-A、抗-B效价检测 HSCT中RBC的量 受者移植后抗-A、抗-B持续

7、存在对红系发育的影响,次侧ABO不相容的HSCT 使用乏血浆的供者HSC 移植后5-16天易产生“过路淋巴细胞综合征” 需要监控是否发生AHR,必要时进行治疗性红细胞单采,在围移植期患者ABO血型转化过程中，给予ABO配血相合的RBC及非红制品，必要时给予洗涤O型RBC和AB型非红制品 Rh(D)抗原的免疫原性很强，因此RhD不合的HSCT均只能输注RhD阴性RBC SHCT患者需要输注辐照的细胞类血液制品，预防发生GVHD,血小板输注相关血清学检测,针对： 胎儿及新生儿免疫性血小板减少症： FNAIT和ITP 免疫性血小板输注无效：PTR 输血后紫癜：PTP,20%-70%反复输注血小板的患

8、者会发生血小板输注无效（PTR） 其中同种免疫因素是产生血小板抗体,90,血小板抗体引起的输血反应,血小板抗体阳性与输血次数成正比，输血次数在10次以上，抗体阳性率高于50,国内血液成份输血反应统计,血小板,PTR： 由血小板HLA-I抗原（HLA-A,B,C,占50%-90%）和少数HPA抗原(占17%-25%)引起的，HPA抗体多与HLA抗体同时存在 白人：HPA-1a主要，其次HPA-1b、5b、2b 日本人：HPA-2b主要 ABO血型系统 PTP: 主要由HPA-1a引起的（占80%-90%），HPA-1b，HPA-3b，HPA-15也会引起PTP 国人：,检测到的抗体特异性,同种免疫性PTR患者的血小板选择,对检出血小板抗体阳性的患者需要输注血小板时，国际上使用CREG相同的配型策略进行血小板的选择，以提高血小板输注疗效 CREG:Cross Reactive Epitope Group，交叉反应组,放射免疫扩散法（RID） 被动血凝试验（PHA） 被动血凝抑制试验（PHIA） 固相红细胞粘附试验（SPRCA) (速率)散射比浊法(rate) nephelometry ELISA法,IgA同种免疫的特异性检测,血浆输注相关血清学检查,Fung MK., Grossman BJ., Hillyer CD. et al. Technical Manual. 18th