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文档简介
1、专题2微生物的培养与应用(时间90分钟满分100分)一、选择题(本题包括20小题,每小题2.5分,共50分)1要从多种细菌中分离出金黄色葡萄球菌,培养基要用()A固体培养基 B液体培养基C加入青霉素的培养基 D加入高浓度食盐的培养基2对无菌操作转接培养物的叙述,正确的是()接种环在火焰上灼烧灭菌在火焰旁冷却接种环,并打开棉塞打开棉塞的试管口通过火焰将已冷却的接种环伸入菌液,蘸取一环菌液转移到一装有无菌培养基的试管中将试管口塞上棉塞接种环进行消毒A B C D3在平板划线操作中,错误的是()A将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红 B将烧红的接种环在火焰旁边冷却C接种环在平板上划线位置是随机的
2、D在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰4在接种操作的过程中,不正确的是()A要将接种环灼烧灭菌 B取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C将接种环伸入试管内,先接触长菌多的部位 D接种后还要将管口灭菌加塞5下列说法正确的是()A为微生物的生长繁殖提供营养基质的是固体培养基B培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的菌落6巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒,该消毒法就是加热到7075、保持30 min,或加热到80、保持15 min,能杀死一般杂菌和病原菌。与灭菌的要求相比,巴氏消毒法()A不能杀灭芽孢等耐高温的
3、细菌 B能杀灭芽孢等休眠状态的细菌C能杀灭各种细菌,包括芽孢 D能杀灭各种真菌,包括孢子7制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中,关于倒平板的具体描述正确的是()等培养基冷却至40左右时,在酒精灯火焰附近倒平板将灭过菌的培养皿放在桌面上,左手拔出棉塞右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰用左手的拇指和食指打开皿盖右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿,左手立即盖上皿盖等待平板冷却 510 s,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上A B C D8给无氮培养基接种土壤稀泥浆的方法是()A打开培养皿盖,取一根接种环沾取少许稀泥浆,轻轻地点接在培养基的表面上B取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后沾取少许稀泥浆,略微打开
4、培养皿盖,在培养基的表面轻点C打开培养皿盖,取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后沾取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点D略微打开培养皿盖,取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌,冷却后沾取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点9在对纤维素分解菌进行选择培养时,用液体培养基的目的是()A可获得大量菌体 B纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C可以充分利用培养基中的营养物质 D可获得高纯度的纤维素分解菌10用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。原因是()A平板上的一个菌落就是一个细菌B菌落中的细菌数是固定的C此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D此方法统计的菌
5、落数一定与活菌的实际数相同11若某一稀释度下,平板上生长的平均菌落数为80,涂布平板时所用的稀释液体积为0.1 mL,稀释液的稀释倍数为106,则每克样品中的活菌数约为()A8108 B8107 C8105 D810612微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是()AC1酶和Cx酶 BC1酶和葡萄糖苷酶CCx酶和葡萄糖苷酶 DC1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶13反刍动物能以富含纤维素的草料为食,是因为它们有特殊的器官瘤胃,瘤胃中生活着许多微生物,其中有一些微生物能分解纤维素,反刍动物胃内这些分解纤维素的微生物的代谢类型最可能是()A自养需氧型 B异养厌氧型 C异养需氧型 D自养厌氧型14要将能分解
6、纤维素的细菌从土壤中分离出来,应将它们接种在()A加入伊红美蓝的鉴别培养基上 B含有蛋白胨的固体培养基上C只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上 D含四大营养要素的培养基上15微生物(除病毒外)需要从外界吸收营养物质,并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法,正确的是()A纤维素分解菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B在纤维素分解菌生长的培养基中只需碳源、氮源、水、无机盐即可正常生长C培养基中的营养物质浓度越高对微生物的生长越有利D生长因子是微生物生长必需的,而微生物本身合成这些物质的能力往往不足16将配制好的培养基进行灭菌应用()A灼烧灭菌 B高压蒸汽灭菌 C干热灭菌 D
7、煮沸灭菌17下列选项中,不是使用选择培养基培养微生物的目的的是()A除去其他微生物 B使需要的微生物大量繁殖C通过表现特殊性状,与其他微生物相区别 D可以增加要培养的微生物的浓度18关于选择培养正确的是()A可以增加纤维素分解菌的浓度 B可以减少纤维素分解菌的浓度C所用培养基是固体培养基 D选择培养不可以省略,但可以重复操作19能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()ACO2和N2 B葡萄糖和NH3 CCO2和尿素 D葡萄糖和尿素20下列关于四种生物的能源、C源、N源和代谢类型的描述,其中正确的一组是()硝化细菌乳酸菌酵母菌衣藻能源氧化NH3分解乳酸固定N2利用光能C源CO2糖类糖类CO
8、2N源NH3N2N2NO代谢类型自养需氧型异养需氧型异养需氧型自养需氧型A.硝化细菌、乳酸菌 B乳酸菌、酵母菌C酵母菌、衣藻 D硝化细菌、衣藻二、简答题(本题共4小题,共50分)21(11分)下表是某种培养液成分含量表。请据表回答:编号成分NH4HCO3KH2PO4CaSO4FeCl2维生素H2O含量0.5 g3.0 g0.5 g0.5 g少许100 mL(1)若用于培养微生物,该培养液中有_类营养物质,可培养的微生物的同化作用类型是_。(2)此培养液若用来培养自生固氮微生物,则应除去的成分是_,应加入的物质是_。(3)若用该培养液进行植物的无土栽培,则_(能或不能)成功,原因是_。(4)若用
9、该培养液培养纤维素分解菌,应加入的物质是_,为检测纤维素分解菌的存在与否,还应加入_,将呈_反应。22(12分)某同学为了从土壤中分离得到纤维素分解菌,进行以下操作:第一步:土壤取样。用小铁铲和普通信封将土取回,然后倒入一烧瓶中,加蒸馏水稀释,塞好棉塞。第二步:制备培养基纤维素粉5.0 g,NaNO31.0 g,Na2HPO47H2O1.2 g,KH2PO40.9 g,MgSO47H2O0.5 g,KCl0.5 g,酵母膏0.5 g,水解酪素0.5 g。待其他物质溶解后,加水定容到1 000 mL。第三步:菌悬液涂布平板。用接种环取少量土壤稀释溶液在以上培养基表层涂布。第四步:培养观察。把接种
10、好的培养皿放到35的恒温箱中培养12 d,观察并记录菌落的生长情况。根据以上实验操作,完成下列题目:(1)找出该同学明显的操作错误。_。(2)要想增加该实验的说服力,还应该怎么做?_。23(13分)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如下图所示,为土壤样品。请回答下列问题:(1)中培养目的菌株的选择培养基中应加入_作为碳源,中不同浓度碳源的培养基_(A.影响;B.不影响)细菌的数量。如果要测定中活细菌数量,常采用_法。(2)为对照,微生物在中不生长
11、,在中生长,与培养基的主要区别在于_;使用_法可以在上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养是为了_。(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?_。(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染?_。24(14分)某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题:(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选_,这种培养基属于_培养基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是_。(3
12、)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量_的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量_。(4)转为固体培养时,常采用_的方法接种,获得单菌落后继续筛选。(5)若研究“目的菌”的生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用_的方法进行计数,以时间为横坐标,以_为纵坐标,绘制生长曲线。(6)实验结束后,使用过的培养基应该进行_处理后,才能倒掉。专题2微生物的培养与应用1D2.C3C接种环灼烧及接种前后试管口要通过火焰,其目的是为了防止杂菌污染,将接种环先冷却再接种可以避免高温烫死菌种,因此A、B、D都是正确的。在平板上划线时,要划三至五条平行线,而不是随机划线,因此C选项错误。4C5D培
13、养基是微生物生长繁殖的营养基质,根据培养基的物理性质不同,可将培养基分成固体培养基、液体培养基和半固体培养基;液体培养基不加凝固剂。6A由于酒、奶等食品中的某些成分在高温下易被破坏,不易采取高温灭菌法,虽然巴氏消毒法不能杀灭芽孢等耐高温细菌,但由于奶、酒等的污染并不严重,巴氏消毒法还是能达到消毒要求的。7C培养基冷却至50左右,在酒精灯火焰附近倒平板;将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿盛有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞;用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不是打开皿盖;等待平板冷却510 min,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上。改正后的步骤为倒平板的具体操作。8
14、D接种过程中要防止外来杂菌的入侵,左手将培养皿打开一条缝隙,右手将接种环在火焰上灭菌,冷却后沾取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点,否则用未冷却的接种环沾取稀泥浆会杀灭菌种。9A不同物理形态的培养基其作用不一样,固体培养基用于菌种的分离、鉴定、菌落计数、菌种保藏等;液体培养基可用于获得大量菌体。10C11A每克样品中的活菌数(800.1)106。12A纤维素酶属于复合酶,至少包含C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种组分。其中C1酶和Cx酶使纤维素分解成纤维二糖。13B反刍动物的瘤胃中缺氧,其中分解纤维素的微生物的代谢类型最可能是异养厌氧型。14C要把纤维素分解菌从土壤中分离出来,就要选择使纤维素分解菌能
15、生存,但其他微生物不能生存的选择培养基进行培养,其选择条件是以纤维素粉作为唯一碳源,在该培养基上,只有能分解纤维素的细菌能够生存,其他微生物因不能利用纤维素而不能生存。15D纤维素分解菌是异养型微生物,其碳源为有机物,如纤维素等。硝化细菌是自养型微生物,其碳源物质为CO2,因此A错误;纤维素分解菌的培养基中需加入维生素做生长因子,才能正常生长,因此B错误;培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水,将出现失水过多而死亡的现象,对生长不利,因此C错误。16B17.C18A选择培养是增加纤维素分解菌的浓度,所用培养基是液体培养基,以便于下一步的稀释操作。19D能合成脲酶的微生物可以分
16、解尿素,所以氮源为尿素;而这种微生物为异养生物,所以其碳源为含碳有机物葡萄糖。20D本题考查的知识有:各种微生物的代谢类型,微生物所需的能源、碳源和氮源的不同。解答此题时应明确:硝化细菌、乳酸菌属于细菌,酵母菌属于真菌,衣藻属于真核生物。微生物所需的能源、碳源、氮源因其同化作用类型的不同而不同。21(1)五自养型(2)不含氮的有机物(3)不能必需矿质元素种类不全(4)纤维素粉刚果红红色解析(1)分析该培养基中的营养要素,NH4HCO3可提供碳源和氮源,可提供无机盐,提供生长因子,还有H2O,所以培养基中含有五类营养物质,其中不含有机碳源,可培养的微生物的同化类型为自养型。(2)要选择培养独立生
17、存的固氮微生物,培养基中不应添加氮源,所以应把NH4HCO3除去,而一般的固氮微生物同化类型为异养型,所以培养基中应添加不含氮的有机物。(3)用于植物无土栽培的营养液应为完全营养液,即包含植物生长所必需的所有大量及微量元素,而本培养液中矿质元素不全,如缺乏Mg、Zn、Cu、Mn、Mo、B等,所以不能用于无土栽培。(4)若培养纤维素分解菌,最好加入纤维素粉;检测纤维素分解菌是否存在常用刚果红染色法,所以应在培养基中加入刚果红,形成红色复合物。22(1)第一步:取样工具应提前灭菌;不能用蒸馏水,应用无菌水;土壤取回后的操作应在火焰旁进行。第二步:培养基制备好后应灭菌。第三步:接种应在无菌条件下进行
18、,应用灭菌的吸管或移液器取稀释液(2)一是设置对照实验:再配制一组无纤维素粉的培养基,接种该土样培养观察。二是最后要对菌落进行鉴定:用刚果红染色法鉴定菌落周围是否出现透明圈解析从土壤中分离微生物一般的流程是:土壤取样选择培养梯度稀释菌悬液涂布平板挑选出单个菌落。该实验步骤没有问题,但在前三步操作中都没有进行无菌操作,因而无法说明分解纤维素的微生物一定来自于土壤。要想增强实验的说服力,设置对照实验必不可少。另外,该实验应再加一步该微生物的鉴定步骤。23(1)苯酚A稀释涂布平板(2)的培养基没有加入苯酚作为碳源,培养基中加入苯酚作为碳源稀释涂布平板法或平板划线防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基(3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株,一定时间后,测定培养液中苯酚的含量(4)培养基灭菌,接种环境灭菌,接种过程无菌操作解析根据菌株的特点和筛选要求,在培养基中加入或不加某些物质以达到促进
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