小白鼠缺氧耐受性试验

1、小白鼠几种类型的缺氧,辽宁医学院,叶丽平,相关知识复习,?,缺氧的概念,?,缺氧的分类及各类的缺氧机制,5.,细胞内氧化代谢,外呼吸,气体运输,内呼吸,缺氧类型,乏氧性,血液性,循环性,组织性,供氧,用氧,实验目的,?,复制,乏氧性,、,血液性,和,组织性,缺氧,动物模型，掌握缺氧的分类；,?,观察不同类型缺氧时,呼吸、皮肤粘膜颜色,的变化，了解,解救措施；,?,了解,成年、新生小鼠,对,缺氧耐受性的差异,，,并分析机制。,实验动物,?,成年小白鼠（,7,只）,?,新生小白鼠（,1,只）,单独放置,实验器材和药品,缺氧瓶,+,软胶塞，,CO,中毒瓶,+,解救瓶、烧杯,钠石灰，铁纱网，,镊子，注

2、射器，,氧气，,CO,，,5,亚硝酸钠, 1,美兰,0.1,氰化钾, 10,硫代硫酸钠,，生理盐水,实验步骤,?,乏氧性,缺氧,?,?,?,?,一氧化碳中毒性,缺氧,亚硝酸钠中毒性,缺氧,氰化物中毒性,缺氧,动物尸检,1.,乏氧性缺氧,成年,小白鼠,新生,小白鼠,步骤,1,观察正常状态,一般指标,(,呼吸频率,口唇颜色,),步骤,2,缺氧瓶,+,钠石灰,+,成年鼠,+,铁网包裹乳鼠,观察,指标,呼吸频率,(,次,/10,秒,每隔,3,分钟观察,),、,口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色,?,呼吸频率观察小白鼠,腹部的起伏,?,实验中尽量,减少对小白鼠的刺激,2.,CO,中毒性缺氧,小白鼠,A

3、(,中毒,),步骤,1,步骤,2,步骤,3,步骤,4,观察,指标,小白鼠,B(,中毒解救,),观察正常状态，一般指标,放入,中毒瓶,注入,3 ml,CO,放入,中毒解救瓶,注入,3 ml,CO,软瘫后立即输入,O,2,呼吸频率,(,次,/10,秒,每隔,3,分钟观察,),，,口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色,3.,NaNO,2,中毒性缺氧,小白鼠,A(,中毒,),步骤,1,小白鼠,B (,中毒解救,),分别用烧杯罩住，观察正常状态及一般指标,背部皮下注射,0.3ml NaNO,2,步骤,2,背部皮下注射,0.3ml NaNO,2,步骤,3,腹腔注射,0.3ml,生理盐水,腹腔注射,0.3ml

4、 1,美兰,观察,呼吸频率,(,次,/10,秒,每隔,3,分钟观察,),指标,口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色,防止美兰沾到身体、衣物及地面,4.,氰化物,中毒性缺氧,小白鼠,A (,中毒,),步骤,1,小白鼠,B (,中毒解救,),分别用烧杯罩住，观察正常状态一般指标,背部皮下注射,0.3ml KCN,步骤,2,背部皮下注射,0.3ml KCN,步骤,3,观察,指标,腹腔注射,0.4ml,生理盐水,腹腔注射,0.4ml,Na,2,S,2,O,3,呼吸频率,(,次,/10,秒,每隔,3,分钟观察,),口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色,防止,KCN,沾到身体、衣物及地面,动物尸检,观察对象,

5、实验,1,、,2,、,3,、,4,中的小鼠,观察指标,1,皮肤颜色,观察指标,2,肝脏颜色（剖腹）,血液颜色,实验结果,缺氧类型,缺氧前,皮肤口,R,(,次,/10,秒,),唇颜色,缺氧后,3,6,9 ,存活,时间,肝脏,颜色,乏氧性缺氧,成,幼,A,CO,中毒,B,A,NaNO,2,中毒,B,A,KCN,中毒,B,三通管的使用,腹腔注射,图,2,小白鼠的腹腔注射,鼠头朝下,针头倾斜,45,度,不要太靠近中线,针头尖向下,避开肝脏和膀胱,?,?,?,?,?,皮下注射,实验结果,缺氧类型,乏氧性,缺氧,CO,中毒,NaNO,2,中毒,KCN,中毒,成,幼,A,B,A,B,A,B,缺氧前,R(,次

6、,皮肤口,/10,唇颜色,秒,),缺氧后,3,6,9,存活,时间,肝脏,颜色,实验分析,一、乏氧性缺氧,1.,2.,钠石灰有何作用？,成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？,3.,4.,小白鼠呼吸频率有何变化？为什么？,小白鼠是否出现发绀？什么叫发绀,?,1.,钠石灰,=,CaO+NaOH,吸收,CO,2,消除,CO,2,对实验的影响,2.,成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？,幼鼠,新陈代谢低，耗氧量少,，相对成鼠需氧量少；,幼鼠呼吸中枢发育不完善，对,缺氧不敏感,；,幼鼠,Hb,含量高,，相对不易缺氧；,幼鼠主要,靠糖酵解供能,，成鼠主要以有氧呼吸供能，,故幼鼠需氧少。,3.,呼吸频率变化,先加

7、快，后减慢，最后死亡,PaO,2,PaO,2,颈动脉体,化学感受器,(+),主动脉体,呼吸中枢,(+),，呼吸深快,呼吸中枢,(-),呼吸减慢,4.,乏氧性缺氧时，毛细血管中,氧合,Hb,减少，脱氧,Hb,浓度增,多超过,5g/dL,以上，可使皮肤,与粘膜呈青紫色，称发绀。,二、,CO,中毒性缺氧,1.,CO,中毒性缺氧属于哪种类型的缺氧,?,2.,什么叫血液性缺氧,?,3.,CO,中毒性缺氧的发生机制是什么,?,4.,樱桃红色是哪种物质的颜色,?,CO,中毒机制,亲和力高,CO,Hb HbCO (,樱桃红色,),失去携氧能力,与,1,个血红素结合，其余对氧亲和力,氧离曲线左移,亲和力,释氧,

8、抑制,RBC,糖酵解，,2,3-DPG,三、,NaNO,2,中毒性缺氧,1.,属于哪种类型的缺氧,?,2.,发生机制是什么,?,3.,注射美兰的小白鼠是否存活，为什么,4.,咖啡色是哪种物质的颜色,?,?,高铁血红蛋白血症,硝酸盐,肠道,细菌,(,棕褐色,),亚硝酸盐,氧化剂,2+,Hb-Fe,3+,Hb-Fe,-,OH,不能,携氧,还原剂,其余,Fe,2+,-O,2,亲和力,氧离曲线左移,释氧,四、,KCN,中毒性缺氧,1.,属于哪种类型的缺氧？,2.,发生机制是什么,?,3.,注射,Na,2,S,2,O,3,的小白鼠是否存活？为什么？,4.,玫瑰红色是怎样产生的,?,-,CN,3+,cytaa,Fe,+,3,cytaa,3,Fe,3+,-,CN,氰化高铁细胞色素氧化酶,cytaa,3,Fe,2+,还原型,氧化型,KCN,与,氧化型细胞色素酶,的三价铁结合为,氰化高铁,细胞色素氧化酶,，使之,不能还原,成还原型细胞色素,氧化酶，呼吸链中断，组织细胞不能利用氧。,3,、存活,机制：,Na,2,S,2,O,3,与,KCN,生成,无毒的硫氰酸钠，随尿液排出体外；,4,、小白鼠皮肤粘膜、肝脏呈玫瑰红色。,因为组织利用氧障碍,毛细血管中的