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文档简介
1、结核分支杆菌培养,讲述内容:一、痰标本的采集二、结核分支杆菌培养操作规程,结核分支杆菌培养是结核病诊断细菌学检验的重要内容之一(另外是“抗酸杆菌涂片检查法”)这里我只讲结核分支杆菌培养。 讲之前我还是要强调下要保护好自己(即生物安全问题)。结核分支杆菌是怎样传播我想你们比我懂,由于时间关系,这里也不展开讲,进入正题,一、痰标本的采集,1、痰标本的种类 根据痰标本采集时间,可将标本分为3类: (1)即时痰:就诊时深呼吸后咳出的痰液; (2)清晨痰:患者晨起立即用清水漱口后咳 出的第2口、第3口痰液; (3)夜间痰:送痰前一日患者晚间咳出的痰液。,2、正确的咳痰方法:,(1)咳嗽前应缓慢的深吸气,
2、吸气后稍屏气片刻。 (2)躯干略向前倾,两侧手臂屈曲,平放在两侧胸壁下部,内收并稍加力。 (3) 咳嗽时腹肌用力快速收缩,使腹壁内陷。一次深吸气可连续咳嗽三声。 (4)停止咳嗽并收缩将剩余的气体尽量呼尽。 (5)在缓慢吸气或平静呼吸片刻,准备再次咳嗽的动作。 (6)勿将漱口水、唾液、呕吐物、鼻咽分泌物等混入痰内,以免影响检验结果。如标本不合格,检验人员应当拒收,并和临床医生对接,重新采样。 (7)标本量一般在35毫升。,3、痰标本的保存和输送,痰标本容器密封,勿倒置,严防痰液外溢。不能立即培养的痰标本,须置4冰箱保存,防止痰液干涸或污染。,二、结核分支杆菌培养操作规程,培养基 酸性改良罗氏(分
3、离培养)目前由州疾控统一购买按任务数配发并4冰箱保存。 1、将培养基从冰箱取出,恢复到室温并在培养管上编培养序号,写上患者姓名、培养日期、痰涂片编号等信息。 2、标本前处理:碱处理法 取2mL痰标本于前处理管中加1-2倍痰标本量的4%NaOH,振荡器上震动30-60s后室温放置10-15min(不得超过20min)。,3、接种方法:取前处理消化后痰液0.1mL,无菌操作接种于培养基斜面上,每份标本同时接种两支酸性改良罗氏培养基,放37孵育。,4、结果与报告,接种后37天观察,此后每周观察一次菌落生长情况,有菌落生长需经抗酸染色确认是否为分支杆菌。若至第8周仍无菌落生长方可报告阴性结果。 分支杆菌培养报告方式 分支杆菌培养阴性:斜面无分支杆菌菌落生长 分支杆菌培养阳性(1+):菌落占斜面面积1/4 分支杆菌培养阳性(2+):菌落占斜面面积1/2,分支杆菌培养阳性(3+):菌落占斜面面3/4 分支杆菌培养阳性(4+)菌落布满全斜面。 5、培养基污染情况报告 在观察分支杆菌生长情况时,发现有非分支杆菌生长,报告污染,重新送
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