分枝杆菌属(人卫7版微生物).ppt

1、Chapter 14 Mycobacterium 分枝杆菌属,General Characteristics,Slender, slightly curved or straight rod-shaped organisms Non-motile Do not form spores,General Characteristics,Cell wall with extremely high lipid content Staining requires longer time or application of heat Once stained, resist decolorization

2、with acid-alcohol (acid-fast) Strictly aerobic Grow more slowly than most bacteria,分枝杆菌属 (Mycobacterium),细长略弯曲的杆菌，有时呈分枝生长趋势，故得名 胞壁含有大量脂质，生长成粗糙型菌落，抗酸染色阳性，又称抗酸杆菌,第一节 结核分枝杆菌（M. tuberculosis),概 述,结核病的病原菌 世界上1/3人感染，70%在亚洲 世界防治结核病日：3月24日,一、生物学性状,Mycobacterium tuberculosis,produces no exotoxins or enzymes

3、that contribute to infectiousness contain complex waxes & other substances that prevent destruction by lysosomes of macrophages transmitted by airborne respiratory droplets only 5% infected people develop clinical disease,Morphology,细长略带弯曲，呈分枝状 齐-尼(Ziehl- Heelsen) 抗酸染色阳性 有荚膜,Culture,strict aerobes L

4、owenstein-Jenson culture medium grow slowly Optimum pH 6.56.8 Rough colony 液体培养基中呈粗糙皱纹状菌膜生长,Acid-Fast (Kinyoun) Staining of Mycobacterium,NOTE: cord growth (serpentine arrangement) of virulent strains,Virulence factors,Organism able to replicate in nonactivated macrophages Can survive for years in d

5、ormant state Pathology depends on hosts response to infection rather than produced by bacterial toxins or enzymes (no toxins associated),主要菌体成分及其作用,无毒素与侵袭性酶类 致病作用主要靠菌体成分，特别是胞壁中所含的大量脂质,1. Lipid,磷脂：促使单核细胞增生，抑制蛋白酶的分解作用，与结核结节的形成及干酪样坏死有关。 脂肪酸： 与细菌的抗酸性染色有关， 其中的6,6-双分枝菌酸海藻糖具有破坏细胞线粒体膜，影响细胞呼吸，抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿

6、的作用。也与结核杆菌索状生长现象有关，故又称为索状因子。,硫酸脑苷脂,6,6-双分枝菌酸海藻糖,脂寡糖,Cord Factor,This is a mycoside (分枝杆菌糖脂) and its presence is responsible for a phenomenon in which individual bacteria grow parallel to each other, forming large serpentine cords. Hence the name, cord factor.,索状因子 (Ziehl-Neelsen染色),WaxD(蜡质D)：是肽糖脂和分枝

7、菌酸的复合物，可激发机体产生迟发型超敏反应，并具有佐剂(ADJUVANT)作用。 硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合，使细菌能在吞噬细胞中长期存活。,2. Proteins,Tuberculin(结核菌素)，和蜡质D结合后能引起较强的delayed hypersensitivity (迟发型超敏反应)，在形成结核结节中发挥一定作用。,3. Polysaccharides 与脂质成分结合存在于胞壁中。 使中性粒细胞增多，引起局部病灶细胞浸润。 多糖抗原是分枝杆菌发生凝聚反应的特异性 表面抗原。,Resistance（四怕）（四不怕）,对脂溶剂敏感（乙醇） 对湿热敏

8、感 对紫外线敏感 对抗结核药物敏感,抗干燥 抗酸 抗碱性染料 对青霉素等抗生素耐药,强,脂质含量高,Variability,可发生形态变异、菌落变异、毒力变异、 耐药性变异 卡介苗（BCG）：减毒活菌苗 耐药变异：多重耐药结核病（MDR-TB） 广泛耐药结核 （XDR-TB）,Extensively drug-resistant tuberculosis,Multi-drug-resistant tuberculosis,Bacillus Calmette-Gurin,Pathogenesis,致病物质,结核分枝杆菌无内毒素，也不产生外毒素和侵袭性的酶类 其致病主要靠菌体成分，特别是胞壁中所含

9、的大量脂质,所致疾病,感染方式 呼吸道、消化道或皮肤损伤等 多途径侵入机体 致病机制： 细菌增殖引起的炎症反应、菌体成分的毒性作用、机体产生超敏反应,Transmission,Infection is acquired through the inhalation of aerosolized infectious particles, which then travel to the terminal airways,（一）肺部感染,Primary Tuberculosis (原发感染) 多发生于儿童 原发综合征(肺门淋巴肿大等) 形成Tubercle 结核结节（即结核肉芽肿），少数病灶扩散

10、，引起全身结核病。 Secondary Tuberculosis 多发生于成人 病灶局限，不易扩散 易发生干酪样坏死和空洞,肺部的原发病灶、淋巴管炎及局部淋巴结炎，统称原发综合征。,“双极”病变 哑铃状阴影,Primary Tuberculosis,结核结节形成过程,原发感染 多发生于儿童 原发综合征( 肺门淋巴肿大等) 形成结核结节（即结核肉芽肿），少数病灶 扩散，引起全身结核病。 Secondary Tuberculosis (原发后感染) 多发生于成人 病灶局限，不易扩散 易发生干酪样坏死和空洞,Reactivation Adult,Secondary Tuberculosis,炎性实体

11、灶(Ghon灶),粟粒性结核病,空洞性结核病,Caseous necrosis 干酪样坏死,（二）肺外感染,结核分枝杆菌可进入血液循环引起肺内、外播散，如脑、肾结核、脊柱结核等。 结核分枝杆菌进入消化道可引起肠结核、结核性腹膜炎等。 大多与结核分枝杆菌L型有关,TB and HIV,HIV testing for TB patients, all countries, 20032010,三、免疫性与超敏反应,Immunity,属胞内感染菌，其免疫主要是细胞免疫（致敏的T淋巴细胞和被激活的巨噬细胞）。 结核的免疫属于传染性免疫，又称有菌免疫。即此种免疫力随结核分枝杆菌或其成分在体内存在而存在。,

12、Hypersensitivity,细胞免疫为主,迟发型超敏反应同时存在。 参与形成干酪样坏死、结核空洞 郭霍现象表明： 再感染时溃疡浅、易愈合、不扩散，表明机体已有一定免疫力。 但再感染时溃疡发生快，说明在产生免疫的同时有超敏反应的参与。 rRNA诱导机体产生特异性免疫，结核菌素和蜡质D诱导机体产生超敏反应。,Tuberculin Test,Definition: Tuberculin is a mixture known as purified protein derivatives (PPD) from TB bacilli. It is a test for delayed type h

13、ypersensitivity. Positive reaction, reddening and thickening ( 5mm) at the site of injection after 2-3 days, indicates cellular immunity to tubercle bacilli.,Tuberculin skin test. Tests for hypersensitivity,Principle,人感染结核分枝杆菌后，产生免疫力的同时也会发生迟发型超敏反应(delayed hypersensitivity)。,应 用,选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种后的免疫

14、效果。结核菌素试验阴性者应接种或补种卡介苗。 在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的流行病学调查,了解人群自然感染率。 作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核病的辅助诊断。 测定机体细胞免疫功能。,结核菌素试剂,旧结核菌素（old tuberculin，OT) 每0.1ml含5单位 纯蛋白衍生物(purified protein derivative，PPD) 人结核分枝杆菌制成的PPD-C 卡介苗制成的BCG-PPD 每0.1ml含5单位,方 法,2种PPD 5个单位两前臂皮内注射 4872h后，红肿硬结超过5mm者为阳性，15mm为强阳性，对临床诊断有意义，两侧红肿中，PPD-C大于BCG-

15、PPD侧为感染，反之，为卡介苗接种所致。,结核菌素试验强阳性,结果分析,阳性反应表明可能感染过TB或接种卡介苗成功。 强阳性反应表明可能有活动性结核病，尤其是 婴儿。 阴性反应表明可能未感染过TB或未接种卡介苗，或处于原发感染早期，超敏反应尚未产生，或正患严重的结核病机体无反应能力，或细胞免疫力功能低下。,三、微生物学检查,分离培养,罗氏培养基 结核分枝杆菌生长缓慢，一般需24周长成肉眼可见的菌落,动物试验,结核分枝杆菌核酸及抗体检测： 早期、快速诊断,NAAT: 全自动核酸扩增试验,Xpert MTB/RIF,Real time-PCR,四、防治原则,预防,接种卡介苗 研制新型疫苗：DNA疫

16、苗等,治疗,抗结核药物的治疗原则：早期、联合、适量、规律、分阶段治疗和坚持全程,DOTS: Directly Observed Treatment, Short-course 直接观察短程治疗法,Directly Observed Therapy (DOT)to assure that medication is actually taken,第三节 麻风分枝杆菌,(Mycobacterium leprae),麻风分枝杆菌,俗称麻风杆菌，引起麻风，是一种慢性传染病。 侵犯皮肤、黏膜和外周神经组织，晚期还可侵入深部组织和脏器，形成肉芽肿病变。 流行广泛，主要分布在亚、非和拉丁美洲。,一、生物学性

17、状,形态、染色与结核分枝杆菌相似 麻风分枝杆菌是一种典型胞内菌 泡沫细胞或麻风细胞 至今唯一仍不能人工培养的细菌,Mycobacterium leprae by acid fast stain.,Mycobacterium leprae,Causes leprosy or Hansens Disease Infection of the skin, mucous membranes and peripheral nerves Most cases are from warm climates Bacteria infect the cooler areas of the body (ears,

18、 nose, eyebrows, fingers, toes) Diagnosis made from finding acid-fast bacilli in scrapings from lesions Not culturable, except in mouse foot pads,Clinical diseases,Tuberculoid leprosy (结核样型麻风) Low infectivity Strong cellular immune response but a weak humoral antibody reponse Lepromatous leprosy (瘤型麻风) Most infectious form Strong antibody response but a specific defect in their cellular res