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文档简介

1、可见分光光度法测定芦丁含量,(1) 掌握可见分光光度计的使用 (2) 了解显色反应基本原理 (3) 掌握标准曲线法测定组分含量的 定量分析方法,一、实验目的:,分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度, 对该物质进行定性和定量分析的方法。,二、实验原理,芦丁又名芸香甙,是维生素P的主要成分之一,属黄酮类化合物,临床上主要用于治疗脑溢血,高血压,视网膜出血等疾病。,芦丁的含量测定主要有高效液相色谱法、紫外分光光度法和可见分光光度法。,实验原理,芦丁分子结构中含有酚羟基和环酮基结构, 能与Al3+生成黄色配合物,在亚硝酸钠的碱性溶液中呈现红橙色,最大吸收波长510nm。,

2、芦丁分子结构:,定量原理:,Lambert-Beers Law,当入射光波长一定时,溶液对光的吸收程度只与溶液浓度和液层厚度有关。,三、实验步骤,四、实验记录:见讲义 五、数据处理及结果: 1.以各标准溶液浓度(mg/ml)为横坐标,各管吸光度值为纵坐标,作图既得标准曲线。 2.根据样品溶液的吸光度查标准曲线得样品稀释后芦丁的浓度, 3.换算求得样品中芦丁的百分含量,实验注意事项: 正确使用刻度移液管,可见分光光度计; 小心使用各种玻璃器皿、比色皿; 正确绘制标准曲线; 实验结束后,清洗自己使用过的试管; 安排值日生打扫实验室卫生。,可见分光光度计使用 (1)检查检测波长是否是510nm (2)先按模式键调到透射比档,把溶液放进仪器内,用空白1号管开盖

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