色谱分析习题及答案(绝对精华)

色谱集成体填补空白：1、氢火焰电离检测器和导热池检测器分别属于_质量型_和_温度_型检测器。 气相色谱仪的心脏是.2 .固定液一般用按照_相似相溶_的原理选择的极性固定液分离极性成分时，分子间力主要是_感应力_，极性越大，保持时间就越长。3 .固定液通常是高沸点的有机化合物，这主要是为了保持固定液在使用温度下更好的热稳定性，防止不可逆的化学反应。5 .毛细管柱比填充柱大，有利于快速分析。 但是，柱容量_较小。在HPLC中，耐高压的六方阀能克服流动相在柱中流动时所受到的阻力7 .气相色谱分析中，载气仅发挥运输作用的液相色谱分析中，流动相直接参与_实际分配过程_中，提高高效液相色谱柱效应的最有效方法是使用_小粒径填料_。8 .分离位置异构体化合物应采用的高效液相色谱分离模式为_梯度溶出_。9、在色谱法中，把埋入玻璃管内不动的相称为固定相，把上下动的相称为移动相，把装有固定相的柱子称为柱。10、液相色谱检测器一般能够使用紫外可见分光光度测定器、荧光检测器的气相色谱检测器，可以使用热传导检测器、氢焰离子检测器、电子捕获检测器等。色谱分析的基础：1、色谱搁板理论的假设？a、(1)在每个平衡的处理间隔，平衡能够迅速达到(2)将载气视为脉动(间歇)过程(3)试样向列方向的扩散可以忽略(4)每次分配的分配系数相同。 (5)所有物质都首先放在零号架子上2、色谱的定性方法是什么？a、(1)保持时间定性(2)相对值保持定性(3)保持指数定性(4)使用化学反应色谱定性(5)不同类型的检测器定性(2)色谱和各种光谱或光谱并用3、内标法定量分析时，内标物的选择是否应该满足这些条件？a样品中不含有该物质与被检测成分性质比较接近与样品没有发生化学反应峰值位置接近被检测成分，并且没有划分峰值的影响4、在色谱分析中，固定相的选择原则是什么？固定相的选择：气相液相色谱应遵循“相似相溶”的原则5、在色谱定量分析中为什么使用校正因子？ 什么时候都可以不用？a :由于各化合物对每个检测器都有不同的响应值，所以即使向色谱中注入相同质量的物质，峰面积也不同，因此要定量峰面积，必须将色谱中得到的峰面积乘以系数，得到该成分的质量。 在实际的分析中，以某种物质为基准得到相对的修正系数被称为“相对修正系数”。不是样品中的所有成分6 .总结色谱的优点。a :色谱的特征(1)分离效率高(2)灵敏度高(3)分析速度快(4)应用范围宽(1)样品的使用量少(2)分离和测定一次性完成(3)自动化容易，可用于工业工艺7、色谱流出曲线可以解决的问题是什么？8、根据你学到的知识，填写下表。色谱分析法基本原理应用领域分析对象缺点气相色谱法液相色谱法气相色谱法1 .气相色谱的基本设备包括那个部分，各自有什么作用？去除载气系载气中的水、有机物等杂质样品装置：柱：色谱仪的核心部件检测系统2 .以塔极高h为指标，研究了气相色谱操作条件的选择。3 .试验速度方程式中a、b、c三项的物理意义。a、涡流扩散项b、纵扩散项c、传递阻力项4 .为什么分辨率r可以用作列的总分离性能指标？5 .能根据理论级数判断分离的可能性吗？ 为什么？6 .对载体和固定液的要求分别是什么？a :载体：化学惰性好的热稳定性一定的机械强度要求有适当的比表面，表面没有深槽，固定液形成均匀的薄膜，因此必须具有大的空隙率，减少柱的压降。 对固定液的要求：分离的样品中各成分具有不同的溶解能力，热稳定性高，与分离的成分不发生不可逆的化学反应。7 .比较红载体和白载体的性能，分别在什么方面使用？答案红色载体适当地分析非极性化合物，白色单体适当地分析极性化合物8 .固定液分为什么种类？为什么要这样区分？ 固定液的选择方法。a :固定液分为：难以因分子力而极化的非极性固定液容易极化的非极性固定液难以氢键的极性固定液受到质子的极性固定液极性别分类用典型化合物对固定液的保持性能来表现固定液的选择原则：“相似相容性”的原则，固定液和被分离物分子间的特殊力，混合物固定液相乘效果选择固定液9 .色谱的定性依据是什么，主要有哪些定性方法？答案根据：保持时间定性方法：保持时间定性的相对保持值定性的保持指数定性的化学反应，色谱定性的不同类型的检测器定性的色谱和各种光谱或光谱并用10 .设想未知的油剂样品，设计气象色谱的分析方法，概述分析过程。液相色谱法：11、正相HPLC和反相HPLC的主要区别是什么？分别适合分离什么物质？a :正相HPLC是以亲水性填料为固定相，以疏水性溶剂或混合物为流动相的液相色谱，主要分离醇类、脂质化合物、磷脂化合物、脂肪酸和其他化合物。所谓反相HPLC，是以强疏水性的填料为固定相，以能与水混合的有机溶剂为流动相的液相色谱，主要用于分离生物高分子、卤化物、肽和蛋白质，包含鲁芳香族烃、小分子的核酸、核苷酸、多环芳香族烃等12、什么是坡度溶出？ 在什么情况下采用梯度溶出？a :梯度洗脱是两种(或两种以上)不同极性的溶剂，在分离过程中有一定程度的连续变化，改变流动相的配比和极性。:具有大k范围的样品和所有成分的色谱峰的k值都不在0.5-20范围内的高分子样品，相对分子质量超过1000，特别是生物样品样品中含有高保持时间的干扰成分，如果不通过一次分析使他溶出，柱就会污染即使使用等度的情况下，也可以使用梯度溶出来选择流动相的比例。液相色谱法中最常用的检测器是什么样的检测器，适合检测这些物质？a :最常用的是紫外可见分光光度测定仪，适合在可见光或紫外光域内测定吸收物质4、某成分为ODS柱，以80%甲醇为流动相时的保持时间为10min，以60%甲醇为流动相时，成分的保持时间是增加还是减少，将80%甲醇换成80%异丙醇的话，会发生什么样的变化呢？5、高效液相色谱的特征：是能够高分离性能、高灵敏度、高分析速度、自动运行6、在一定条件下，两种成分的保持时间分别为12.2s和12.8s，计算分离度。 为了完全分离，R=1.5，必要的柱长。 (已知n=3600 )解：分离度：7、在一定条件下，两种成分的调整保留时间分别为85秒和100秒，完全分离，即达到R=1.5。 计算需要多少个有效的架子。 如果填充柱的架子高度为0.1 cm，柱的长度是多少？解： r21=100/85=1.18n有效=16r2 r21/(r21-1 ) 2=161.52 (1.18/0.18 ) 2=1547 (模块)l有效=n有效h有效=15470.1=155 cm厘米即，柱长为1.55米时，两成分可以完全分离。色谱是一种分离技术，样品混合物的分离过程是样品中各成分在被称为色谱分离柱的两相间持续分配的过程。 其中一相没有固定，被称为固定相的另一相，试料混合物在该固定相中流动的流体(气体或液体)称为流动相。色谱：担载在流动相中的混合物在固定相中流动时，与固定相相互作用。 由于混合物中各成分的性质和结构的不同，与固定相之间产生的力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间反复分配平衡，各成分保持在固定相上的时间不同，因此以一定的顺序从固定相流出。2、色谱分类色谱：气相色谱GC、液相色谱LC、超临界流体色谱SFC2 .色谱分类(1)气相色谱：流动相为气体(称为载气)。根据分离柱的不同，可分为填充柱色谱和毛细管柱色谱。根据固定相的不同，可分为气相色谱和气相色谱(2)液相色谱：流动相为液体(也称为冲洗液)。根据固定相的不同，可以分为液相色谱和液相色谱。离子色谱：一种液相色谱，以特制的离子交换树脂为固定相，以pH不同的水溶液为流动相。(3)其他色谱方法薄层色谱和纸层色谱：比较简单的色谱方法凝胶色谱：测定聚合物的分子量分布。超临界色谱： CO2流动相。3 .色谱的特征(1)分离效率高、复杂的混合物、有机同系物、异构体。 手性异构体。(2)灵敏度高时，可检测出g.g-1(10-6 )级、还有ng.g-1(10-9 )级的物质量。(3)分析速度一般很快，几分钟或几十分钟内就能分析一个样品。(4)应用范围广的气相色谱：沸点低于400的各种有机或无机样品的分析。液相色谱法：高沸点，热不稳定，生物样品的分离分析。不足之处：分离的成分很难定性。二、色谱分离过程色谱的分离过程在柱内进行。柱色谱：气固(液固)色谱和气液(液液)色谱填充，两者的分离机理不同。气固(液固)色谱的固定相：多孔性的固体吸附剂粒子。 固体吸附剂对样品中各成分的吸附能力的差异。气液(液)色谱固定相：由载体和固定液构成。 固定液对样品中各成分的溶解能力的差异。气相色谱分离机理：的吸附和解吸的反复过程气相色谱分离机理：气液(液液)两相间的重复数分钟气相色谱的主要部件1 .载气系统：包括气源、净化干燥管、载气流量控制在内的常用载气为氢、氮、氦。净化干燥管：去除载气中的水、有机物等杂质(依次通过分子筛、活性炭等)。 载气流量控制：用压力表、流量计、针阀稳定阀将载气流量控制在一定值。2 .样品装置：样品装置：样品气化室气体取样器(六方阀):推拉式和旋转式两种。 样品首先被定量管填满，切入后，载气将定量管中的样品气体输送到分离柱的气化室：将液体样品瞬间气化的装置。 没有催化作用。3 .柱(分离柱):柱：色谱的核心部件。 柱材质：不锈钢管或玻璃管，内径36mm。 长度可以根据需要来决定。 柱填料：粒度为60-80或80-100的色谱固定相。 液固色谱：固体吸附剂液液色谱：载体固定液。 柱的制造对柱的效果有很大影响，填充剂填充很紧，柱前压力大，流速慢，或关闭柱，相反空隙体积大，柱的效果低。4 .检查系统：色谱的眼睛通常由检查元件、放大器、显示记录三部分构成的列分离的成分依次进入检测器，根据其浓度和质量的时间变化，转换成电信号，放大记录显示， 提供色谱的检测器：通用型是响应所有物质的专用型是对特定物质有高灵敏度响应的常用检测器：热传导检测器、氢火焰电离检测器5 .温度控制系统：温度是色谱分离条件的重要选择参数气化室、分离室、检测器三部分在色谱操作时需要控制温度的气化室：保证液体样品瞬时气化的检测器：保证分离的成分通过时在此不凝结的分离室：分离样品复杂时，分离室的温度需要以一定的程序控制温度变化，各组以最佳温度分离气相色谱法固定相：1.种类(1)活性炭(2)活性氧化铝(3)硅胶(4)分子筛(5)高分子多孔微球(GDX系列)气相色谱固定相的特征(1)性能与制造和活化条件有很大关系(2)同一固定相、不同厂家或不同的活化条件、分离效果的差异大(3)种类有限，可分离的对象少(4)易于使用。气相色谱固定相固定液载体(支持体) :在小粒表面涂布薄层的固定液。固定液的特征：固定液在常温下不一定是液体，但在使用温度下一定是液体状态。1 .作为载体使用的物质应该满足的条件：比表面积大，孔径分布均匀，化学惰性，表面没有吸附性，或吸附性弱，具有不与分离的成分反应的高热稳定性和机械强度，不易破裂的粒子大小均匀，适度。 一般常用6080目、80100目。1 .检测器类型浓度型检测器：测定载气中检测器成分浓度的瞬间变化，检测信号值与成分浓度成正比。 热传导检测器质量型检测器：测定载气中的某成分进入检测器的速度变化。 即，检测信号值与单位时间内进入检测器的成分的质量成比例。 PS；通用型检测器：响应所有物质，热传导检测器专用型检测器：对特定物质有高灵敏度响应，电子捕获检测器氢火焰电离检测器，特征简称氢火焰检测器(1)典型的质量型检测器(2)对有机化合物具有高灵敏度(3)无机气体、水、四氯化碳等氢少、不含氢物质的灵敏度低，或不反应(4)氢火焰检测器结构简单影响氢火焰检测器灵敏度的因素各种气体流速和配合比的选择N2流速的选择主要考虑分离性能，N2 : H2=1 : 11 : 1.5氢3360空气：极化电压正常极化电压在100300V的范围内选定。载气种类的选择载气种类的选择应考虑三个方面：载气对柱效应的影响、检测器的要求和载气的性质。职业病和法庭分析常检测体液等苯、甲苯、二甲苯等有毒成分，采用顶空分析是有效、方便、快速的方法。 司法部司法鉴