Agilent色谱柱选择与保养.ppt

,HPLC色谱柱选择与维护保养,Sa安捷伦科技,安捷伦HPLC色谱柱选择,分离模式的选择,样品,溶于有机溶剂,溶于水,溶于四氢呋喃,非离子化,离子化,溶于有机溶剂,溶于水,溶于正己烷,溶于甲醇或甲醇/水或乙腈或乙腈/水,用硅胶的正相模式,用键合相的正相模式,用键合相的反相模式,用键合相的反相模式,低分子凝胶渗透色谱,用键合相的反相模式,抑制电离反相键合相色谱,离子对键合相的反相模式,用硅胶的正相模式,离子交换模式,凝胶渗透色谱,凝胶过滤色谱,大孔填料的离子交换模式,用大孔填料的反相模式,分子量2,000,分子量2,000,反相分配色谱极性:固定相流动相固定相-极性流动相(己烷,庚烷)-非极性极性物质后出峰,正相色谱20%,反相色谱80%,正相&反相色谱,硅胶基质-pH38Al2O3.nH2O-pH114聚合物基质-pH114,高或低pH下,硅胶会溶解,化学修饰困难,孔结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损,柱填料基质,C-18柱-性能影响因素,硅胶纯度填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度色谱柱尺寸填料床的长度和内径颗粒形状球型或不规则型粒径平均颗粒直径,通常3-10m表面积颗粒外表面和内部孔表面的总和,以m2/gram表示孔径颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围80-300,色谱柱物理性质,C-18柱-性能影响因素,键合类型单体键合-键合相分子与基体单点相连聚合体键合-键合相分子与基体多点相连碳覆盖率与基体物质相连的键合相的量封端键合步骤之后,用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来,色谱柱化学性质,C-18柱-性能影响因素,A类硅胶OriginalZORBAXSIL(1970s)由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属含量高(硅羟基的pKa低),导致碱性化合物发生拖尾,B类硅胶(高纯)ZORBAXRx-Sil(1987)由于金属含量低,硅羟基pKa高,碱性化合物不发生拖尾,ZorbaxRx-SIL:11种金属35ppm(未检出其他杂质,4,000,选择300的孔径,大孔径填料适用于大分子分析,大孔径300全多孔色谱柱可用于分离蛋白质和多肽分子量虽小但hydrodynamicvolume(水动力学体积)较大的分子Poroshell色谱柱高流速下,高柱效分析大分子的蛋白质和多肽,色谱柱填料孔径必须适合待测物分子自由进出填料孔,与孔内表面的键合相进行分离分配,300孔径可改善蛋白质和多肽峰形,选择合适的填料孔径分析大分子可获得最佳峰形,300孔径可改善大分子的峰形,色谱柱:4.6x150mm,5mm流动相:60%MeOH:40%0.1%三氟乙酸流速:0.75mL/min温度:RT检测器:UV282nm,溶液中的分子尺寸决定适宜的色谱柱孔径窄的峰宽表明待测分子进入填料孔没有受到阻碍,分子量虽小但hydrodynamicvolume(水动力学体积)较大的分子,键合类型-对色谱分离的影响单齿键合：提高传质速率,加快色谱柱平衡双齿键合：增加色谱柱稳定性,增加色谱柱的载样量,C-18柱-性能影响因素,碳覆盖率-对色谱分离的影响高碳覆盖率：提高分辨率,分析时间长低碳覆盖率：缩短运行时间,封端-对色谱分离的影响封端：减轻待测组份与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应而引起的色谱峰拖尾现象对于极性样品,未封端与经过封端处理的色谱柱在选择性上有明显差异,C-18柱-性能影响因素,固定相键合二甲基硅烷,封端四甲基硅烷,Si,O,OH,O,O,CH,3,Si,R,CH,3,CH,3,Si,CH,3,CH,3,Si,R,CH,3,R=C8,C18,etc,.,O,OH,OH,O,CH,3,Si,R,CH,3,CH,3,Si,R,CH,3,+,+,Cl,CH,3,Si,CH,3,CH,3,OH,OH,OH,OH,CH,3,Cl,R,CH,3,(,TMS),传统键合及封端技术,取代基：五个旁侧基团:异丙基,ZorbaxStableBond空间位阻保护-抗水解能力,键合相流失,保留减弱,另一个裸露的硅羟基,潜在的拖尾因素,普通硅胶柱低pH2不稳定,发生水解,安捷伦专利的空间位阻保护,液相柱-保留值与pH的关系,pH变化值0.1,RS变化值1.6,色谱柱：ZorbaxStableBondC184.6X250mm,5um部件号：880975-906流动相：27%甲醇：73%磷酸pH2.5&2.6温度：500C流速：1.0mL/min.,色谱柱:ZORBAXEclipseXDB-C84.6x75mm,3.5m流动相:44%25mM磷酸,pH7.00:56%甲醇流速:1.0mL/min温度:25C检测:UV250nm,可电离的组份的分离可能会随pH变化发生显著变化甚至很小的0.050.25个pH变化单位.,样品:ketoprofenethylparabenHydrocortisonefenoprofenpropylparabenPropranololibuprofen,液相柱-保留值与pH的关系,0.25个pH,液相柱-保留值与pH的关系,pH变化：0.2个pH(7.07.2)保留时间改变：1.2分钟(13.614.8分钟),保留时间随pH改变不明显,保留时间随pH改变不明显(酸性环境中),方法稳定区方法波动区(pKa+1.5)方法稳定区,液相柱-保留值与pH的关系,液相柱-保留值与pH的关系,复杂组分的流动相pH选择技巧,色谱柱:ZORBAXExtend-C184.6x150mm,5mm流动相:30%缓冲液:70%MeOHpH7缓冲液20mMNa2HPO4pH11缓冲液20mMTEA流速:1.0mL/min温度:RT检测器:UV254nm,05,1,2,3,4,5,Time(min),7,6,Extend-C18pH7,1.Maleate马来酸盐2.Scopolamine东莨菪碱pKa7.63.PseudoEphedrine假麻黄碱pKa9.84.Doxylamine抗敏安(多西拉敏)pKa9.25.Chlorpheniramine氯苯吡胺pKa9.16.Triprol内径ine苯丙烯啶pKa6.57.Diphenhydramine苯海拉明pKa9.0,Extend-C18pH11,0510,1,2,3,4,Time(min),6,5,7,高pH下,碱性成分的保留增加,待测物pKa+1.5以外的流动相pH可保证方法的稳定性,Zorbax色谱柱发展史,1973ZORBAXSIL发明专用于HPLC分离的球状、小颗粒硅胶(专利)1977ZORBAXODS单官能团,单层键合相发明者之一1978ZORBAXcolumn首先推出色谱柱的质量信誉保证1982ZORBAXGF-250改善了蛋白质尺寸分离的稳定性1987ZORBAXRx-SIL推出适合碱性化合物的HPLC分离的全新硅溶胶技术(专利)1990ZORBAXStableBond增强了低pH条件下键合相的稳定性(专利)1996ZORBAXEclipseXDB双封端技术提高了中等pH条件下键合相的稳定性(专利)1997ZorbaxLC/MScolumn15和30mm(3.5um)快速,高分辨率,高通量LC/MS色谱柱1998ZORBAXBonus-RP极性键合技术使碱性化合物的分离得到改善(专利)1999ZORBAXCombiHT专为小规模组合化学样品制备设计的高通量色谱柱1999ZORBAXEclipsedsDNA用于分析双链DNA的多孔硅胶柱1999ZORBAXCarbohydrate分析单,双,三糖和糖醇的专用柱1999ZorbaxExtendC18独特宽pH跨度,高pH下使用的硅胶基质色谱柱(专利)2001ZorbaxSB-aq可在低pH下(18)使用100%水相的填料(专利)2002ZorbaxPoroshell300SB蛋白质高速,高效反相分离新填料2002ZORBAX3.0mm内径.3-mm柱径溶剂节省柱2003ZORBAXsub2micron1.8um粒径的高通量,超高速色谱柱(5月1日上市)2003ZORBAXPrepHT高通量全系列制备柱-分析柱向制备柱直接放大(6月1日上市),键合相-适用pH范围,低pH下,分析酸性,碱性和中性组分,峰形优异,柱寿命长,中等pH下,分析酸性,碱性和中性组分,尤其碱性组分峰形优异,柱寿命长,中等pH下,分析酸性,碱性和中性组分,可用于100%全水相,尤其极性组分峰形优异,柱寿命长,中高pH下,分析酸性,碱性和中性组分,尤其碱性组分峰形优异,柱寿命长,SB-C1880A&300ApH:18,SB-C880A&300ApH:18,SB-苯基80ApH:18,反相色谱柱,Bonus-RP空间位阻保护+三封端80ApH:29,Extend-C1880A&300ApH:211.5,EclipseXDB双封端,EclipseXDB-C1880ApH:29,EclipseXDB-C880ApH:29,EclipseXDB-苯基80ApH:29,StableBond空间位阻保护,Poroshell300SB-C18实心核多孔壳pH:18,SB-CN80A&300ApH:18,SB-C380A&300ApH:18,Zorbax产品系列,SB-AQ空间位阻保护80ApH:18,可使用100%水相,Extend双齿键合+双封端,低pH,中pH,高pH,安捷伦HPLC色谱柱维护保养,Zorbax色谱柱=高柱效+长寿命,min,0,0.5,1,1.5,2,Norm.,0,10,20,30,40,50,色谱柱:ZORBAXSB-C184.6x30mm,1.8um流动相:60%甲醇:40水流速:1mL/min温度:室温检测:UV254nm,柱效进样次数#3#416635613810068576372200688263813006895638140068836294500681563126006687623670066536115800669562219006781630068106302130068586528203468236343,1,2,3,4,样品尿嘧啶苯酚4-Cl-硝基苯甲苯,色谱柱柱内体积和平衡时间,单次样品运行时间=分析时间+色谱柱平衡时间色谱柱平衡时间=10倍柱内体积流速,清洗液相色谱柱,冲洗色谱柱-用比流动相更强的溶剂,反相色谱柱用以下溶剂至少各25mL冲洗色谱柱(分析柱)不含缓冲盐的流动相100%甲醇100%乙腈75%乙腈+25%异丙醇100%异丙醇100%二氯甲烷*100%己烷*若使用己烷或二氯甲烷冲洗色谱柱,则在重新使用反相流动相以前,必须用异丙醇冲洗色谱柱!,正相色谱柱用以下溶剂至少各50mL冲洗色谱柱(分析柱)50%甲醇+50%三氯甲烷100%乙酸乙酯,0.12mm内径管线用于毛细管HPLC中2.1内径色谱柱0.17mm内径管线用于分析型HPLC中2.14.6内径色谱柱0.25mm内径管线用于半制备型HPLC中9.4内径色谱柱0.5mm内径管线用于制备型HPLC中21.2内径色谱柱,连接管线与接头,色谱柱:StableBondSB-C18,4.6x30mm,3.5mm流动相:85%H2Owith0.1%三氟乙酸:15%ACN流速:1.0mL/min温度:35C,50mL柱外体积（管线）,样品:1.苯丙胺酸2.5-苯基-3,6-二氧-2-哌嗪乙酸3.Asp-Phe4.天冬甜素,HPLC常用的色谱柱接头,TroubleshootingLCFittings,PartII.J.W.DolanandP.Upchurch.LC/GCMagazine6:788(1988),HPLC常用的色谱柱接头,活塞杆与密封圈,蓝宝石活塞杆1/包装部件号：5063-6586活塞杆密封圈（Vespel聚酰亚胺用于反相）2/包装部件号：5063-6589*己烷对Vespel聚酰亚胺有溶涨作用活塞杆密封圈（聚乙烯用于正相）2/包装部件号：0905-1420,样品:尿嘧啶苯酚N,N-二甲基苯胺,更换前更换后,塔板数USP拖尾因子(5%)1.36701.452.104571.093.100851.00,活塞杆与密封圈,检测器用灯,检测器用灯,检测器用灯,1.DAD的氘灯替代VWD的氘灯关闭灯电源,冷却5min以上将lamp设定的VWDconfiguration的灯类型改为2140-05902.灯能量测试以水为流动相灯预热10min以上在化学工作站Diagnosis状态下进行波长校准,将紫外灯的使用时间归零,DAD的氘灯替代VWD的氘灯,DAD故障诊断与维护,要进行DAD故障诊断,单击DAD图标,然后选择ShowModuleTest选项,进入DAD测试选项画面,DAD故障诊断测试共有8项内容：DADSelf-TestDADIntensityTestDADCellTest,常做的DAD维护：更换灯清洗或更换流动池窗,Diagnosis界面故障原因分析,故障选择框,可能原因框,诊断过程故障分析样品分析过程中故障分析,在Diagnosis画面中为用户提供了在诊断过程或样品分析过程中出现的问题以及可能的原因,样品溶剂溶解强度,样品溶剂溶解能力强于流动相导致色谱峰峰形问题：裂分峰或宽峰,中性分析时为何要使用缓冲液？,色谱柱:ZORBAXEclipseXDB-C8,4.6x75mm,3.5m流动相:44%A:56%甲醇流速:1.0mL/min温度:25C检测:UV250nm,含缓冲液的流动相可改善保留,分离和色谱峰峰形.,样品:1.pranolol7.ibuprofen,A=pH7.0水,A=pH7.0水+25mM磷酸缓冲液,增加缓冲液浓度减少拖尾,色谱柱:ZORBAXEclipseXDB-C84.6x150mm,5mm流动相:40%磷酸盐缓冲液60%ACN流速:1.5mL/min.温度:40C,USPTf1.621.651.631.771.831.12,10mM磷酸盐pH7.0,USPTf1.411.501.331.391.361.00,25mM磷酸盐pH7.0,在中等pH下,离子强度较高,能有效掩蔽硅羟基的二次作用减少拖尾,样品:TricyclicAntidepressants（三环抗抑郁剂）1.Desipramine（脱甲丙咪嗪）2.Nortriptyline（去甲替林）3.Doxepin（多塞平）4.Imipramine（丙咪嗪）5.Amitriptyline（阿米替林）6.TrImipramine（三甲丙咪嗪）,TEA对碱性成分峰形的影响,02.55.0,Time(min),1,2,3,4,5,色谱柱:ZORBAXEclipseXDB-C8,4.6x150mm,5mm流动相:85%25mMNa2HPO4:15%ACN流速:1.0mL/min.温度:35C,USPTF5%1.1.292.1.333.1.634.2.355.1.57,NoTEA,10mMTEA,USPTF5%..265.1.14,pH7,样品:1.Phenylpropanolamine（去甲麻黄碱）2.Ephedrine（麻黄素）3.Amphetamine（苯丙胺）4.MethAmphetamine（脱氧麻黄碱）5.Phenteramine（苯丁胺）,竞争酸对酸性组分的峰形的影响,色谱柱:ZORBAXStableBondSB-C184.6x150mm,5mm流动相:40%A:60%ACN流速:1.0mL/min.温度:室温样品:Ibuprofen（异丁苯丙酸）pKa4.4,pH35mMNaH2PO4,Tf=1.8,pH35mMNaH2PO41%乙酸,pH2.50.1%三氟乙酸,Tf=1.0,Tf=1.09,A:,乙酸和三氟乙酸均能作为竞争酸填加至流动相中三氟乙酸由于所需浓度较低,可作为首选,色谱柱技术5988-6467EN流动相对色谱的影响(TE40),液相色谱柱:ZORBAXEclipseXDB-C8色谱柱尺寸:4.6x50mm3.5m部件号:935967-906,UV:254nm流速:1mL/min.室温,UracilButylparabenNaphthaleneDipropylphthalateAcenaphthene,尿嘧啶尼帕尔金丁酯萘二丙基邻苯二甲酸酯苊,刻度混合:Dial-a-MixA:水B:甲醇,用泵抽取50%B,体积比混合:Vol/Vol250mL水+250mL甲醇,用泵抽取100%混合液,定容混合:Mix-to-Mark250mL甲醇,用水定容至500mL,用泵抽取100%混合液,预混合（重量比混合）:Premixed(w/w)200g甲醇+200g水,用泵抽取100%混合液,改变流动相配比方式,可增加柱效（提高灵敏度）,液相分析-小诀窍,提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）减小柱内径，可增加柱效（提高灵敏度）缩短检测器响应时间，可增加柱效（提高灵敏度）减小柱外体积，可增加柱效（提高灵敏度）使用超纯硅胶，可增加柱效（提高灵敏度）使用高能量氘灯，可增加柱效（提高灵敏度）使用中孔透光氘灯，可增加柱效（提高灵敏度）改变流动相pH，可增加柱效（提高灵敏度）改变有机相%，可增加柱效（提高灵敏度）改变键合相，可增加柱效（提高灵敏度）改变有机添加剂，可增加柱效（提高灵敏度）改变流动相配比方式，可增加柱效（提高灵敏度）,生化多肽-5988-6316EN升温对于反相HPLC分离强疏水肽的影响(B27)Polypeptide,流动相:A:含0.05%三氟乙酸的水B:含0.05%三氟乙酸的乙腈2%B/min进样量:100L(50g的6M脲/5%乙酸)UV:210nm流速:1mL/min室温,液相色谱柱:ZORBAXStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x250mm5m部件号:880975-902,室温300C400C500C600C700C,提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）,环保,样品:除草剂流动相:52/480.1M乙酸钠/甲醇,pH6流速:0.45mL/min温度:40,90检测:UV,除草剂:柱温的影响Herbicides:EffectofColumnTemperature,1.西玛津2.敌草隆3.扑灭津4.扑灭净5.异丙甲草胺,1.Simazine2.Diuron3.Propazine4.Prometryn5.Metolachlor,液相色谱柱:ZorbaxStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x150mm,5m部件号:883975-902,目录P625,40,90,提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）,生物制药,液相色谱柱:Zorbax300StableBond-C3色谱柱尺寸:4.6x150mm,5m部件号:883995-909,肽类/蛋白质:升温对分离的影响Peptides/Proteins:EffectofElevatedTemperature,样品:多肽流动相:A=5:95,乙腈:水,0.10%三氟乙酸(V/V%)B=95:5,乙腈:水,0.085%三氟乙酸(V/V%)梯度:在20min内15-53%,后运行时间12min流速:l.0mL/min温度:室温-60检测:UV215nm,1.亮氨酸脑啡呔2.血管紧张素II3.核糖核酸酶A4.牛胰岛素5.细胞色素C6.溶菌酶7.肌红蛋白8.碳酸酐酶,1.LeucineEnkephalin2.AngiotensinII3.RnaseA4.Insulin(BOV)5.CytochromeC6.Lysozyme7.Myoglobin8.Carbonicanhydrase,目录P611,提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）,生物制药,液相色谱柱:ZorbaxStableBond-C8色谱柱尺寸:150mm,5m,减小毛细管内径来提高低浓度样品的检测灵敏度ReducingCapillaryIDtoImproveSensitivityforConcentration-LimitedSamples,流动相:60%乙腈/40%水流速:内径0.3mm-4uL/min内径0.5mm-10uL/min内径1.0mm-50uL/min内径4.6mm-1.0uL/min温度:室温检测器:UV254nm样品:200ng联二苯(100nl),目录P611,减小柱径，可增加柱效（提高灵敏度）,色谱柱技术5988-6454EN使用小体积色谱柱对于检测器响应时间的重要性(TE32),液相色谱柱:ZORBAXStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x15mm3.5m部件号:831975-902,流动相:乙腈:1%甲酸=32:68UV:254nm流速:1.0mL/min.30C进样量:5L,响应时间:4.0秒响应时间:2.0秒响应时间:1.0秒响应时间:0.5秒响应时间:0.1秒,尿嘧啶乙酰水杨酸N-乙酰苯胺,UracilAcetylsalicylicacidAcetanilide,缩短检测器响应时间，可增加柱效（提高灵敏度）,色谱柱技术5988-6428EN不同硅胶类型比较(TE1),流动相:含0.05%甲醇的二氯甲烷,液相色谱柱,toluenebenzanilidephenolbenzylalcohol,ZorbaxSilSpherisorbZorbaxRx-Sil,甲苯N-苯甲酰苯胺苯酚苯甲醇,使用高纯硅胶，可增加柱效（提高灵敏度）,有机化学5988-6366ENpH对苯胺取代物分析的影响(ORCH1),流动相25mM磷酸:甲醇=58:42流速:1mL/min22C,液相色谱柱:ZORBAXStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x150mm5m部件号:883975-902,对位甲氧基苯胺间位苯甲胺3-氨基-苯甲腈对位氯苯胺间位氯苯胺邻位氯苯胺,p-anisidinem-toluidine3-amino-benzonitrilep-chloroanilinem-chloroanilineo-chloroaniline,pH:2.5pH:7.0,改变流动相pH，可增加柱效（提高灵敏度）,生化肽5988-6293EN三氟乙酸浓度对于反相肽的分离的影响(B10)Peptide,流动相:A:水和三氟乙酸B:乙腈和三氟乙酸0-30%B（30min.内）流速:1mL/minUV:254nm进样量:6uL十肽菌素标样S1-S5（疏水性有略微差异）40C,液相色谱柱:ZORBAX300SB-C8色谱柱尺寸:4.6x150mm5m部件号:883995-906,1.0%三氟乙酸,0.05%三氟乙酸,0.25%三氟乙酸,改变流动相pH，可增加柱效（提高灵敏度）,食品分析5988-6360EN流动相强度对单糖和二糖分离的影响(FD4),流动相:乙腈/水如图流速:1mL/min示差折光检测器,液相色谱柱:ZORBAXNH2色谱柱尺寸:4.6x250mm5m部件号:880952-708,果糖葡糖蔗糖Palatinose海藻糖异麦芽糖,FructoseGlucoseSaccharosePalatinoseTrehaluloseIsomaltose,乙腈/水70/30乙腈/水75/25,改变有机相%，可增加柱效（提高灵敏度）,色谱柱技术5988-6468EN有机改性剂和pH对于选择性的影响(TE5),流动相:25mM磷酸缓冲液流速:1.0mL/min.22C,液相色谱柱:ZORBAXStableBond-CN色谱柱尺寸:4.6x150mm5m部件号:883975-905,anisidinem-toluidine4-cl-aniline3-aminobenzonitrile3-cl-aniline2-cl-aniline,甲氧基苯胺间位苯甲胺4-氯-苯胺3-氨基苯甲腈3-氯-苯胺2-氯-苯胺,42%甲醇：58%缓冲液30%甲醇：70%缓冲液,pH2.6,pH3.0,改变有机相%，可增加柱效（提高灵敏度）,色谱柱技术5988-6453ENZORBAXEclipse系列色谱柱的选择性(TE31),液相色谱柱:ZORBAXEclipseXDB-Phenyl色谱柱尺寸:4.6x150mm5m部件号:993967-912,流动相:甲醇:水=70:30UV:254nm流速:1.0mL/min.室温,ZorbaxEclipseXDB-苯基ZorbaxEclipseXDB-C8ZorbaxEclipseXDB-C18,尿嘧啶苯酚4-氯-硝基苯甲苯萘,UracilPhenol4-Cl-nitrobenzeneTolueneNaphthalene,改变键合相，可增加柱效（提高灵敏度）,生物制药,液相色谱柱:ZorbaxExtend-C18色谱柱尺寸:2.1x150mm,5um部件号:773700-902,三氟乙酸和氢氧化铵用于肽类RP-HPLCESI-MS分离的选择性比较SelectivityComparisonofTFAandNH4OHforPeptideRP-HPLCESI-MSAnalysis,流速:0.25mL/min.温度:25梯度:5-60%Bin20min.LC/MS:正离子,ESI-Vf70V,Vcap4.5kV,N2-35psi,12L/min.,300样品:4L(各50ng),三氟乙酸条件:A-0.1%三氟乙酸水溶液B-0.085%三氟乙酸80%的乙腈溶液,NH4OH条件:A-20mMNH4OH水溶液B-20mMNH4OH80%的乙腈溶液,目录P613,改变有机添加剂，可增加柱效（提高灵敏度）,生化肽十肽菌素5988-6299EN酸对于反相肽的分离的影响(B16)decapeptide,流动相:A:含相应的酸的水相B:含相应的酸的乙腈0%-30%B（30min.内）进样量:6L肽标样UV:254nm流速:1mL/min40C,液相色谱柱:ZORBAX300SB-C8色谱柱尺寸:4.6x150mm5m部件号:883995-906,十肽菌素S1十肽菌素S2十肽菌素S3十肽菌素S4十肽菌素S5,decapeptideS1decapeptideS2decapeptideS3decapeptideS4decapeptideS5,0.1%三氟乙酸,0.025MH3PO4,改变有机添加剂，可增加柱效（提高灵敏度）,色谱