多酚含量测定法-总酚含量测定法-Folin酚法-Folin-Ciocalteu试剂法-操作图解

精品文档 1欢迎下载 多 总 酚含量测定法 Folin Ciocalteu试剂法 李熙灿 Xican Li 广州中医药大学 文献 Xican Li Jing Lin Yaoxiang Gao Weijuang Han Dongfeng Chen Antioxidant activity and mechanism of Rhizoma Cimicifugae Chemistry Central Journal 2012 6 1 140 操作图解 溶液配制 1Folin Ciocalteu 试剂 0 25mol L 的配制 取 2mol L Folin Ciocalteu 试剂 1mL 加蒸馏水 7mL 充分混合 得 0 25mol L 的 Folin Ciocalteu 试剂 共 8mL 2 15 Na2CO3溶液 W V 的配制 取 Na2CO3 10H2O 溶 3 0g 溶于 20mL 水中 混匀即得 3 标准溶液的配制 以连苯三酚为例 精确称取连苯三酚标准品10mg 用水溶解并定容到50mL 得0 2mg mL的对照品标准溶液 4 连苯三酚标准曲线的绘制 加 样 量 A760样品液浓 度 mg mL 0 2mg mL 样品母 液 mL 补加溶剂95 乙醇 mL A760 平均值 SD 00 500 03 00 500 0230 000 00 500 063 0 0386670 017442 0 010 490 15 0 010 490 1620 004 0 010 490 188 0 1666670 015861 0 020 480 29 0 020 480 2990 008 0 020 480 295 0 2946670 003682 0 020 050 450 7490 7290 016753 精品文档 2欢迎下载 0 050 450 708 0 050 450 73 0 080 421 088 0 080 421 090 032 0 080 421 098 1 0920 00432 0 10 41 393 0 10 41 3560 04 0 10 41 434 1 3943330 031857 0 120 381 747 0 120 381 5210 048 0 120 381 64 1 6360 092307 0 150 351 983 0 150 351 8830 06 0 150 351 9171 9276670 041516 0 000 010 020 030 040 050 06 0 2 0 0 0 2 0 4 0 6 0 8 1 0 1 2 1 4 1 6 1 8 2 0 2 2 A Pyrogallol Concentration mg mL A 32 16733 C 0 06012 R 0 998 线性范围 连苯三酚 0 00 0 06mg mL A 值在 0 039 1 928 之间 5 样品溶液的配制 样品母液 1mg mL 精确称取样品2mg 用95乙醇溶解并定容到2mL 得1mg mL样品母液 0 2mg mL 样品母液 mL 补加溶剂95 乙醇 mL 次数现象 0 20 3 平行测三次变蓝 如怀疑样品自身有吸收 可加做空白对照组 用 0 5mL95 乙醇代替 0 5mLFolin Ciocalteu 试剂 即可 注意观察 A 值大小 精品文档 3欢迎下载 6 多酚含量的计算 依上述公式 A 32 16733 C 0 06012 由 A 值即可求得浓度 C 值 7 说明 7 1 不同的分光光度计所测得的 A 值可能不一样 所以 同一次实验要用同一台分光光度计 7 2 Folin Ciocalteu 试剂 可向试剂公司购买 一般其浓度为 2 M 使用前最好稀释 也可 以自配方法如下 将 100g 钨酸钠 Na2WO4 2H2O 25g 钼酸钠 Na2MoO4 2H2O 700 mL 蒸馏水 50 mL 85 磷酸及 100 mL 浓 盐酸装入带回流装置的 2000mL 圆底烧瓶中 充分混合 文火缓慢回流 10h 在加入 150g 硫酸锂 Li2SO4 50 mL 蒸馏水及数滴液溴 然后将烧瓶内溶液开口煮 15min 以驱除过量的溴 冷至室温后用容量瓶定容至 1000mL 过滤 滤液呈微绿色 置于冰箱中长期冷 藏备用临用时稀释