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1 选修选修 1 1 专题专题 2 2 时间 45 分钟 分值 100 分 一 选择题 每小题 5 分 共 50 分 1 用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 可以用相同的培养基 都需要使用接种针进行接种 都需要在火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌 A B C D 答案 C 解析 平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基 故 正确 平板划线法采用 接种针进行操作 而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作 故 错误 纯化时 要进行无 菌操作 需要在火焰旁接种 避免空气中的微生物混入培养基 故 正确 平板划线法一 般用于分离而不是计数 故 错误 2 下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是 A 植物组织培养常用的是固体培养基 B 可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型 C 利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌 D 在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌 答案 D 解析 在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌 3 下列有关微生物培养与应用的说法正确的是 A 天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基 B 接种前需对培养基 培养皿 接种环 实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理 C 大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段 D 分离分解尿素的细菌时 尿素是培养基中唯一的氮源和碳源 答案 C 解析 天然培养基是成分不明确的培养基 并不是不需加工配制的培养基 实验者的 双手需进行消毒处理 分离分解尿素的细菌时 尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源 4 下列对灭菌和消毒的理解不正确的是 A 灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞 芽孢和孢子 B 消毒和灭菌实质上是完全相同的 2 C 接种环用灼烧法灭菌 D 常用灭菌方法有灼烧灭菌法 干热灭菌法 高压蒸汽灭菌法 答案 B 解析 消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有 害的微生物 不包括芽孢和孢子 灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生 物 包括芽孢和孢子 5 用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 A 未接种的选择培养基 B 未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C 接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D 接种了的选择培养基 答案 C 解析 将菌液稀释相同的倍数 在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于 选择培养基上的数目 因此 用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照 对照实验遵循的原则之一 是单一变量 所以与选择培养基一样接种 培养 6 下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是 A 利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数 B 接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落 C 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌 D 用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加 答案 D 解析 稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物计数 接种时要连续划线 这样可以获得单个菌落 大白菜腌制过程中开始时细菌大量繁殖 亚硝酸盐含量增加 一 般腌制 10 天后亚硝酸盐含量下降 7 三个培养皿中分别加入 10 mL 不同的培养基 然后接种相同的大肠杆菌样液 培养 36 h 后 计算菌落数 结果如下表 下列选项正确的是 培养皿培养基成分菌落数 琼脂 葡萄糖 35 琼脂 葡萄糖 生长因子 250 琼脂 生长因子 0 A 该实验采用的是液体培养基 B 该实验采用平板划线法接种 C 和 对照 说明大肠杆菌的生长不需要生长因子 D 和 对照 说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖 3 答案 D 解析 该培养基加入了琼脂 故为固体培养基 对微生物进行计数 宜采用稀释涂布 平板法 而不是平板划线法 接种 稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的 单个菌落 即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法 一个菌落代表一个 单细胞 与 对照 说明大肠杆菌生长需要葡萄糖 但不能证明是否需要生长因子 和 对照 自变量是有无葡萄糖 说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖 8 下列关于微生物的分离和培养的有关叙述 错误的是 A 微生物培养前 需对培养基进行消毒 B 分离土壤中不同的微生物 要采用不同的稀释度 C 测定土壤样品中的细菌数目 常用菌落计数法 D 分离能分解尿素的细菌 要以尿素作为培养基中唯一的氮源 答案 A 解析 微生物培养前 需对培养基进行灭菌处理 将所有的微生物杀死 9 下列是关于 检测土壤中细菌总数 实验操作的叙述 其中错误的是 A 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基 经高温 高压灭菌后倒平板 B 取 104 105 106倍的土壤稀释液和无菌水各 0 1 mL 分别涂布于各组平板上 C 将实验组和对照组平板倒置 37 恒温培养 24 48 小时 D 确定对照组无菌后 选择菌落数在 300 以上的实验组平板进行计数 答案 D 解析 在细菌计数时 为保证实验结果的准确性 一般选择菌落数在 30 300 的平板 进行计数 然后求出平均数 再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数 10 下列有关刚果红染色法的叙述 不正确的是 A 刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入 B 刚果红可以在菌落形成后加入 C 刚果红在菌落形成前倒平板时加入 加入的刚果红不需要灭菌 D 在菌落形成后加入刚果红时 刚果红不需要灭菌 答案 C 解析 从对两种筛选纤维素分解菌的方法进行比较分析入手 结合微生物培养过程无 菌条件的控制方法来解答该题 刚果红可以与纤维素形成红色复合物 当纤维素被纤维素 酶分解后 红色复合物无法形成 出现以纤维素分解菌为中心的透明圈 我们可以通过是 否产生透明圈来筛选纤维素分解菌 刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入 也可以 在菌落形成后加入 若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红 则所加刚果红要进行灭菌 以防杂菌的侵入 影响纤维素分解菌菌落的形成 若在菌落形成后加入刚果红 则不需要 灭菌 4 二 非选择题 共 50 分 11 2012 吉林二模 10 分 富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一 主 要是利用不同微生物生命活动特点的不同 制定环境条件 使仅适应该条件的微生物旺盛 生长 从而使其数量大大增加 下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物 对羟基苯甲酸的微生物的实验过程 请分析回答下列问题 1 重复培养的目的是 2 的菌落中大部分是降解 微生物 设置 的目的是 3 采用单细胞挑取法 将所选菌种接种到 的培养基中 在操作过程中为防止 污染应注意的事项是 接种环要 灭菌 待其 后 再挑取菌落接种到试管 中 并塞好棉塞 操作完成后需将接种环在火焰上灼烧 目的是 4 如果用这种方法分离土壤中的纤维素分解菌 经常用加入了 的鉴别培养基 在该培养基上 纤维素分解菌会因为产生纤维素酶使菌落周围出现 答案 1 扩大培养 使分解对羟基苯甲酸微生物的比例增高 2 对羟基苯甲酸 对 照作用 3 在火焰上灼烧 冷却 杀灭残留物 4 刚果红 透明圈 解析 1 通过重复培养可获得更多的分解对羟基苯甲酸的微生物 2 通过培养分离 获得的主要是分解对羟基苯甲酸的微生物 3 接种微生物时要对接种环进行灭菌 待接种 环冷却后再接种 接种完毕后还需对接种环灼烧以杀灭残留的微生物 4 刚果红与培养基 中的纤维素形成红色复合物 当纤维素被纤维素酶分解后 该复合物就无法形成 出现以 纤维素分解菌为中心的透明圈 5 12 8 分 下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方 请回答 试剂牛肉膏蛋白胨 NaCl 琼脂水 用量 5 g10 g5 g20 g1000 mL 1 培养基的类型有很多 但培养基中一般都含有水 碳源 和无机盐 上述 培养基配方中能充当碳源的成分是 培养基配制完成以后 一般还要调节pH 并 对培养基进行 处理 该培养基从物理性质上分类属于 2 分离纯化微生物最常使用的接种方法是 和 3 假设培养结束后 发现培养基上菌落连成一片 可能的原因是什么 列举两项 答案 1 氮源 牛肉膏和蛋白胨 灭菌 固体培养基 2 平板划线法 稀释涂布平 板法 3 稀释倍数不够 菌液的浓度太高 划线时 划完第一次没有灭菌即接着划第二次 培养过程中灭菌不严格 受到了其他微生物的污染 任选两个 解析 培养基中都应含有水 无机盐 碳源 氮源 配制培养基时加入了琼脂 因此 该培养基属于固体培养基 培养基配制完成后要调 pH 和灭菌 牛肉膏 蛋白胨中含碳元素 可作为有机碳源 分离纯化微生物一般用平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法中每 次划线前都要将接种环灼烧灭菌 以杀死上次划线时接种环上残留的菌种 采用稀释涂布 平板法时稀释度要足够高 否则会使微生物不能分散成单个细胞 13 12 分 请回答下列与大肠杆菌有关的问题 1 从生态系统的成分上看 大肠杆菌属于 它的同化作用类型是 2 下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方 成 分含 量 蛋白胨 10 0 g 乳糖 5 0 g 蔗糖 5 0 g K2HPO42 0 g 显色剂 0 2 g 琼脂 12 0 g 将上述物质溶解后 用蒸馏水定容到 1000 mL 根据用途划分该培养基属于 培养基 选择 鉴别 该培养基中的碳源是 3 培养大肠杆菌时 常用的接种方法是平板划线法和 为防止杂菌污染需要 对培养基和培养皿进行 4 现有一升水样 用无菌吸管吸取 1 mL 水样至盛有 9 mL 无菌水的试管中 依次稀释 6 103稀释度 各取 0 1 mL 已稀释 103倍的水样分别接种到三个培养基上培养 记录的菌落 数分别为 55 56 57 则每升原水样中大肠杆菌数为 5 以下微生物发酵生产特定产物时 所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的 是 A 制作果酒 B 由果酒制作果醋 C 制作泡菜 D 制作腐乳 6 利用培养基不仅可以分离培养微生物 也可以进行植物组织培养 与微生物培养明 显不同的是 用于组织培养的培养基中还需要加入 答案 1 分解者 异养型 2 鉴别 乳糖 蔗糖 蛋白胨 3 稀释涂布平板法 灭 菌 4 5 6 108 5 B C 6 植物激素 或生长素和细胞分裂素 解析 1 大肠杆菌不能制造有机物 必须以现成的有机物来合成组成自身的物质 属 于异养型微生物 在生态系统中主要分解有机物 属于分解者 2 根据表中培养基的组成可看出 该培养基中的碳源是乳糖 蔗糖 蛋白胨 由于在 培养基中添加了显色剂 可判断此培养基为鉴别培养基 3 培养大肠杆菌等微生物时 常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法 为防 止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行灭菌 4 根据公式计算 每升原水样中大肠杆菌数 55 56 57 3 0 1 103 103 5 6 108 5 制作果酒用到的微生物是酵母菌 是真核生物 制作果醋和制作泡菜分别用的微生 物是醋酸菌和乳酸菌 二者都是原核生物 制作腐乳用到的微生物是霉菌 属于真核生物 而大肠杆菌属于原核生物 6 植物组织培养与微生物培养明显不同的就是 组织培养的培养基中还需要加入植 物激素 主要是生长素和细胞分裂素 作用是诱导根 芽的分化 14 8 分 植物的秸秆 枝叶等纤维物质是地球上最 多的可再生资源 以纤维素类物质生成燃料乙醇的研究 越来越受重视 纤维素酶糖化法是目前常用的方法 其 操作过程如图所示 1 该方法中 微生物 X 与微生物 Y 不同 微生物 Y 是 若从土壤中获得微生 物 X 请写出分离的流程图 为了鉴别微生物 X 培养基的成分为 CMC Na 酵母膏 K2HPO4 琼脂 土豆汁等 在该培养基中 CMC Na 的作用是 2 若经选择 微生物 X 为木霉 则其内分解纤维素的酶至少包括 三种组分 7 这三种酶协同作用 将纤维素分解为葡萄糖 3 在操作过程中 过程 需 以保证乙醇的产生 4 操作发现 糖液浓度过高时 葡萄糖的产生会受到抑制 其原因是 答案 1 酵母菌 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将菌液涂布到特定的选择培养基 上 挑选产生透明圈的菌落 提供碳源 或便于鉴别 2 C1酶 CX酶 葡萄糖苷酶 3 密闭发酵 4 产物 葡萄糖 过多 反馈抑制了分解秸秆的酶的活性 解析 微生物 Y 能发酵糖液产生乙醇 故微生物 Y 是酵母菌 鉴别纤维素分解菌的培 养基中 CMC Na 能被 CX酶和 C1酶分解为纤维二糖 可使被刚果红染色的培养基的红色褪 去 便于鉴别 也为微生物的生长提供碳源 纤维素酶是一种复合酶 至少包括 C1酶 CX 酶 葡萄糖苷酶三种组分 酵母菌发酵产生乙醇是无氧呼吸的过程 在操作过程中应密闭 发酵 随着产物 葡萄糖 的增多 反应将会受到抑制 其机理为酶的活性受到反馈抑制 15 12 分 葡萄酒是具有多种营养成分的高级饮料 某同学制作葡萄酒的过程大致如 下 将冲洗过并晾干的成熟葡萄捏烂 与糖按 10 3 的比例放入发酵瓶 搅拌密封后发酵 初期 泡沫不断增多 随着时间的延长 泡沫逐渐减少 待基本不产生气泡后 结束发酵 根据上述过程 回答以下问题 1 发酵所需的酵母菌菌种的来源是 2 具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种 若想筛选出这样的菌种 步骤如下 获得野生菌 从酵母菌的生存环境中获得野生菌 制备 培养基 在基本培养基的基础上 注意添加 并 灭 菌后制成平板 接种 采用 法将野生菌接种在平板上 培养 在适宜条件下培养一定时间 选种 从 中筛选出所需要的菌株 3 增大接种量能缩短发酵时间 为增加

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