上海交大网络课程检验微生物讲义20

第第 2828 章章 肠道病毒肠道病毒 教学大纲 1 掌握肠道病毒的共同特性 熟悉肠道病毒的种类 所致疾病 2 掌握脊髓灰质炎病毒的生物学特征 致病机制 微生物学检验 3 熟悉柯萨奇病毒 埃可病毒的致病特点及其微生物学检验方法 4 熟悉新型肠道病毒的致病性 了解其微生物学检验方法 教学内容精要 肠道病毒属于小 RNA 病毒科 是一大群通过粪 口途径传播 经过消化道感染的病毒 人类肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒 柯萨基病毒 埃可病毒以及 1969 年以后相继分离出的 新型肠道病毒 68 71 型 脊髓灰质炎病毒侵犯中枢神经系统引起脊髓灰质炎 柯萨基病毒和埃可病毒可侵犯多 种组织系统 导致临床表现多样化 肠道病毒 70 型可引起急性出血性结膜炎 71 型可引 起中枢神经系统疾病 也可引起手足口病及疱疹性咽峡炎 一 肠道病毒概述一 肠道病毒概述 一 分类与命名 一 分类与命名 肠道病毒 enterovirus 是一群寄居于人消化道并在肠道细胞内增殖的病毒 在病毒分 类学上归属于小 RNA 病毒科 依据交叉中和试验分为 67 个血清型 人类肠道病毒包括 1 脊髓灰质炎病毒 1 2 3 三型 2 柯萨奇病毒 A B 两组 A 组包括 1 22 24 型 B 组包括 1 6 型 3 埃可病毒 包括 1 9 11 27 29 33 型 4 新肠道病毒 为 1969 年后陆续分离到的 包括 68 69 70 和 71 型 二 共同特征 二 共同特征 病毒呈球形 衣壳呈二十面体立体对称 由 60 个相同的壳粒组成 每个壳粒又由 VP1 VP4 四种不同的多肽组成 无包膜 核酸为单股正链 RNA 具有感染性 进入细 胞后可直接起 mRNA 的作用 在宿主细胞浆内复制 有较强的杀细胞作用 除柯萨奇 A 组的某些血清型外 均可在易感细胞中增殖 引起典型的 CPE 抵抗力强 耐酸和乙 醚 对热和去污剂有一定抵抗力 对高锰酸钾 过氧化氢 漂白粉等氧化剂敏感 临床 表现多样化 经过消化道侵入机体 先在肠道细胞内增殖 但所致疾病多在肠道外 包括 中枢神经 心肌损害及皮疹等 二 二 脊髓灰质炎病毒脊髓灰质炎病毒 脊髓灰质炎病毒是脊髓灰质炎的病原体 病毒侵犯脊髓前角运动神经细胞 导致弛缓 性肢体麻痹 多见于儿童 故脊髓灰质炎亦称小儿麻痹症 一 病毒特性 一 病毒特性 1 形态与结构 具有典型的肠道病毒形态 球形 衣壳由 4 种蛋白成分组成 VP1 VP2 和 VP3 带有中和抗原位点 VPl 还与病毒吸附有关 VP4 位于衣壳内部 一旦病 毒 VPl 与受体结合后 VP4 即被释出 衣壳松动 病毒基因组脱壳穿入 2 培养特性 仅能在灵长类来源的细胞中增殖 常用猴肾 人胚肾或人羊膜细胞等进 行培养 产生典型的 CPE 将病毒注入猴 猩猩的脊髓或脑内 可使动物肢体发生麻痹 3 抗原性及分型 利用中和试验 可将脊髓灰质炎病毒分 3 个血清型 3 型之间无 交叉免疫 每型病毒又含有两种型特异的抗原 分别称为 D 抗原和 C 抗原 4 抵抗力 对外界抵抗力较强 在酸性环境中较稳定 不易被胃酸和胆汁灭活 但对 各种氧化剂 如高锰酸钾 漂白粉 双氧水等敏感 二 临床意义 二 临床意义 主要通过粪 口途径传播 可形成两次病毒血症 病毒进入肠液及唾液中 故此时可从 粪便和唾液中分离出病毒 病毒随血液播散到全身淋巴组织或易感的神经外组织 约 90 95 的患者可因机体免疫力强而阻止病毒 后发展为隐性感染 仅约 0 1 的患者 病毒可侵入脊髓前角灰白质区 在其内增殖并破坏运动神经元 轻者出现暂时性 松弛性 四肢肌肉麻痹 重者可造成麻痹后遗症 极少数人可发展为延髓麻痹 导致呼吸衰竭而死 亡 病毒感染后的结局取决于病毒入侵的数量 毒株的毒力 机体的免疫力等多种因素 三 微生物学检验 三 微生物学检验 1 病毒分离与鉴定 粪便标本处理后 接种原代猴肾或人胚肾细胞 若出现细胞病变 用中和试验进一步鉴定其型别 2 血清学试验 用发病早期和恢复期双份血清进行中和试验 若血清抗体有 4 倍或以 上增长 则有诊断意义 3 核酸检测 用核酸杂交 PCR 等分子生物学方法可检测病毒基因组的存在而进行快 速诊断 同时可根据毒株核苷酸组成或序列的差异或酶切位点的不同来区别疫苗株与野毒 株 三 柯萨奇病毒和三 柯萨奇病毒和 ECHOECHO 病毒病毒 埃可病毒 echovirus 全名 肠道致细胞病变孤儿病毒 enteric cytopathogenic human orphan virus 简称 ECHO 病毒 与柯萨奇病毒 coxsackie viruses 形态结构 生物学性 状 致病性及免疫过程等都较相似 1 病毒特性病毒特性 柯萨奇病毒和埃可病毒均呈球形 核酸为单股正链 RNA 无包膜 衣壳呈二十面体立 体对称 柯萨奇病毒对乳鼠有致病作用 并可根据该特点分为 A B 两组 根据中和试验 和交叉保护试验 A 组现可分为 23 个抗原型 B 组分为 6 个抗原型 埃可病毒对乳鼠无致 病作用 根据衣壳上的特异性抗原 现已鉴定出 31 型 柯萨奇病毒可选用非洲绿猴肾及各种人细胞系细胞 埃可病毒最适于在猴肾细胞中生 长 有些病毒也能在人羊膜细胞及 HeLa 细胞中生长 柯萨奇病毒和埃可病毒均能导致培 养细胞产生 CPE 2 临床意义临床意义 柯萨奇病毒和埃可病毒识别的受体在组织和细胞中分布广泛 包括中枢神经系统 心 肺 胰 黏膜 皮肤及其他系统 因而引起的疾病种类复杂 轻重不一 见表 28 1 表表 28 1 柯萨奇病毒和埃可病毒的致病性 致病病毒及血清型 疾 病 柯萨奇病毒埃可病毒其他肠道病毒 疱疹性咽峡炎A2 6 8 10 手足口病A5 10 16新型肠道病毒 71 流行性胸痛A9 B1 51 6 9 心肌炎 心包炎A4 16 B1 51 6 9 19 急性结膜炎A24 无菌性脑膜炎几乎所有型大部分型新型肠道病毒 71 Polio 新生儿全身感染B1 53 4 6 9 17 19 3 微生物学检验微生物学检验 1 分离鉴定 将标本接种到原代或传代猴肾细胞或人源细胞系 病毒增殖后观察 CPE 情况 收集病毒培养液鉴定分型 2 免疫学检测 利用 ELISA 等可检测病人血清中的 IgG 和 IgM 抗体 免疫印迹试验 Wethern Blot 是诊断病毒感染的确证试验 四 新型肠道病毒四 新型肠道病毒 到目前为止 新型肠道病毒 New enteroviruses 已有 5 个型别 即 68 69 70 71 72 型 68 型与小儿肺炎 支气管炎有关 69 型尚未发现其与何种疾病 有关 70 型引起急性出血性