医学微生物学衣原体螺旋体

第21章 衣原体Chlamydia,概念：是严格真核细胞内寄生 有独特发育周期 能通过细菌滤器 的一类原核细胞型微生物。,衣原体的共同特征,革兰阴性，圆形或椭圆形体，体积大于病毒含有DNA和RNA两类核酸有核糖体和较复杂的酶类，能进行多种代谢有独特的发育周期，二分裂方式繁殖对多种抗生素敏感,主要致病性衣原体,对人致病:沙眼衣原体 （C. trachomatis）肺炎衣原体 (C.pneumoniae),对动物致病:鹦鹉热衣原体 （C. psittaci）兽类衣原体 (C.pecorum),世界首次分离培养成功沙眼衣原体；“沙眼金奖”获得者汤飞凡教授,第一节 概 述,一、生物学性状,独特生长发育周期：,Elementary body 原体(EB),始体或网状体(Reticulate body,RB),0h,8h,24h,30h,3540h,一 生物学性状 （一）发育周期与形态染色 衣原体有独特的发育周期，在普通光学显微镜下可观察到两种形态，小而致密的为原体；大而疏松的为始体 原体 呈球形、椭圆形或梨形，直径0.20.4 m，是发育成熟的衣原体。具有强感染性，在宿主细胞外较稳定，无繁殖能力。当进入宿主易感细胞后，宿主细胞膜围于原体外形成空泡，原体在空泡中逐渐发育，增殖成为网状体。Giemsa染色呈紫色，Macchiavello染色呈红色。,始体 体积较大，直径0.51.0 m，圆形或椭圆形，电子致密度较低，无胞壁，代谢活跃，以二分裂方式繁殖，在空泡内增殖成许多子代原体。成熟的子代原体从被破坏的感染细胞中释放，再感染新的易感细胞，开始新的发育周期，每个发育周期约4872 h。网状体是衣原体发育周期中的繁殖型，不具感染性，Macchivello染色呈蓝色。,*发育周期 从原体进入宿主细胞 ，到有新原体从得宿主细胞释放出来的过程称为一个发育周期 一个发育周期大约48-72h *染色性 用Macchiavello或Giemsa法染色，原体为红色或紫色，始体染成深蓝色,原体（培养60小时）,包涵体：指在易感细胞内繁殖的始体和子代原体的空泡，具有鉴别意义，成熟的包涵体含大量原体。,抵抗力 ： 对热、常用消毒剂、红霉素敏感 75%乙醇 0.5min可杀灭； 耐低温和干燥（冷冻干燥保存30年）,感染性 胞外稳定性 繁殖力 代谢活性 原体 0.2-0.4um + + - - 始体 0.5-1.0um + +,培养特性： 鸡胚卵黄囊接种 Hela细胞,抗原结构： 属特异性抗原（位于胞壁，脂多糖） 种特异性抗原（主要外膜抗原，MOMP） 型特异性抗原（种间分血清型依据） 主要外膜蛋白易变异,衣原体分类：,衣原体属： 沙眼生物变种沙眼衣原体 性病淋巴肉芽肿变种 鼠生物变种 肺炎衣原体 鹦鹉热衣原体 兽类衣原体,二、致病性与免疫性,致病物质与机制： 脂多糖（LPS）：抑制宿主细胞代谢，破坏宿主细胞 外膜蛋白： 阻止吞噬体与溶酶体结合 表位变异而逃避抗体的中和 热休克蛋白：沙眼瘢痕的形成,免疫性： 不强且短暂 易持续感染，反复感染 如沙眼,主要病原性衣原体,沙眼生物型 14个血清型 沙眼 (A、B、Ba、C血清型) 包涵体结膜炎 (B、Ba、D-K血清型) 非淋菌性泌尿生殖道感染(D- K血清型) 婴幼儿肺炎 (D-K血清型)性病淋巴肉芽肿型 4个血清型 性病淋巴肉芽肿 (L1、L2、L2a、L3血清型)肺炎嗜衣原体 呼吸道感染 （TWAR血清型）,（一）沙 眼,目前世界上致盲的第一位病因,通过 眼眼 或 眼手眼 途径传播,眼结膜上皮细胞易感，其胞质内形成包涵体,早期，流泪，结膜充血及滤泡增生，伴脓性分泌物,晚期，结膜瘢痕，眼睑内翻，倒睫，角膜血管翳，失明,沙眼衣原体,沙眼角膜血管翳,新发现：沙眼衣原体G型与宫颈鳞癌的发生密切相关,（二）包涵体结膜炎,新生儿包涵体结膜炎：产道感染 性接触手眼成人包涵体结膜炎 污染的游泳池水眼,引起滤泡性结膜炎，症状似沙眼，但无沙眼的后期症状,沙眼衣原体,（三）泌尿生殖道感染,非淋菌性尿道炎,男性：并发附睾炎、前列腺炎等,女性：并发宫颈炎.卵巢炎.盆腔炎等,性 传 播 疾 病,淋菌混合感染,沙眼衣原体,（四）性病淋巴肉芽肿,人是唯一宿主,性传播疾病,侵犯淋巴组织,男性：腹股沟淋巴结炎和慢性肉芽肿,女性：会阴肛门直肠狭窄和梗阻,腹股沟淋巴结炎,肺炎嗜衣原体,人是唯一宿主,飞沫或呼吸道分泌物传播,是呼吸道疾病重要的病原体，肺炎、支气管炎等,表现为咽痛、咳嗽、咳痰、发热等,新发现：肺炎嗜衣原体与冠状动脉粥样硬化的形成有关,（五）呼吸道感染,微生物学检查法,（一）直接涂片镜检 Giemsa染色，沙眼还 要做碘液染色，查包涵体（二）酶抗体法检查抗原 用抗衣原体抗体 、酶标抗体IgG（三）分离衣原体 小鼠腹腔、鸡胚卵黄囊或 培养细胞 （四）血清学诊断 （五）检查核酸 PCR，杂交等，特异性及敏 感性高,Giemsa染色,Lugal碘液染色,微生物学检查与防治,特异性荧光抗体血清检测衣原体原体,注意个人卫生（流水洗脸、防治性病等）红霉素、喹诺酮类药物治疗疫苗（尚无）,防治原则：,复习思考题,名词解释：衣原体简述衣原体生活周期，比较原体始体。简述衣原体所致疾病类型及其型别。,第22章 螺旋体Spirochetes,概述 钩端螺旋体属 密螺旋体属,I 概述,螺旋体 (Spirochete) - 一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。生物学性状与细菌相似。 基本结构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等。,1 概念,2 分类 与人致病有关的螺旋体根据螺旋数目、螺旋规则程度、螺旋间距分： *钩端螺旋体属 *密螺旋体属 *疏螺旋体属,名称 螺旋数 螺旋 其他特点 举例疏螺旋体 3-10 不规则 回归热疏螺旋体 伯氏疏螺旋体密螺旋体 8-14 规则，细密 两端尖 苍白密螺旋体苍白亚种钩端螺旋体 规则，更细密 两端钩状 问号状钩端螺旋体,重要的螺旋体,螺旋体的科和属,螺旋体 引起人类疾病 病原体螺旋体科密螺旋体属(Treponema) 梅毒 苍白密螺旋体苍白亚种疏螺旋体属(Borrelia) 莱姆病 伯氏疏螺旋体 流行性回归热 回归热疏螺旋体 钩端螺旋体科钩端螺旋体属(Leptospira) 钩端螺旋体病 问号状钩端螺旋体,第一节 钩端螺旋体 Leptospira,1 生物学性状,形态与染色 螺旋细密（5-15um 长，0.1-0.2um宽）、规则 一端/两端钩状，菌体成8、S或C形 在暗视野显微镜下运动活泼 G-, Fontana镀银染色,染成棕褐色,培养特性 营养要求高 10%兔血清的Korthof培养基 温度 28oC-30oC , PH 7.2-7.4 生长缓慢（1-2周），菌落小抵抗力 抵抗力弱，但在潮湿环境中可生存数月 对青霉素敏感,三、致病性与免疫性,1、致病物质内毒素样物质：溶血素：注射入小羊，可出现贫血、出血、肝肿大、黄疸 和血尿。细胞毒性因子：患者急性期血浆中存在，将之注射小鼠， (CTF) 可出现肌肉痉挛、呼吸困难而死亡。 致细胞病变物质：注射入家兔，可形成红斑和水肿。主要 引起细胞的退行性病变。,二、致病性与免疫性,所致疾病,钩端螺旋体病-一种人畜共患传染病,传染源,储存宿主,传播途径,鼠和猪,人与污染水或土壤接触,经粘膜或破损皮肤进入;经胎盘垂直传播,动物：多不发病， 在肾脏繁殖-尿-排出,流行季节：秋收水稻、雨季或洪水时,临床表现,疾病特点,起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大,临床特征：寒热“三痛”爬不起，拒绝检查腓肠肌，眼红出血淋巴肿，流行多在夏秋季。,眼结膜充血,3 免疫性 特异性的体液免疫特异性抗体 4 微生物检查法 1）病原学诊断 取标本镜检分离培养动物实验 2）血清学诊断 5 防治方法 抗菌疗法 药物： 青霉素,非特异性：防鼠，灭鼠，圈猪， 保护水源特异性 构体外膜亚单位疫苗治疗药物首选青霉素,检查与防治,病原体检查：,直接镜检、分离培养、动物试验及其他,血清学诊断：,显微镜凝集试验、补体结合试验、间接凝集试验,防治原则：,第二节 梅毒螺旋体Treponema pallidum（苍白密螺旋体苍白亚种）,Syphilis is a Public Health Problem Worldwide,12 Million New Cases Each Year,90% of cases occur in developing nations,Sub-saharan Africa33%South and Southeast Asia33%Latin America and Caribbean25%North Africa and Middle East3%East Asia and Pacific2%North America1%Western Europe1%Eastern 1% Europe,Source: World Health Organization. Global prevalence and incidence of selected curable sexually transmitted diseases: overview and estimates. Figure 9: Estimated new cases of syphilis among adults, 1999.,一、生物学性状,大小 0.10.2 78um形态染色 两端尖直、8-14个密螺纹 Fontana镀银染色呈棕褐色 暗视野下，观察运动活泼,暗视野显微镜下观察,梅毒螺旋体,梅毒螺旋体，Fontana镀银染色,抵抗力 极弱， 对红霉素、青霉素、砷剂敏感 注：4血库存放3天以上的血液无传染梅毒的危险,培养 组织细胞培养，但生长困难,二、致病性-梅毒,致病物质：荚膜样物质（唾液酸、粘多糖） 主要外膜蛋白，透明质酸 传 染 源： 梅毒病人（人是唯一宿主）传播途径：三种（性传播、血液传播、垂直传播）,先天梅毒：三联征 锯齿形牙、间质性角膜炎（垂直传播） 神经性耳聋后天梅毒：传染过程分三期，反复隐伏和再发（性传播、血液传播）,先 天 梅 毒,先天梅毒儿,锯齿形牙,锯齿形牙,间质性角膜炎,第一期：硬性下疳期第二期：梅毒疹期第三期：树胶肿期,后天梅毒,早期梅毒,晚期梅毒,3 weeks,皮肤粘膜,梅毒螺旋体,硬性下疳,传染！,梅毒螺旋体潜伏在体内,23个月,无症状潜伏期,梅毒疹期,3周3月症状消退而痊愈,少数病例潜伏感染,约4年,早期梅毒传染性强破坏性小,晚期梅毒树胶肿期,I期梅毒 生殖器硬下疳,梅毒皮疹（II期）,梅毒全身皮疹（II期）,树胶肿（III期）,鞍状鼻,梅毒性主动脉瘤,三、免疫性,特异性制动抗体-抗TP抗体反应素（IgA+IgM）-抗脂质抗体 辅助诊断，非特异性,传染性免疫以细胞免疫为主两种抗体,四、微生物学检查,非密螺旋体抗原试验 (RPR test或USR test) 密螺旋体抗原试验 荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTAABS) 梅毒螺旋体制动试验(TPI) 梅毒螺旋体血凝试验(TPHA),直接镜检荧光抗体镜检,检查梅毒螺旋体,血清学试验,梅毒诊断：病史+临床症状+病原体检测+血清学检测,五、防治原则,加强卫生宣传和社会管理避免经性接触而感染病人应早诊断及彻底治疗治疗首选青霉素且剂量要足,思考题,1.钩端螺旋体所致疾病、传染源储存宿主，传播途径？2.梅毒螺旋体所致疾病、传播途径？,1.能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物是A.细菌B.衣原体C.支原体D.立克次体E.病毒,2.关于支原体的生物学性状，下述错误的是A.无细胞壁B. 能通过滤菌器C.呈多形性D.有独特生活周期E.细胞膜中胆固醇含量高,3.关于肺炎支原体，下述错误的是A.是原发性非典型性肺炎的病原体B.主要经呼吸道传播C.侵入人体后靠顶端结构吸附于细胞表面D.病理变化以间质性肺炎为主E.首选青霉素治疗,4.立克次体与细菌的主要区别是A.有细胞壁和核糖体B.含有DNA和RNA两种核酸C.以二分裂方式繁殖D.严格的细胞内寄生E.对抗生素敏感,5.普氏立克次体主要的传播途径是A呼吸道B.消化道C.虱叮咬后入血D.蚤叮咬后入血E.性接触,由立克次体引起的疾病是A.梅毒B.沙眼C.莱姆病D.性病淋巴肉芽肿E.恙虫病,有关衣原体发育周期的描述不正确的是A.原体具有感染性B.始体在发育周期中无感染性C.始体较原体小D.始体在空泡内以二分裂形式繁殖 形成子代原体E