骨髓细胞形态学检查.ppt

骨髓细胞形态学检查 骨髓 骨髓 人体的主要造血器官 组成 由分布于骨小梁之间的基质 血管 神经 网状组织和发育过程中的血细胞组成 一 血细胞的生成 发育规律 造血干细胞的功能特点 自我更新多向分化血细胞的生成 造血微环境 造血细胞生长因子干细胞祖细胞各系原始细胞幼稚细胞成熟细胞 血细胞的发育过程 髓系 红细胞系统 Epo 粒 单细胞系统 粒系嗜中性 GM CSF 嗜酸性嗜碱性单核系巨核细胞系统 Meg CSF和Tpo 淋系 T淋巴细胞B淋巴细胞 浆细胞 血细胞发育中形态学演变规律 细胞的大小及外形细胞质细胞核核质比例 血细胞发育 演变规律图 原始 幼稚 红系和粒系 早幼 中幼和晚幼 成熟 胞体 大 小 巨核细胞 小 大 且不规则 胞核 大小 大 小 红细胞核消失 巨核细胞 小 大 形状 圆 不规则染色质 细致稀疏 粗糙致密 浅 深核仁 多 少 无 清晰 模糊 消失胞质 数量 少 多染色 嗜碱 深染 嗜碱 淡染 嗜酸 淡染 单核细胞和淋巴细胞仍嗜碱 特殊物质 血红蛋白 特殊颗粒等 无 少 多核 质 大 小 核大质少 核小质多 巨核细胞则相反 二 骨髓细胞形态学检查方法和内容 骨髓涂片 骨髓穿刺术骨髓活检 骨髓活组织检查术 骨髓涂片检查 低倍镜检查 1 确定取材和涂片 染色是否满意2 判断骨髓增生程度3 巨核细胞计数4 观察有无异常细胞油镜检查 1 有核细胞分类计数2 观察细胞形态 骨髓涂片镜检结果分析 骨髓增生程度 有核细胞与成熟红细胞比值各系细胞及其各发育阶段细胞的比例 形态各系细胞比例改变的临床意义有无特殊细胞及寄生虫 增生程度有核细胞 成熟红有核细胞 常见疾病 极度活跃1 150 以上各类型白血病 明显活跃1 1010 以上各类型白血病 增生性贫血 ITP 增生活跃1 205 左右正常骨髓或某些贫血 增生减低1 501 以下再障 粒缺或粒细胞减少症 增生极度减低1 3000 5 以下再障 骨髓增生程度 5级 骨髓各系细胞比例的正常范围 粒系 50 60 原粒 1 早幼粒 5 红系 20 淋巴系 20 单核细胞系 4 浆细胞系统 2 巨核细胞 7 35个其他细胞 极少量 骨髓各系细胞比例改变的临床意义 一 粒细胞系统granulocytes 1 粒系细胞增多各型粒细胞性白血病急性炎症和感染性疾病类白血病反应 2 粒系细胞减少再生障碍性贫血粒细胞缺乏或减少症 二 红细胞系统erythron 1 红系细胞增多增生性贫血急性红白血病真性红细胞增多症 2 红系细胞减少再生障碍性贫血 纯红再障 三 粒 红比例 G E 参考值为2 4 1比例正常 正常人骨髓 两系细胞同时或成比例增多或减少 如再生障碍性贫血 骨髓纤维化 骨髓瘤 骨髓转移癌等 G E 比例增加 G E 5 1 粒系细胞增多 红系细胞生成受抑比例减低 G E 2 1 粒系细胞减少 红系细胞增多 四 淋巴细胞系统lymphocytes 1 淋巴细胞绝对性增多急 慢性淋巴细胞性白血病淋巴瘤传染性淋巴细胞增多症传染性单核细胞增多症病毒感染 2 淋巴细胞相对性增多再生障碍性贫血粒细胞缺乏或减少症 五 单核细胞系统monocytes 增多急性单核细胞性白血病急性粒单细胞性白血病骨髓增生异常综合征感染性疾病自身免疫性疾病恶性肿瘤 六 浆细胞系统plasmacytes 增多多发性骨髓瘤浆细胞白血病巨球蛋白血症反应性浆细胞增多 慢性炎症 感染 肿瘤 自身免疫性疾病 过敏性疾病再生障碍性贫血 粒细胞缺乏 七 巨核细胞系统megakaryocytes 增高 1 特发性血小板减少性紫癜 2 Evans综合征 3 骨髓增殖性疾病 4 脾功能亢进和大出血后 5 AML M7减低 1 再生障碍性贫血 2 急性白血病 除外AML M7 3 其他骨髓病 放射病 4 急性感染 中毒 三 血细胞的细胞化学染色 过氧化物酶 peroxidase POX 苏丹黑染色 SudanblackBstain SB 中性粒细胞碱性磷酸酶 Neutrophlialkalinephosphatase NAP 非特异性酯酶染色 NSE NaF抑制试验糖原染色 periodicacid Schiff sreaction AS 铁染色酸性磷酸酶染色 acidphosphatase ACP 特异性酯酶染色 specificesterase SE POX 原理 结果 强阳性 胞质中蓝黑色颗粒粗大而密集弱阳性 胞质中蓝黑色颗粒细小而稀疏阴性 胞质中无蓝黑色颗粒者 正常参考值 POX主要存在于粒细胞系统 原粒细胞为阴性 随细胞的成熟反应越强 但嗜碱性粒细胞为阴性 临床意义 阳性反应 急性粒细胞性白血病 阴性反应 急性淋巴细胞性白血病 SB 原理 结果和正常参考值 与POX染色大致相同 临床意义 同POX染色反应 NAP 原理 结果 NAP主要存在于成熟粒细胞胞浆中 其他血细胞均为阴性反应 正常参考值 阳性率 平均为10 40 以 十 阳性反应为主 积分值 阳性积分值40 80 分 临床意义 慢性粒细胞性白血病与类白血病反应的鉴别 CML时NAP活性明显减低 类白血病反应NAP活性极度增高 阵发性睡眠性血红蛋白尿与再生障碍性贫血的鉴别 前者NAP活性减低 后者增高 急性白血病类型的鉴别 急性淋巴细胞白血病时NAP活性增高 急性粒细胞白血病时减低 其他血液病 淋巴瘤 骨髓增值性疾病 慢性淋巴细胞性白血病等NAP活性中度增高 其他情况 肾上腺皮质激素功能亢进 妊娠及应用肾上腺皮质激素 雌激素等 NAP积分可增高 NSE NaF抑制试验 正常参考值 NSE主要存在于单核细胞中 从原单核细胞到成熟单核细胞逐渐增强 粒细胞一般呈阴性或弱阳性 临床意义 急性单核细胞性白血病为强阳性 且可被氟化钠所抑制 急性粒细胞性白血病与均为阴性或弱阳性 但阳性反应不被氟化钠所抑制 急性淋巴细胞性白血病为阴性反应 PAS 正常参考值 有核红细胞呈阴性反应 淋巴细胞多呈阴性 少数弱阳性 粒系中 原粒细胞糖原染色 早幼粒以下阶段为 逐渐增强 单核细胞呈弱阳性反应巨核细胞和血小板呈阳性反应 临床意义 鉴别红白血病与其他幼红细胞增多的疾病 红白血病时幼红细胞的PAS染色呈强阳性反应 积分值增高 鉴别良性与恶性淋巴细胞增生性疾病 恶性淋巴细胞增生性疾病 其淋巴细胞的PSA染色积分值增高 病毒感染等淋巴细胞良性增生时 淋巴细胞积分值正常 三种急性白血病类型的鉴别 急性粒细胞白血病时 原始及幼稚粒细胞PAS染色常呈阴性反应 急性淋巴细胞白血病时 原始及幼稚淋巴细胞常呈阳性反应 阳性物质呈粗颗粒或块状 急性单核细胞白血病时 原始及幼稚单核细胞多呈强阳性反应 阳性物质呈均匀弥漫或细颗粒状 鉴别某些细胞类型 1 不典型的巨核细胞与李 斯 Reed sternberg 细胞的鉴别 前者呈阳性反应 后者一般为阴性或弱阳性反应 2 高雪细胞与尼曼匹克细胞的鉴别 前者呈阳性反应 后者一般为阴性或弱阳性反应 3 腺癌细胞呈强阳性反应 骨髓转移时有助于与白血病细胞的鉴别 细胞化学染色 急淋急粒急单过氧化物酶 分化差的原始细胞 POX 分化好的幼稚细胞 糖原染色粗颗粒或块状弥漫性淡红色淡红色细颗粒状 PAS 非特异酯酶 NaF抑制不敏感可被NaF抑制 NSE 碱性磷酸酶增加减少或 正常或增加 NAP PAS 糖原染色 用于鉴别红白血病M6 强阳性 和巨幼贫 铁染色 结果 细胞外铁 按阳性强度 蓝色物质 蓝色颗粒 蓝色小珠 分为5级 细胞内铁 以铁粒幼细胞所占的百分率表示 环状铁粒幼细胞 10个以上的粗大铁粒 环绕细胞核排列超过核周径的2 3以上 参考值 细胞外铁 一般为 或 细胞内铁 阳性率为20 90 平均为65 细胞浆内常见1 5个铁染色颗粒 临床意义 缺铁性贫血 细胞外铁明显降低或消失 细胞内铁阳性率减低 常 15 细胞浆内铁粒变小 变淡 非缺铁性贫血 恶性贫血 再生障碍性贫血 溶血性贫血时 细胞外铁多为 到 细胞内铁阳性率增加 铁粒幼细胞性贫血 细胞内铁阳性率明显增加 并可见到环状铁粒幼细胞 ACP 毛细胞呈阳性反应且不为L 酒石酸所抑制 有助于毛细胞白血病的诊断 鉴别T淋巴细胞与B淋巴细胞 鉴别高雪病和尼曼 匹克病 前者呈阳性反应 后者为阴性 网状细胞 吞噬细胞 组织细胞和单核细胞均呈阴性反应 SE 急性粒细胞性白血病呈强阳性反应急性单核细胞白血病和急性淋巴细胞白血病均呈阴性反应急性粒 单核细胞性白血病时 白血病细胞部分阳性 部分阴性 四 常见血液病血液学特点 一 贫血 按照病因和发病机制 造血不良性贫血 溶血性贫血及失血性贫血按照细胞形态特点 大细胞性 正常细胞性 小细胞及小细胞低色素性 按照骨髓增生情况 增生性贫血 包括缺铁性贫血 溶血性贫血 急性失血性贫血和巨幼细胞性贫血 增生不良性贫血 主要为再生障碍性贫血 缺铁性贫血 irondeficiencyanemia 最常见铁缺乏 缺铁性贫血血象特点 Hb RBC均减少 以血红蛋白减少更为明显 成熟红细胞大小不一 以小为主 中空区扩大 网织红细胞正常或轻度增多 粒细胞 血小板正常 若由于寄生虫所致 如钩虫病 嗜酸粒细胞增多 IDA 缺铁性贫血骨髓象特点 增生活跃或明显活跃 粒红比值减低 有核红细胞增多 红系增生明显 以中 晚幼细胞为主 老核幼浆 成熟红细胞体积小 中空区扩大 粒系和巨核细胞变化不大 基本正常 巨幼细胞贫血 megaloblasticanemia 叶酸缺乏维生素B12缺乏 巨幼细胞性贫血血象特点 Hb RBC均减少 为大细胞性贫血 成熟红细胞大小不一 以大为主 偶见幼红细胞 网织红细胞正常或轻度增多 白细胞多正常 可见核分叶过多现象 血小板可正常或减少 严重时全血细胞减少 巨幼细胞性贫血骨髓象特点 骨髓增生明显活跃红系常可达40 50 伴有巨幼变粒系相对减少 巨粒细胞可较早出现 可伴分叶过多巨核细胞大致正常或增多 可有核分叶过多 MA 溶血性贫血 hemolyticanemia 红细胞破坏增多贫血 黄疸 脾大 溶血性贫血血象特点 正细胞 正色素性贫血红细胞大小不等 畸形常见 网织红细胞明显增多白细胞和血小板多为正常 急性溶血时可增多 溶血性贫血骨髓象特点 骨髓增生明显活跃红系常可 30 急性溶血可达 50 以中 晚幼红为主 粒系相对减少 各阶段比例及形态大致正常G E倒置巨核细胞系大致正常 HA 再生障碍性贫血 aplsticanemia AA 造血干细胞数量或质量的异常全血细胞减少根据疾病发展和血液学特点 可分为 急性型慢性型 再生障碍性贫血血象特点 红细胞和血红蛋白平行下降 贫血为正细胞 正色素性白细胞明显减少 中性粒细胞减少淋巴细胞相对增高血小板明显减少网织红细胞减少 再生障碍性贫血骨髓象特点 增生减低或极度减低 粒系及红系均减少 淋巴细胞相对增多 浆细胞 网状细胞 组织嗜碱细胞增多 巨核细胞减少甚至缺乏 若为慢性再障 可出现骨髓呈灶性增生 表现为骨髓象增生活跃 但巨核细胞明显减低或缺乏 二 白血病Leukemia 白血病是造血系统的一种恶性肿瘤 其特征为造血组织中某一类血细胞过度增生 并浸润和破坏其它组织 骨髓和外周血中常有血细胞质和量的异常 临床常有贫血 发热 出血和肝 脾 淋巴结肿大等表现 根据自然病程及血细胞的分化程度而分急性 慢性 根据白血病细胞类型不同而分为髓细胞性和淋巴细胞性 Leukemia 1 急性白血病 acuteleukemia AL 病程短 6个月 骨髓和血液中以分化差的原始 幼稚细胞大量增殖为主 慢性白血病 chronicleukemia CL 骨髓和血液中以成熟或接近成熟的异常细胞为主 Leukemia 2 急性白血病血象特点 正细胞 正色素性贫血 少数可出现幼红细胞白细胞计数可增多 减少或正常 可出现幼稚细胞血小板计数减少 急性白血病骨髓象特点 骨髓增生明显活跃或极度活跃某一系或两系的血细胞过度异常增生 原始 幼稚细胞明显增多 30 ANC其他系列细胞受抑细胞特殊形态或结构 Auer小体 蓝细胞 Leukemia 4 白血病FAB分型 急性髓细胞白血病 AML ANLL M1 M7 急性淋巴细胞白血病 ALL L1 L2 L3 慢性粒细胞白血病 CML 慢性淋巴细胞白血病 CLL Leukemia 3 急性粒细胞白血病 Leukemia 5 早幼粒细胞白血病 Leukemia 6 早幼粒细胞白血病POX Leukemia 7 急性单核细胞白血病 Leukemia 8 急性淋巴细胞白血病 Leukemia 9 慢性粒细胞白血病 chronicmyelocyticleukemia CML 慢性起病 青壮年多见粒细胞显著增高和脾脏显著增大Ph染色体和abl bcr融合基因 CML血象特点 早期可无贫血 病情进展可出现正色素正细胞性贫血白细胞显著增高 以中性晚幼粒细胞为主 原粒细胞和早幼粒细胞 10 嗜碱性粒细胞增高血小板早期增高或正常 晚期可进行性下降 CML骨髓象特点 骨髓增生极度活跃粒系显著增生 G E明显增高 以中幼粒以下阶段细胞为主 原 早幼 10 嗜碱 嗜酸细胞 10 红系增生受抑巨核细胞早期增多 晚期减少 慢性粒细胞白血病 Leukemia 10 慢性淋巴细胞白血病 chroniclymphocyticleukimia CLL 老年男性 欧美多见全身淋巴结进行性肿大 脾大皮肤病变及免疫缺陷病程长 Leukemia 11 CLL血象特点 早期可无贫血 病情进展或并发溶血时 可出现正色素正细胞性贫血白细胞显著增高 以小淋巴细胞为主中性粒细胞减少血小板早期增高或正常 晚期可进行性下降 CLL骨髓象特点 骨髓增生明显活跃或极度活跃淋巴系显著增生 50 以成熟小淋巴细胞为主粒系 红系增生受抑 并发溶血时 红系可增生巨核细胞早期增多 晚期减少 三 原发性血小板减少性紫癜 idiopathicthrombocytopenicpurpura ITP 自身免疫性疾病血小板抗体产生 导致血小板破坏过多巨核细胞成熟受抑临床分为 急性型慢性型 ITP血象特点 红细胞和血红蛋白常正常 急性或慢性出血时可合并贫血白细胞计数多正常血小板减少 ITP骨髓象特点 骨髓增生明显活跃红系和粒系比例 形态常无明显异常 合并出血时红系可增多巨核细胞增多 伴成熟障碍 五 细胞免疫分型 即细胞免疫标记检测 是利用单克隆抗体及免疫学技术对细胞膜表面和 或细胞内存在的特异性抗原进行检测 常用 流式细胞仪 FCM 临床应用 识别不同系列的细胞识别不同的淋巴细胞检测T淋巴细胞亚群识别不同分化阶段的细胞识别不同功能状态的细胞分离 鉴定不同系列和不同分化阶段的细胞白血病免疫分型白血病微小残留病的检测 AML免疫分型 M1M2M3M4M5M6M7CD13 CD33 CD14 CD41 Ret ALL免疫分型 CD2CD7CD19HLA DRCD33T B 六 细胞遗传学分析 临床常见白血病染色体改变 染色体改变融合基因M2t 8 21 q22 q22 AML1 ETOM3t 15 17 q22 Q21 PML RAR RAR PMLM4Eoint del 16 q22 CBFB MYH11M5t del 11 q23 MLL ENLL3 B ALL t 8 14 q24 q32 MYC与IgH并列ALL 5 20 t 9 22 q34 q11 bcr abl m