人体及动物生理学实验课件上.ppt

人体及动物生理学实验课件 李立德 中国海洋大学生物基础实验中心 通过本课程的教学 使学生逐步掌握生理学常用仪器和生理信号计算机处理系统的使用方法 并逐步掌握生理学实验活体解剖技术和方法 使学生逐步提高对实验中出现的各种生理现象和情况的观察能力 分析能力 独立思考能力和独立解决问题的能力 使学生了解生理学实验设计的基本原则 了解获得生理学知识的科学方法 验证生理学的某些基本原理 在实验教学过程中 逐步培养学生在科学工作中的严肃的态度 严格的要求 严密的方法和严谨的作风 人体及动物生理学实验 人体及动物生理学实验 目录 实验一坐骨神经 腓肠肌标本的制备 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回目录 基本原理 方法与步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 实验一坐骨神经 腓肠肌标本制备 返回 目的要求 1 学习蛙类动物双毁髓的实验方法 2 学习并掌握坐骨神经 腓肠肌标本的制备方法 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 动物与器材 蟾蜍或蛙 常用蛙类手术器械 蛙板 玻璃板 固定针 锌铜弓 培养皿 滴管 纱布 粗棉线 任氏液 实验一坐骨神经 腓肠肌标本制备 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 方法与步骤 1 损毁脑和脊髓 讲握蟾蜍方法 进针部位和损毁方法 2 去除躯干上部及内脏 3 剥皮 4 分离两后肢 注意操作要小心 切勿剪断坐骨神经 取一只后肢继续剥制标本 另一只放入任氏液中备用 5 制备坐骨神经 腓肠肌标本 游离坐骨神经 完成坐骨神经 小腿标本 6 制备完整的坐骨神经 腓肠肌标本 7 检验标本的兴奋性 实验一坐骨神经 腓肠肌标本制备 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 注意事项 制备标本过程中经常用任氏液湿润去皮的标本 实验一坐骨神经 腓肠肌标本制备 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 思考题 1 剥去皮肤的后肢 能用自来水冲洗吗 为什么 2 金属器械碰压 触及或损伤神经及腓肠肌 可能引起哪些不良后果 3 如何保持标本的机能正常 实验一坐骨神经 腓肠肌标本制备 实验二刺激强度与肌肉收缩反应的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回目录 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 实验二刺激强度与肌肉收缩反应的关系 返回 目的要求 1 学习肌肉实验的电刺激方法及肌肉收缩的记录方法 2 观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 基本原理 腓肠肌由许多肌纤维组成 刺激腓肠肌时 不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应 当刺激强度过小时 不引起肌肉发生收缩发应 此时的刺激为阈下刺激 当全部肌纤维同时收缩时 则出现最大收缩发应 这时 即使再增大刺激强度 肌肉收缩的力量也不再随之加大 可以引起肌肉发生最大收缩发应的最小刺激强度为最适刺激强度 实验二刺激强度与肌肉收缩反应的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 动物与器材 蟾蜍 或蛙 的腓肠肌标本 常用手术器械 计算机采集系统 张力传感器 30g 刺激电极 支架 双凹夹 肌槽 瓷盘 滴管 任氏液 橡皮泥 棉线 实验二刺激强度与肌肉收缩反应的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 方法与步骤 1 开启刺激 观察肌肉收缩反应 如果肌肉无收缩反应 则适当增加刺激强度 其他刺激参数保持不变 间隔少许时间 同法进行第二次刺激 直到出现最小收缩 测量收缩幅度并记下刺激强度 此时的刺激强度为阈强度 2 同法逐渐增强刺激强度 观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系 3 当刺激强度达到某一数值后 肌肉收缩幅度不再随刺激强度的增加而升高 记录3 4次同等高度的收缩曲线和刺激强度 4 将结果填入表中 实验二刺激强度与肌肉收缩反应的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 注意事项 1 实验过程经常用任氏液浸润标本 2 每次刺激标本时间不超过5秒 3 每次刺激后 标本休息30秒 实验二刺激强度与肌肉收缩反应的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 思考题 1 如何保持标本在实验过程中机能稳定 2 何为标本的最适刺激强度 3 观察实验中同一标本的阈刺激强度与最适刺激强度是否会变化 为什么 实验二刺激强度与肌肉收缩反应的关系 实验三刺激频率与肌肉收缩的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回目录 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 目的要求 1 了解骨骼肌收缩的总和现象 2 观察不同频率的阈上刺激引起肌肉收缩形式的改变 实验三刺激频率与肌肉收缩的关系 返回 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 基本原理 两个同等强度的阈上刺激 相继作用于神经 肌肉标本 如果刺激间隔大于单收缩的时程 肌肉则出现两个分离的单收缩 如果刺激间隔小于单收缩的时程 则出现两个收缩反应的重叠 称为收缩的总和 当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时 出现多个收缩反应的融合 称为强直收缩 后一收缩发生在前一收缩的舒张期时 称为不完全强直收缩 后一收缩发生在前一收缩的收缩期时 各自的收缩完全融合 肌肉处于持续的收缩状态 称为完全强直收缩 返回 实验三刺激频率与肌肉收缩的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 动物与器材 蟾蜍或蛙 常用手术器械 肌槽 计算机采集系统 张力换能器 培养皿 滴管 任氏液 返回 实验三刺激频率与肌肉收缩的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 方法与步骤 1 制备坐骨神经 腓肠肌标本并将其固定在肌槽上 选择适当刺激强度 以单脉冲刺激神经 记录肌肉收缩曲线 2 刺激强度不变 以较长的间隔输出两个单脉冲刺激标本 肌肉则出现两个分离的单收缩 记录收缩曲线 3 用同等刺激强度 缩短刺激间隔 刺激标本 记录肌肉收缩曲线 4 改用连续刺激 以2次 s的频率刺激标本 记录肌肉收缩曲线 5 依次改变刺激频率为6次 s 10次 s 20次 s和25次 s 记录肌肉收缩曲线 返回 实验三刺激频率与肌肉收缩的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 注意事项 实验过程中要经常用任氏液湿润标本 每次刺激后应使肌肉休息30s 连续刺激不可超过5s 返回 实验三刺激频率与肌肉收缩的关系 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 思考题 1 讨论肌肉发生不完全强直收缩及完全强直收缩的条件与机制 2 人们日常生活中哪些动作属于强直收缩 返回 实验三刺激频率与肌肉收缩的关系 实验四神经干动作电位的测定 人体及动物生理学实验 返回目录 基本原理 动物器材 方法步骤 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 实验四神经干动作电位的测定 目的要求 1 学习蟾蜍坐骨神经干标本的制备方法 2 观察蛙坐骨神经干复合动作电位的波形 并了解其产生的基本原理 返回 基本原理 动物器材 方法步骤 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 实验四神经干动作电位的测定 基本原理 神经干受到有效刺激后 可以产生动作电位 在另一端可以引导出双相的动作电位 如果在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏 则引导出的动作电位即为单相动作电位 坐骨神经干是以由很多不同类型的神经纤维组成的 所以 神经干的动作电位是复合动作电位 复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的 返回 基本原理 动物器材 方法步骤 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 实验四神经干动作电位的测定 动物器材 蟾蜍或蛙 常用手术器械 计算机采集系统 神经屏蔽盒 任氏液 返回 基本原理 动物器材 方法步骤 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 实验四神经干动作电位的测定 返回 方法步骤 1 制备蛙或蟾蜍坐骨神经干标本 2 将蛙的坐骨神经干标本置于屏蔽盒内的电极上 神经干的中枢端置于刺激电极一侧 从末梢端引导动作电位 3 实验观察与记录 1 神经干兴奋阈值的测定 2 双相动作电位 3 单相动作电位 基本原理 动物器材 方法步骤 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 实验四神经干动作电位的测定 注意事项 1 注意保持标本的活性良好 经常用任氏液湿润之 2 如果发现动作电位图形倒置 将引导电极位置交换即可 返回 基本原理 动物器材 方法步骤 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 实验四神经干动作电位的测定 思考题 1 通常记录到的双相动作电位的第一相和第二相为何在波形 幅值上不对称 在什么情况下可记录到对称的双相动作电位 在什么情况下可记录到单相动作电位 2 在一定范围内 神经干动作电位的幅度为何随刺激强度的增大而增大 这与动作电位的 全或无 规律是否矛盾 返回 实验五神经冲动传导速度的测定 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回目录 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 目的要求 1 进一步学习电刺激器 计算机处理系统的使用方法 2 了解神经干动作电位传导速度测定的基本原理和方法 返回 实验五神经冲动传导速度的测定 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 实验五神经冲动传导速度的测定 基本原理 神经纤维的生理特性之一是具有高度的传导性 不同类型的神经纤维传导速度不同 其传导速度主要受神经纤维的直径 内阻及有无髓鞘的影响 如测得神经冲动在神经干上传导的距离与时间 可根据速度 v 距离 s 时间 t 求出神经冲动传导速度 两栖类的坐骨神经是混合神经 包含多种粗细不等的神经纤维 其直径约为3 29 m 坐骨神经中以A类纤维为主 传导速度约为35 40m s 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 实验五神经冲动传导速度的测定 动物器材 蟾蜍或蛙 常用手术器械 计算机采集系统 神经屏蔽盒 任氏液 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 方法步骤 1 制备坐骨神经标本 要求神经干尽量分离得长些 2 连接计算机采集系统与神经标本屏蔽盒 将坐骨神经标本置于屏蔽盒内 中枢端置于刺激电极一侧 两对引导电极的距离愈远愈好 3 两对引导电极分别接1和2通道 4 点击刺激后 1和2通道分别引导出动作电位图形 5 测量神经屏蔽盒内两对电极之间的距离 s 6 按公式v s t计算神经冲动传导的速度 返回 实验五神经冲动传导速度的测定 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 注意事项 1 标本应平直地放在电极上与电极密切接触 经常湿润 但要用滤纸吸去过多的任氏液 以防短路 2 动作电位如果先下后上时 可将示波器输入导线端口对调 3 一定要将神经干粗端放于刺激电极一侧 返回 实验五神经冲动传导速度的测定 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 思考题 1 为什么实验要求两对引导电极之间的距离愈远愈好 返回 实验五神经冲动传导速度的测定 实验六坐骨神经不应期的测定 人体及动物生理学实验 返回目录 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 目的要求 1 学习测定神经不应期的基本原理和方法 2 掌握电生理仪的使用方法 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 基本原理 神经在一次兴奋后 其兴奋性发生周期性的变化 而后才恢复正常 一般把这些变化分为四个时期 绝对不应期 相对不应期 超常期和低常期 应用电生理学方法可以观察或测定神经的不应期 通过调节刺激器输出的连续双脉冲的时间间隔 可测定坐骨神经的不应期 当双脉冲的间隔时间为20ms左右时 它们引起的动作电位的幅值大小基本相同 逐渐缩短两脉冲之间的间隔 第二个动作电位逐渐向第一个动作电位靠近 振幅也随之降低 最后可因落在第一个动作电位的绝对不应期内而完全消失 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 动物与器材 蟾蜍 手术器械一套 蛙板 RM6240数据采集系统 滴管 细线 任氏液 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 方法与步骤 1 按照实验4的方法制备蟾蜍的坐骨神经干标本 2 连接计算机采集系统与神经标本屏蔽盒 将坐骨神经标本置于屏蔽盒内 中枢端置于刺激电极一侧 一对引导电极的与标本屏蔽盒准确连接 3 点击实验 选择自动测试神经干不应期 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 注意事项 1 注意保持标本的活性良好 经常用任氏液湿润之 2 如果发现动作电位图形倒置 将引导电极位置交换即可 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 思考题 1 什么是绝对不应期和相对不应期 2 绝对不应期的长短有什么生理学意义 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 人体及动物生理学实验 返回目录 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 目的要求 观察蟾蜍心脏起搏点 心脏各部分活动顺序及心脏不同部位自律性的高低 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 基本原理 心脏活动具有自律性 但各部分的自律性高低不同 窦房结的自律性最高 其每次兴奋依次激动心房 心室 引起心脏各部分的顺序活动 正常生理情况下窦房结为心脏的正常起搏点 其他部位的自律细胞称为潜在起搏点 当窦房结的兴奋传导受阻时 潜在起搏点可取代窦房结引发心房或心室活动 两栖类动物的心脏起搏点称静脉窦 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 动物与器材 蟾蜍或蛙 手术器械一套 蛙板 玻璃板 蛙心夹 滴管 细线 秒表 任氏液 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 方法与步骤 1 破坏蟾蜍脑和脊髓后 仰卧于蛙板上 用眼科剪刀仔细剪开心包 暴露出心脏 2 识别蛙心静脉窦 心房 心室 在心房与静脉窦之间有一半月形白线 即窦房沟 3 观察项目 1 静脉窦 心房 心室跳动顺序及频率 2 沿窦房沟进行结扎 斯氏第一结扎 观察心房 静脉窦活动情况 3 待心房 心室恢复跳动后 在心房 心室的交界处 房室沟 做斯氏第二结扎 观察心房 心室活动变化情况 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 注意事项 1 复习心脏兴奋的发生与传播等理论知识 2 手术过程要小心 避免出血 结扎应迅速扎紧 3 实验中经常滴加任氏液 使心脏保持湿润 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 思考题 1 第一斯氏结扎后和第二斯氏结扎后的心室搏动频率是否相同 为什么 返回 实验七蟾蜍心脏起搏点的观察 实验八蛙类心脏的期外收缩与代偿间歇 人体及动物生理学实验 返回目录 人体及动物生理学实验 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 目的要求 1 观察心室收缩活动的不同时相对额外刺激的反应 2 了解心肌的生理特性 3 通过实验阐述心肌产生期外收缩的条件与代偿间歇出现的机理 返回 实验八蛙类心脏的期外收缩与代偿间歇 人体及动物生理学实验 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 基本原理 心肌收缩的机能特性之一是具有较长的不应期 整个收缩期和舒张早期都是不应期 在心室收缩期给任何刺激 心室都不发生反应 在心室舒张期给单个阈上刺激 则产生一次正常的节律以外的收缩反应 称为期外收缩 当静脉窦传来的节律性兴奋恰好落在期外收缩的收缩期时 心室则不发生兴奋 须静脉窦传来下一次兴奋才会收缩 因此 在期外收缩之后 就会出现一个较长时间的间歇期 称为代偿间歇 返回 实验八蛙类心脏的期外收缩与代偿间歇 人体及动物生理学实验 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 动物与器材 蟾蜍或蛙 常用手术器械 蛙板 或蜡盘 蛙心夹 计算机采集系统 张力传感器 支架 双凹夹 滴管 双针形露丝刺激电极 培养皿 或小烧杯 纱布 棉线 橡皮泥 任氏液 返回 实验八蛙类心脏的期外收缩与代偿间歇 人体及动物生理学实验 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 方法与步骤 1 按实验七的方法暴露心脏 并记录心搏曲线 将刺激电极安放在心室外壁 使之既不影响心搏又能使心室紧密接触 2 记录正常的心搏曲线作对照 3 选择能引起心室发生期外收缩的刺激强度 与心室舒张起调试 分别与心室收缩期和舒张期的早 中 晚给与单个刺激 注意 刺激前后要有3 4正常心搏曲线作对照 不可连续输出两个刺激 观察心搏有无变化 重复并肯定实验结果 返回 实验八蛙类心脏的期外收缩与代偿间歇 人体及动物生理学实验 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 思考题 1 实验结果同骨骼肌比较 表明心肌有何特性2 心肌的不应期长有何生理意义 返回 实验八蛙类心脏的期外收缩与代偿间歇 实验九蛙类离体心脏灌流 人体及动物生理学实验 返回目录 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 目的要求 1 学习斯氏离体蛙心灌流法 2 了解心肌的生理特性 3 观察Na K Ca2 及肾上腺素 Adr 乙酰胆碱 ACh 等对离体心脏的影响 实验九蛙类离体心脏灌 返回 人体及动物生理学实验 基本原理 心肌具有自动节律收缩的特性 可用人工灌流的方法 观察心脏活动的规律及特点 还可用灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响 返回 实验九蛙类离体心脏灌 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 动物与器材 蛙或蟾蜍 蛙心套管 套管夹 支架 双凹夹 滑轮 烧杯 常用手术器械 蛙板 蛙心夹 计算机采集系统 张力传感器 滴管 培养皿 污物缸 纱布 棉线 橡皮泥 任氏液 0 65 NaCl 5 NaCl 2 CaCl2 1 KCl 1 5000肾上腺 1 10000乙酰胆碱 300U ml肝素 返回 实验九蛙类离体心脏灌 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 方法与步骤 1 离体心脏套管由动脉圆锥插入心室内 2 将套管固定在支架上 连接实验装置 3 实验步骤 1 记录正常心搏曲线 2 改用0 65 NaCl溶液灌流 观察心搏变化 3 加入2 6滴5 NaCl溶液 观察心搏曲线变化 4 加入1 3滴1 CaCl2溶液 观察心搏曲线变化 5 加入1 2滴1 KCl溶液 观察心搏曲线变化 6 加入1 2滴Adr 1 5000 后观察心搏曲线变化 7 加入1 2滴Ach 1 10000 后观察心搏曲线变化 4 整理实验记录 返回 实验九蛙类离体心脏灌 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 注意事项 更换药物时 避免相互交叉污染 返回 实验九蛙类离体心脏灌 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 思考题 1 本实验说明心肌的那些生理特征 2 用实验说明内环境相对恒定的意义 3 试分析任氏液中适量离子 钙离子 钾离子对心肌的影响 4 为何强调实验保持灌流液面的恒定 灌流量对心脏活动的有什么影响 5 试想 活的机体在心交感神经兴奋时或迷走神经兴奋时对心脏有何影响 返回 实验九蛙类离体心脏灌 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 实验十ABO血型鉴定与配血试验 人体及动物生理学实验 返回目录 基本原理 方法步骤 动物器材 注意事项 目的要求 思考题 人体及动物生理学实验 返回 目的要求 1 学习ABO血型的鉴定方法2 观察红细胞的凝集现象 掌握ABO血型鉴定的原理 3