MM_FS_CNJ_0187 出口水果中2,4-滴残留量检验方法.DOC

MM_FS_CNJ_0187出口水果 2,4-滴 残留量 气相色谱法 外标法定量MM_FS_CNJ_0187出口水果中2,4-滴残留量检验方法1.适用范围本方法适用于出口柑橘中2,4-滴残留量的检验。2.原理概要试样用磷酸-丙酮溶剂提取，经液-液分配净化，以三氟化硼为催化剂，将2,4-滴酯化成2,4-滴丁酯，再经弗罗里硅土-氧化铝层析柱净化，进行气相色谱仪电子俘获检测器测定。外标法定量。3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂 丙酮：分析纯； 磷酸：分析纯； 磷酸水溶液(11)； 三氯甲烷：分析纯； 乙醚：分析纯； 正己烷：分析纯； 氢氧化钠：分析纯； 磷酸氢二钠：分析纯； 磷酸盐溶液：称取2g氢氧化钠和33g磷酸氢二钠，以水溶解，稀释至1000mL； 盐酸水溶液(11)； 三氟化硼乙醚溶液：47%(V/V)； 正丁醇：分析纯； 丁酯化液：将正丁醇和三氟化硼溶液冰浴冷却至0，迅速量取30mL三氟化硼乙醚溶液和120mL正丁醇，在冰浴中混合均匀，冷却后，密闭保存于冰箱中； 弗罗里硅土(Florisil)：在650下活化4h后，置于干燥器中,放置时间超过一个星期，应用前需于130温度下加热过夜； 氧化铝(中性，层析用)：在650下活化4h后，每100g加12mL水降活,干燥器中保存； 无水硫酸钠：650灼烧4h后，保存于干燥器中； 乙醚-正己烷混合溶液(595)； 硫酸钠水溶液(20g/L)：2g无水硫酸钠溶于100mL蒸馏水中； 2,4-滴标准品：纯度大于99%； 标准溶液的配制：准确称取适量的2,4-滴标准品，用乙醚配制成浓度为0.50mg/mL的标准储备溶液,根据需要再配制成适用浓度的标准工作溶液，供酯化用。3.2.仪器 气相色谱仪，配有电子俘获检测器； 微量注射器：10L； 组织捣碎机：3000r/min； 离心机：04000r/min，可放置50mL离心管； 旋转蒸发器； 分液漏斗：500mL； 具塞锥形瓶：250mL； 具塞刻度管：10mL； 微型浓缩试管：具标准磨口，10mL； 冷凝管：具标准磨口； 层析柱：柱径10mm，柱长150mm，在柱底部先塞入少量玻璃棉，依次加入1g弗罗里硅土、1g中性氧化铝和2g无水硫酸钠； K-D浓缩器。4.试样的抽取与制备4.1.检验批 以不超过1500件为一检验批。同一检验批内商品应具有同一的特征，如包装、标记、产地、规格、等级等。4.2.样本的大小每批件数抽样件数1251261005101250102511500154.3.抽样方法 抽样必须按产地、分批次、论等级在不同部位随机抽样，每件至少取500g作为原始样品。原始样品总量不得少于2000g。4.4.试样的制备 将原始样品缩分出1000g，去皮去籽，取可食部分经组织捣碎机捣碎，均匀分成两份，装入洁净容器内，密封，作为实验室试样。并填写标签，注明品名、日期、产地、垛位、报验号、申请单位、抽样人。注：在抽样和制样的操作中，必须防止样品受到污染或发生任何变化。5.过程简述5.1.提取 称取试样25.0g于具塞锥形瓶内，加入5mL磷酸溶液和50mL丙酮，振荡提取30min，离心分离，倾出提取液。残渣再如此重复提取两次，合并提取液。用旋转蒸发器除去丙酮，残留溶液转入分液漏斗中，分别用50mL三氯甲烷提取三次，合并三氯甲烷层于分液漏斗中。5.2.净化 向分液漏斗加入50mL磷酸盐溶液，振摇1min。静置分层后，分出上层水相，三氯甲烷层再分别用50mL磷酸盐溶液提取两次。合并水相于分液漏斗中，用盐酸溶液调pH等于1，分别用75mL乙醚萃取三次。合并乙醚层，加入20g无水硫酸钠脱水后，于K-D浓缩器中浓缩到5mL，转入10mL具有标准磨口的微型浓缩试管中，继续浓缩至干。5.3.酯化 向上述微型浓缩试管中加入3mL丁酯化液，连上冷凝管，置于电炉上加热至沸，并回流30min。冷却后取下，每次用10mL硫酸钠水溶液洗涤三次，酯化液供柱层析净化用。5.4.柱层析净化 先用乙醚正己烷混合溶液淋洗层析柱，然后倒入酯化液，用10mL具塞刻度管接收。用乙醚正己烷淋洗，以1mL/min的速度收集10mL，定容后，加少许无水硫酸钠脱水，供气相色谱测定。5.5.标准工作溶液的酯化 准确取适量的农药标准工作溶液于10mL微型浓缩试管，置水浴中加热挥干后，按5.3和5.4进行，根据需要再稀释或浓缩成适当浓度的标准工作溶液。5.6.测定5.6.1.色谱条件色谱柱：玻璃柱1.5m3mm(内径)，填充物为2.5%(m/m)OV-17和3.3%(m/m)QF-1涂于Chromosorb W AW DMCS(80100筛目)；载气：高纯氮，纯度99.99%，60mL/min；柱温：220；进样口温度：240；检测器温度：300。5.6.2.色谱测定 用微量注射器准确吸取适量净化后的样液注入气相色谱仪，并测量其峰值，用相应的工作曲线估计样液中农药的大约浓度。然后取样液中浓度接近的标准工作溶液与样液等体积进样，进行色谱测定。注：农药标准工作溶液及样液中农药组分的响应值均应在仪器检测线性范围内。样液测定过程中要穿插标准工作溶液的测定，以检查检测器的灵敏度。5.7.空白试验 按上述有关步骤进行试剂空白试验。6.结果计算用色谱数据处理机按适当程序计算农药残留量，也可按下式计算：XhcVhm式中：X2,4-滴残