高考生物大一轮复习 生物技术的综合应用精品试题（含试题）(1).doc

2015届高考生物大一轮复习 生物技术的综合应用精品试题（含2014试题）1. （南通2014届高三第一次调研）下列利用菜花进行“dna的粗提取与鉴定” 实验的叙述，正确的是（） a. 采用不同浓度的nacl溶液反复溶解与析出dna的方法可去除部分杂质 b. 在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤后弃去滤液 c. 用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14mol/l，用单层滤纸过滤获取析出物 d. 将白色丝状物溶解在nacl溶液中，加人二苯胺试剂后震荡。观察颜色变化解析 1.dna在nacl溶液的溶解度随nacl溶液浓度不同而不同，当nacl溶液浓度为0.14 mol/l时溶解度最低，可以析出dna，而杂质依然在溶液中，所以采用不同浓度的nacl溶液反复溶解与析出dna的方法可去除部分杂质；滤液中含有dna，所以滤液不能丢弃；用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14mol/l，用玻璃棒反复搅拌，dna就吸附在玻璃棒上；将白色丝状物溶解在nacl溶液中，加人二苯胺试剂后加热，观察颜色变化。2.（广州2014届高三下学期调研）下列有关利用哺乳动物红细胞进行实验的叙述，正确的是a可用同位素标记法追踪血红蛋白的合成和分泌过程来证明生物膜之间的协调配合b可利用血红蛋白的颜色来监测凝胶色谱法分离血红蛋白的情况c可用成熟的红细胞来制备纯净的细胞膜d可用成熟的红细胞来提取dna解析 2. 哺乳动物红细胞没有细胞核及细胞器，没有dna，不能合成蛋白质；血红蛋白有颜色， 所以在凝胶色谱法分离过程中易分辨，可用于监测；哺乳动物红细胞没有细胞核及膜性细胞器，所以可用成熟的红细胞来制备纯净的细胞膜。3.（江苏省连云港市高三上学期摸底考试）下图为植物组织培养过程，有关说法正确的是（ ）a实验中b试管细胞全能性最高bd试管中培育出的个体都是纯合子cab的过程需要光照dad过程培养基保持不变解析 3.植物组织培养是高度分化的细胞在离体的情况下，进行脱分化和再分化的过程。在整个过程中，需要不同的培养基进行诱导；图中ab的过程表示脱分化，此过程不需要光照；形成的愈伤组织全能性最高；试管中培育出的个体与提供体细胞个体的基因型相同，不一定都是纯合子。4.（2013江苏无锡高三期末）在植物组织培养实验中，需要消毒或灭菌的有（ ）a操作员的手b进行操作的操作台c培养基d外植体解析 4.在植物组织培养过程中，应严格地进行无菌操作，所以对操作台、培养基、外植体及操作员的手都要进行灭菌。5.（2013年湖南长沙高考模拟，28）有人为探究诱导植物根愈伤组织分化因素设计了下图所示的实验（玻璃纸有一定通透性），请仔细分析，以下有关本实验的操作或结论的叙述中正确的是 （ ）a.根愈伤组织分化可能与实验a中幼芽产生的“某物质”有关b.生长素是唯一诱导根愈伤组织分化的因素c.实验a中玻璃纸阻挡幼芽产生的生长素渗入根愈伤组织d.实验证明玻璃纸是根愈伤组织分化的诱导因素解析 5.a中幼芽放在根愈伤组织上面，一段时间后出现了木质部细胞，故根愈伤组织分化可能与实验a中幼芽产生的“某物质”有关，故a项正确；诱导根愈伤组织分化，是多种激素共同作用的结果，故b项错误；玻璃纸有一定通透性，若能阻挡幼芽产生的生长素渗入根愈伤组，根愈伤组织会只分裂不分化，故c项错误；玻璃纸不是化学试剂，不能进入细胞内，故d项错误。6.（2013年江苏南京、淮安两市模拟）下列有关nacl在生物技术实践中的应用，正确的是（ ）a在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需加入琼脂，不需要添加naclb利用dna在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同，粗提取dnac在腐乳制作过程中，装瓶时需逐层等量加入nacl，以防杂菌污染d将哺乳动物的成熟红细胞浸泡于09的nacl溶液中，用以制备纯净的细胞膜解析 6.在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需加入琼脂，需要添加nacl，提供无机盐，故a项错误；加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂，故c项错误；09的nacl溶液是生理盐水，将哺乳动物的成熟的红细胞浸泡，不会得到细胞膜，故d项错误。7.（2013年北京海淀区二模）下列有关生物技术与实践的叙述正确的是（ ）a.小鱼存活时间长短可以做为生态瓶稳定性的指标b.观察未经染色的口腔上皮细胞装片，需调亮视野c.利用蒸馏水可以将提取液中的光合色素进行分离d.进行dna粗提取实验，可利用猪血作为实验材料解析 7.在研究生态瓶的有关问题时，可将小鱼存活时间长短做为稳定性的指标，小鱼存活时间越长，说明生态瓶稳定性越高；观察未经染色的口腔上皮细胞装片，需调暗视野；在对提取液中光合色素进行分离时，利用的是各种色素在层析液中溶解度不同而进行的，一般是由20份石油醚，2份丙酮和1份苯混合而成。进行dna粗提取实验，可利用鸡血作为实验材料，不能用猪血，因为猪血细胞成熟后无核，无法提到dna。8.（2013苏锡常镇四市高三调研）下图为某植物的根尖显微结构剖面图，有关叙述正确的是（）a部位的细胞中，能产生atp的结构只有细胞质基质和线粒体b部位中的一些细胞，核仁和核膜都有可能周期性消失c部位的细胞，离体后再经灭活的病毒诱导可培育出多倍体植物d部位的细胞，可作为观察诱发染色体变异的材料解析 8.部位是根冠，不含叶绿体，所以能产生atp的结构只有细胞质基质和线粒体；部位是分生区，可以进行旺盛的有丝分裂，所以核仁和核膜都有可能周期性消失和重建；灭活的病毒通常用来诱导动物细胞融合，不能用于诱导多倍体植物；部位的细胞是成熟区，细胞不分裂，不适合作为观察诱发染色体变异的材料。9.（2013江苏，22，3分）小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应, 为了克服这个缺陷, 可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因) 后再重组表达。下列相关叙述正确的是()a. 设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列b. 用pcr方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列c. pcr体系中一定要添加从受体细胞中提取的dna聚合酶d. 一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞解析 9.本题主要考查pcr技术的有关知识。利用pcr技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列, 以便根据这一序列设计引物, 但不需知道目的基因的全部序列, 需要考虑载体的序列; 因pcr反应在高温条件下进行, 故反应体系中需加入耐高温的dna聚合酶; 因某些目的基因编码的产物需经特殊的加工修饰过程, 故一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞。10.（2013江苏，4，2分）某同学用洋葱进行dna粗提取和鉴定实验, 操作错误的是()a. 加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨b. 用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的dnac. 加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌d. 加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析 10.本题主要考查dna粗提取和鉴定实验的相关知识。加入洗涤剂后, 动作要轻缓、柔和, 否则容易产生大量的泡沫, 不利于后续步骤的操作; 加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌的目的是保证dna分子不断裂, 保持其完整性; 用蛋白酶分解过滤研磨液中的蛋白质, 可纯化研磨液中的dna; 加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热才能出现颜色反应。11.（2013重庆，5，6分）某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉, 其技术路线为“取材消毒愈伤组织培养出芽生根移栽” 。下列有关叙述, 错误的是()a. 消毒的原则是既杀死材料表面的微生物, 又减少消毒剂对细胞的伤害b. 在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂, 可获得染色体加倍的细胞c. 出芽是细胞再分化的结果, 受基因选择性表达的调控d. 生根时, 培养基通常应含-萘乙酸等生长素类调节剂解析 11.本题主要考查植物组织培养的相关知识。在愈伤组织中, 因植物细胞含有细胞壁, 阻碍了细胞融合, 所以此时加入细胞融合的诱导剂, 不能获得染色体加倍的细胞; 消毒的原则是既杀死材料表面的微生物, 又减少消毒剂对细胞的伤害; 愈伤组织出芽是细胞分化的结果, 而细胞分化的实质是基因的选择性表达; 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素, 生根时, 培养基通常含有-萘乙酸等生长素类调节剂。故b项错误。12.（2013北京，5，6分）关于高中生物学实验的基本原理, 叙述不正确的是()a. 噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统b. 提取组织dna是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异c. 成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透(过) 性d. pcr呈指数扩增dna片段是因为上一轮反应的产物可作为下一轮反应的模板解析 12.本题综合考查生物学实验的基本原理。噬菌体属于病毒, 由于病毒没有细胞结构, 所以必须寄生在活细胞中以弥补自身缺乏独立代谢系统的缺陷, a正确; dna提取的主要原理是dna与其他物质在nacl溶液中的溶解度不同, b正确; 细胞壁是全透性的, 不具有选择透过性, c错误; pcr技术的实质是体外连续进行dna复制, 扩增产生的dna可作为下一轮复制的模板, d正确。13.(2013年大纲，2，6分) 关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述, 错误的是()a. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同b. 动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶c. 烟草叶片离体培养能产生新个体, 小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖d. 动物细胞培养可用于检测有毒物质, 茎尖培养可用于植物脱除病毒解析 13.本题主要考查动物细胞培养和植物组织培养的相关知识。动物细胞培养的培养基为液体培养基且通常含动物血清, 植物组织培养的培养基为固体培养基且一般含植物激素; 植物组织培养过程中不需要用胰蛋白酶; 烟草叶片离体培养产生新个体所依据的原理是细胞的全能性, 小鼠杂交瘤细胞离体培养通过细胞增殖增加其数目; 动物细胞培养可用于检测有毒物质, 因植物茎尖病毒极少, 甚至无病毒, 故茎尖培养可用于植物脱毒。14.（2013湖北七市（州）高三联考）【生物选修1：生物技术实践】（15分）我省某地近些年来，为防止水土流失，在退耕还林的过程中，大力推行以种植柑橘为主的生态农业，显著提高了当地农民的收入，但也出现了水果销量有限与产量不断增加的矛盾，为了解决这一矛盾。当地企业拟开展以果肉生产果汁和橘皮提炼精油的生产为主的深加工，实现增产与增收的统一。请据所学知识，解答有关问题：当地企业拟采用水蒸气蒸馏法提取橘皮精油，有人提出了反对意见。其理由是：采用水蒸汽蒸馏法提取橘皮精油存在_问题。你认为应使用_方法提取。在提取橘皮精油的过程中，应先使用石灰水浸泡10h以上，使橘皮浸透。这样做的原因是：_时不会滑脱，出油率高，并且_的黏稠度不会太高，过滤时不会堵塞筛眼。在果汁生产过程中，需要使用果胶酶处理。其目的是：_在进行柑橘育种的过程中，会用到花药离体培养技术，应选择花粉发育至_期的花药培养，确定时期的常用方法是_，但某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用_。解析 14.（1）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨、萃取等，而具体采用哪种提取方法要根据植物原料的特点来决定，橘皮精油的主要成分是柠檬烯，其有效成分在用水蒸气蒸馏法提取时容易发生部分水解，使用水中蒸馏法提取时原料容易焦糊，所以一般采用压榨法提取橘皮精油。；压榨法一般用于柑橘类植物精油提取，其最大特点是生产过程可以在室温下进行，确保产品质量，使其香气逼真；用78石灰水浸泡橘皮24h，目的是防止压榨时滑脱，提高出油率，降低压榨液的黏稠度，过滤时不堵塞筛眼；（2）果胶酶主要用于果蔬汁饮料及果酒的榨汁及澄清，对分解果胶具有良好的作用，可以提高出汁率。（3）花药离体培养一般是离体培养花粉处于单核时期（小孢子）的花药；花药离体培养对材料的选取最常用的方法是焙花青烙矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色；选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，最常用的方法有醋酸洋红法，但是某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。15. （江西红色六校2014级高三第二次联考）【生物生物技术实践】( 第4小题1分，其他每空2分，共15分) 在生物技术实践过程中，往往需要注意某些实验步骤的操作，请将下列实验中的注意事项填写完整：在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用 消毒；在血红蛋白的提取和分离中，若红细胞的洗涤次数过少，将无法除去 。 在提取植物细胞的dna时，需要先用洗涤剂溶解 。在花药离体培养中剥离花药时，要彻底去除 ，因为与其相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数” 课题中，往往需要稀释土壤溶液，为了避免杂菌污染，此过程每一步都要在 旁操作。在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好采用 的方法。胡萝卜素提取的萃取过程应采用 加热，因为有机溶剂都是易燃物。为避免外源dna等因素的污染，pcr实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行 。解析 15.（1）在腐乳制作时，为防止杂菌污染，需要对玻璃瓶进行沸水消毒；洗涤红细胞的目的是除去杂蛋白，主要是血浆蛋白。（2）由于植物细胞有细胞壁，所以在提取植物细胞的dna时，需要先用洗涤剂溶解细胞膜，动物细胞则用蒸馏水胀破；在花药离体培养中剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织，同时还要测底去除花丝，因为与花丝相连的花药，不利于愈伤组织或胚状体的形成。（3）稀释土壤溶液的实验操作中，为了避免周围环境中微生物的污染，应在火焰旁操作，因为在火焰一定范围内，由于温度比较高，所以没有杂菌；在固定化酵母菌细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好用小火间断加热的方法，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊；胡箩卜素提取的萃取过程应避免明火加热，采用水浴加热，因为有机物都是易燃物，直接用明火加热容易引起燃烧、爆炸。（4）pcr是进行dna的扩增，为避免外源dna的污染，pcr实验中使用的相关器具如微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等应提前高压蒸汽灭菌。16. （河北唐山2014届高三第一次模拟）【生物选修1 生物技术实践】（15分）如图是植物组织培养过程示意图，请回答有关问题：（1）外植体若是菊花茎段组织，则在配制ms固体培养基时, （“必需” 、“不必” ） 添加植物激素。（2）外植体若是月季的花药，则图中的过程 （“需要” 、“不需要” ）光照，而经过程培养出的植物一般称为 植株。该植株产生的途径除了图中所示外，还可以是花粉通过 阶段发育而来。（3）外植体若是菊花的根尖组织，则在正常环境下培养成的新菊花植株叶片的颜色是 ，这过程体现了植物细胞具有 。（4）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂和分化的关键性激素，在植物组织培养过程中：若先使用细胞分裂素，后使用生长素，实验结果是细胞_ _。当同时使用这两种激素时，生长素用量比细胞分裂素用量的比值_（“高” 、“低” ）“适中” ）时，促进愈伤组织的形成。解析 16.（1）外植体若是菊花茎段组织培养中不需添加植物激素，因为菊花茎本身可以产生多种植物激素。（2）当植物还在脱分化形成愈伤组织的时候不能进行光合作用，所以自然也就不需要光照；由于花药中，含有的花粉是生殖细胞，所以由花药发育而来的个体是单倍体；还可以利用花粉通过植物组织培养技术，获得胚状体，在发育为植株。（3）同一植物体不同细胞都是由一个受精卵发育而来的，所以含有相同的基因，植物在无光时不能合成叶绿素，所以在正常环境下培养成的新菊花植株叶片的颜色是绿色；由根尖组织发育为植株，体现了植物细胞的全能性。（4）细胞分裂素的生理作用主要是引起细胞分裂，诱导芽的形成和促进芽的生长，所以若先使用细胞分裂素，后使用生长素，实验结果是细胞既分裂也分化；当细胞分裂素对生长素的浓度比值高时，可诱导条的形成；反之则有促进生根的趋势，若生长素用量比细胞分裂素用量的比值适中时，促进愈伤组织的形成。17. (河北省衡水中学2014届高三下学期二调考试理科综合试题) 生物选修1：生物技术实践（15分）胡萝卜素是一种常用的食用色素，可以预防白内障、有助于保护眼睛晶体的纤维部分，还可以促进眼内感光色素的生成，加强视力的形成；还可以预防夜盲症，加强眼睛变色的功能。可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得流程图如下，请根据其提取过程及胡萝卜素的性质，回答下列问题。 （1）筛选产胡萝卜素的酵母菌菌r时，可选用_或平板划线法接种。（2）培养酵母菌r时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌r的生长提供_和_。（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好 和_以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用_方式加热；萃取液浓缩前需进行_。（4）纸层析法可用于鉴定所提取胡萝卜素，鉴定过程中需用胡萝卜素 作为_。（5）玫瑰精油的提取方法是 法，该方法_ _（填“适合” 或“不适合” ）胡萝卜素的提取；柠檬芳香油的制备通常用_ 法。（6）工业上提取天然-胡萝卜素的方法有三种即： beitang解析 17.微生物培养常用的接种法有：稀释涂布平板法和平板划线法。蔗糖可为酵母菌提供碳源，硝酸盐可为酵母菌提供氮源。从胡萝卜中提取胡萝卜素时为防止胡萝卜素分解，干燥过程应控制好温度和时间；萃取过程中宜采用水浴方式加热；萃取液浓缩前需进行过滤，除去萃取液中的不溶物。用纸层析法鉴定所提取胡萝卜素时，需用胡萝卜素标准样品做对照。玫瑰精油化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶液，能随水蒸汽一同蒸馏，所以玫瑰精油的提取方法是水蒸汽蒸馏法；胡萝卜素化学性质稳定，不溶于水，溶于有机溶剂，但萃取胡萝卜素的有机溶剂需要有较高的沸点，所以水蒸汽蒸馏法不适合胡萝卜素的提取；柠檬芳香油的制备通常用压榨法。工作上提取天然-胡萝卜素的方法有三种：从植物中提取、从大面积种植的岩藻中获取、利用微生物的发酵生产。18.（广州2014届高三下学期调研）（16分）在大面积种植只含一种抗虫基因的转基因甘蓝（2n=18）以后，调查发现，小菜蛾种群对该种甘蓝产生的毒蛋白具有更强的抗性。为此研究人员培育了体细胞含有两种外源抗虫基因（分别用a和b表示）的转基因甘蓝。这两种基因在染色体上的整合位点存在下图所示的情况（细胞中只有2个抗虫基因）。请回答（不考虑染色体的交叉互换）： （1）检测a基因和b基因在细胞中是否得到转录可采用 技术。 （2）请根据现代生物进化理论解释小菜蛾种群抗性增强的原因是 。 （3）甘蓝是雌雄同株植物。体细胞含两种抗虫基因的甘蓝表现为强抗虫，含一种抗虫基因的植株表现为弱抗虫，没有抗虫基因的植株不抗虫（普通甘蓝）。体细胞含两个抗虫基因的转基因甘蓝与普通甘蓝杂交，若f1中表现为强抗虫的植株所占比例为25%，则该转基因甘蓝的两个抗虫基因的整合位点属上图 类型。可选取上图 类型的转基因甘蓝的花粉培育出单倍体强抗虫转基因甘蓝。利用花粉培养出幼苗的技术所依据的原理是 。上图甲所示类型的植株自交，f1中表现为强抗虫的植株所占的比例是 。 （4）下图表示人工远缘杂交培育含有4个染色体组的可育萝卜-甘蓝植株的示意图:图中过程需要做的处理是 ；图中的受精卵处于有丝分裂后期时细胞中含有 条染色体。解析 18.（1）检测a基因和b基因在细胞中是否得到转录，检测是否有rna生成，检测rna的技术是分子杂交（rna-dna分子杂交）。（2）由于基因突变具有不定向性，所以在没种植抗虫基因的转基因甘蓝之前，小菜蛾种群中就有抗虫基因出现，种植抗虫基因的转基因甘蓝后，相当于对小菜蛾进行了选择，使不具有抗性基因的个体死亡，有抗性的个体保留下来，所以小菜蛾种群抗性增强。（3）甲和乙图只能产生两种配子，与普通甘蓝杂交，后代没有强抗虫个体出现，所以则该转基因甘蓝的两个抗虫基因的整合位点属上图丙。甲图产生配子时，正常情况下a基因和b基因分离，不会出现在同一个配子中，所以可以选取乙或丙转基因甘蓝的花粉培育出单倍体强抗虫转基因甘蓝；花粉是生殖细胞，由一个细胞长成个体，体现了细胞具有全能性。图甲可以产生两种配子：a和b，自交产生后代的基因型为：aa、2ab和bb，体细胞含两种抗虫基因的甘蓝表现为强抗虫，所以f1中表现为强抗虫的植株所占的比例是1/2。（4）图中过程是由2倍体变为4倍体的过程，该过程需要低温或用一定浓度的秋水仙素处理，是染色体数目加倍；图中受精卵中含有36条染色体，有丝分裂后期，由于着丝点分裂，染色体数目加倍为72。19. （山西四校2014级高三第三次联考）【生物选修1：生物技术实践】（15分）从橘皮中提取的橘皮油无色透明，具有诱人的橘香，有很高的经济价值。请回答：（1）压榨法提取橘皮精油的原理是 。（2）新鲜橘皮要用 浸泡处理，以破坏细胞结构、分解果胶、防止橘皮压榨时滑脱，从而提高出油率。也可以采用酶处理橘皮，然后将其浸入清水中搅拌，则无需压榨即得到糊状液体。（3）橘皮油也可用萃取法来提取，原因是 。分析下图，提高萃取效果的方法是 、 。解析 19.压榨法提取橘皮精油的原理是利用机械压力把精油挤压出来。新鲜橘皮要用石灰水浸泡处理，以破坏细胞结构、分解果胶、防止橘皮压榨时滑脱，从而提高出油率；也可以采用纤维素酶和果胶酶处理橘皮，然后将其浸入清水中搅拌，则无需压榨即得到糊状液体。橘皮油也可用萃取法提取，原因是橘皮易溶于有机溶剂；提高萃取效果的方法是：适当延长萃取时间（萃取时间为1.5h）和适当提高萃取温度（萃取温度为55度）。20.（山东潍坊2014届高三3月月考）目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：(1) 获取外源基因用到的工具酶是 ，为了提高实验成功率，通常利用 技术获得大量标记的外源基因。(2) 外源基因能够整合到精子的 上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的 才能进入卵细胞中。(3) 过程采用的是 技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行 处理。(4) 过程需要在 (至少写出两点) 等条件下进行。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的 。(5) 为了获得更多的早期胚胎，常用 激素对供体进行处理，使其 ，从而获得更多的卵母细胞。解析 20.（1）基因工程中用到的工具酶有：限制酶和dna连接酶，获取外源基因只需将目的基因切下，所以需要限制酶；pcr技术可以体外扩增外源基因。（2）外源基因必须整合到细胞核内的染色体上或核dna上才能长时间存在，是提高转化率的关键；受精作用的实质是精核与卵核融合，所以受精时只有精子的细胞核进入卵细胞。（3）由于精子中导入了外源基因，精子在体外，所以只能采取体外受精；精子在体外和体外都需要经获能，才有受精作用。（4）过程是胚胎培养，条件是：无菌无毒、适宜的温度和ph、营养充足、气体环境；动物细胞培养的培养基上还含有动物血清、血浆，提供细胞生长必须的营养成份。（5）为了获得更多的卵母细胞，可以用促性腺激素处理雌性供体动物，使其超数排卵。21. （北京西城区2014届高三上学期期末）人眼球玻璃体淀粉样变性是一种罕见的眼病，主要症状是眼前黑影飘动并伴有视力缓慢下降，一般在40岁以上发病，常有家族史。在某个连续传递三代的玻璃体淀粉样变性的家族中（遗传系谱图如图1所示），第1代发病情况不详，第24代共有7人发病，男女发病机会均等。请分析回答：（1）依据遗传系谱图推断，玻璃体淀粉样变性最可能的遗传方式为。 （2）经研究发现，此眼病患者的转甲蛋白（ttr）空间结构异常，提取iii-1和iii-2的dna，通过技术扩增ttr基因，实现ttr基因的特异性扩增的关键是设计合理的。 （3）扩增产物测序结果发现，iii-2的ttr基因序列仅有t1（图2）一种，而iii-1的ttr基因序列有t1和t2（图3）两种。 根据t1基因和t2基因碱基序列推断，iii-1部分ttr结构变异的根本原因是，t1基因与t2基因的关系为。 依据遗传系谱图和基因测序结果（可以，不可以）确定玻璃体淀粉样变性的遗传方式，iii-5和iii-6生育一个终生正常孩子的概率为。 （4）进一步研究发现，ttr基因序列有多种变异，体现了基因突变的特点，ttr基因的突变（一定，不一定）会导致ttr变异，原因是，该机制的意义是降低突变的多害性。 （5）i-1和i-2在40岁前的视力状况最可能为，该实例说明表现型是由决定的。 解析 21.（1）根据遗传系谱图，该家族第24代每代都有患者，男女发病机会均等，该病最可能为常染色体显性病。（2）体外扩增dna常用pcr技术，该技术关键需要引物才能使新合成的dna链延伸，产生一条与模板链互补的dna单链。（3）对照t1基因和t2基因碱基序列，可发现t2基因的一对碱基与t1基因不同，发生了碱基对替换，基因突变产生新基因，为原基因的等位基因；根据以上基因测序结果知，-1为杂合子，表现为玻璃体淀粉样变性，说明该病为显性病，-1为男患者，其母为正常，该病为常染色体显性病，-5为隐形纯合子，-6为杂合子，所生子代为正常的概率为1/2。（4）ttr基因序列有多种变异，证明基因突变具有不定向性，基因突变不一定导致其控制合成的蛋白质的变异，因为一种蛋白质，对应着一个或多个密码子。（5）据题意知，人眼球玻璃体淀粉样变性一般在40岁以上发病，故-1和-2在40岁前的视力表现为正常，说明表现型是基因型与环境共同作用的结果。22. （赣州市2014届四所重点中学高三上学期期末）辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。（1）图中和分别表示辣椒组织培养中细胞的_和_过程。（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是_。培养基中的_（填激素）用量的比值_（填“高” 或“低” ）时，有利于芽的分化。当愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时, 出现具有分生能力的绿色芽点, 但不能继续出芽, 通常在培养基中添加 _, 以促进幼苗形成。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是_。（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是_。（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是_。解析 22.（1）由图可知：外植体失去原有的形态和结构，形成未分化状态的愈伤组织，该过程是脱分化；由愈伤组织形成具有特定形态结构的根和芽，属于再分化。（2）琼脂的最有用特性是它的凝点和熔点之间的温度相差很大，它在水中需加热至95时才开始熔化，熔化后的溶液温度需降到40时才开始凝固，所以它是配制固体培养基的最好凝固剂； 生长素有利于根的形成，细胞分裂素有利于芽的分化，具有协同作用，当比值高时有利于根的分化，当比值低时，有利于芽的分化，当比值相当时，不分化；高压蒸气灭菌法：用高温加高压灭菌，不仅可杀死一般的细菌、真菌等微生物，对芽胞、孢子也有杀灭效果，是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法，主要用于能耐高温的物品，如培养基、金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶及一些药物的灭菌。（3）由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之70%酒精穿透力强，也很易杀伤植物细胞，所以浸润时间不能过长；植物细胞壁的成分是果胶和纤维素，所以用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是果胶酶和纤维素酶。（4）萃取时需要加热，有机溶剂容易挥发，所以安装冷凝回流装置。23.（2013年吉林省高三第二次模拟）（15分）月季有花中皇后之称,是当今世界上最重要的观赏植物种类之一。野生月季多是二倍体(2n=14),而几乎所有栽培品种都是四倍体(4n=28)。下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题：(1)选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。这是因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体。在花粉发育过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说选用_期的花粉成功率最高。选择花粉时，一般要通过_来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成 色。(2)上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于_。(3)由栽培品种脱分化形成的胚状体或愈伤组织细胞内含有个染色体组，最终长成的植株称为倍体。(4)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌。需要灭菌的是_(填编号)、需要消毒的是_(填编号)。培养基培养皿接种环花蕾实验操作者的双手三角锥形瓶(5)常用的灭菌方法有_灭菌、高压蒸汽灭菌和_灭菌。(6)菊花的植物组织培养技术基本操作的正确顺序是。外植物消毒制备ms培养基接种培养栽培移栽abcd解析 23.（1）单核期花粉对离体刺激敏感，选用该期花粉可提高培养的成功率，选择花粉时可用显微镜观察、筛选；采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。（2）细胞培养成植株的两条途径取决于植物激素的种类及比例，尤其是生长素和细胞分裂素。（3）栽培品种是四倍体，花粉中含有两个染色体组。所以形成的胚状体或愈伤组织细胞内染色体组数为2，由花粉发育成的植株称为单倍体。（4）灭菌对象为培养基和实验器材，消毒对象为要保持活性的材料和实验者自身。（5）常用的灭菌方法有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌和干热灭菌。（6）菊花的植物组织培养技术基本操作的正确顺序是：制备ms培养基外植物消毒接种培养移栽栽培24.（2013吉林市高三期末）人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行 。接种前，要对人参根进行_。（2）用于离体培养的根切块，叫做 。由人参根切块形成愈伤组织的过程称为 _。培养几天后发现少数培养基被霉菌污染，肉眼可见有颜色的绒毛状_。（3）用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是和纤维素酶处理愈伤组织获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用_方法，操作时应采用_加热。解析 24.（1）配制培养基并分装后都要用灭菌锅灭菌；接种前，要对材料进行消毒（不能填灭菌，灭菌时是采用强烈的因素杀菌）。（2）把由活植物体上切取下及进行培养的那部分组织或器官叫做外植体；脱分化是指已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行离体培养时，失去原有结构和功能，又重新恢复分裂，成为具有未分化特性的细胞；在植物中，去分化细胞成为薄壁细胞，称为愈伤组织；比较菌落特征：真菌污染：有颜色的绒毛状菌落；细菌污染：有光泽的黏液状菌落。（3）利用果胶酶和纤维素酶处理愈伤组织可以获得单个的细胞。（4）由题干可知，人参皂苷易溶于亲水性有机溶液，故而采用萃取的方法可以从培养物干粉中提取人参皂苷宜。25.（2013年济南二模）（8分）【生物技术实践】人们生产和生活与生物技术实践密切相关。请回答下列问题：(1) 生物技术实践离不开无菌技术，无菌技术主要通过消毒和灭菌过程来避免杂菌污染。常用的灭菌方法有_灭菌、干热灭菌和_灭菌。(2) 在制作果醋过程中，若榨取的果汁非常浑浊解决方法是_。(3) 为满足广大人民群众的需要，科技工作者采用植物组织培养技术在温室大棚内生产出大量质优价廉的各种花卉。如图所示是郁金香芽尖通过特定操作接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培育过程。芽尖组织在接种至培养基之前，须进行消毒处理，整个组织培养过程需在_条件下操作，并严格控制好各个时期的培养条件。为促进芽尖组织细胞分裂生长，所使用的培养基中应有_和细胞分裂素两类植物激素。当后者用量与前者用量的比值较_时，利于芽的分化，抑制根的形成。再分化时，除必要的营养供应和激素调节外，还需要的条件是_。植物组织培养的优点是_。解析 25.（1）常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法；常用消毒方法：煮沸消毒法、紫外线照射、巴氏消毒法和化学药剂消毒。（2）) 在制作果醋过程中，若榨取的果汁浑浊，说明其含有较多的果胶，需要用果胶酶处理。（3）在植物组织培养过程中，为防止菌类污染，整个过程都要在无菌环境中操作；促进细胞分裂生长的激素主要是生长素和细胞分裂素，当后者用量与前者用量的比值较高时，利于芽的分化，抑制根的形成；当后者用量与前者用量的比值较低时，抑制芽的分化，促进根的形成；再分化时，会形成完整的植株，所以需要光照、适宜的温度、ph值等；植物组织培养又称为微型繁殖技术，可快速繁殖，通常采用植物的茎尖或幼嫩的组织培养，从而获得无病毒植株。26.（2013福建，33，10分）克隆猪成功率较低, 与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因, 用pcr技术可以检测该基因转录水平, 进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答:(1) 图中重组细胞的细胞核来自细胞, 早期胚胎移入受体子宫后继续发育, 经桑椹胚、囊胚和胚最终发育为克隆猪。 (2) 在pcr过程中可检测出cdna中bcl-2 cdna的分子数, 进而计算总mrna中bcl-2 mrna的分子数, 从而反映出bcl-2基因的转录水平。图中x表示过程。 从基因组数据库中查询bcl-2 mrna的核苷酸序列, 以便根据这一序列设计合成用于pcr扩增, pcr过程第一轮循环的模板是。 解析 26.本题综合考查了核移植、胚胎移植及pcr技术等相关知识。(1) 由图示信息可知, 重组细胞的细胞核来自良种猪的体细胞; 早期胚胎移入受体子宫后经桑椹胚、囊胚和原肠胚, 最终发育成克隆猪。(2) 以mrna为模板生成cdna的过程为反转录; 利用pcr技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列, 以便根据这一序列合成引物。从基因组数据库中查询bcl-2 mrna的核苷酸序列, 可获取目的基因的核苷酸序列, 进而设计合成引物用于pcr扩增。pcr过程第一轮循环的模板是cdna。27.（2013山东，34，8分）胡萝卜素是一种常用的食用色素, 可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得, 流程如下:(1) 筛选产胡萝卜素的酵母菌r时, 可选用或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环, 其目的是。 (2) 培养酵母菌r时, 培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌r的生长提供和。 (3) 从胡萝卜中提取胡萝卜素时, 干燥过程应控制好温度和以防止胡萝卜素分解; 萃取过程中宜采用方式加热以防止温度过高; 萃取液浓缩前需进行过滤, 其目的是。 (4) 纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素, 鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为。 解析 27.(1) 微生物分离和培养中常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。微生物培养需要无菌操作, 其中对接种针需进行灼烧灭菌处理。(2) 蔗糖和硝酸盐可分别为微生物的生长提供碳源和氮源。(3) 从胡萝卜中提取胡萝卜素时, 干燥过程中若温度过高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解; 萃取过程应避免明火加热, 宜采用水浴方式加热, 以防止温度过高; 萃取液在浓缩之前, 还要进行过滤, 以除去萃取液中的不溶物。(4) 利用纸层析法鉴定所提取的胡萝卜素时, 需用胡萝卜标准样品作对照, 对比分析标准样品和萃取样品出现的层析带。28.（2013天津，9，15分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化, 并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合, 以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题:(1) 过程所需的酶是。 (2) 过程后, 在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在, 这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 (3) 原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压, 其作用是。原生质体经过再生, 进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 (4) 若分析再生植株的染色体变异类型, 应剪取再生植株和植株的根尖, 通过、染色和制片等过程制成装片, 然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。 (5) 采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组dna进行pcr扩增, 得到两亲本的差异性条带, 可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株14进行pcr扩增的结果。据图判断, 再生植株14中一定是杂种植株的有。 (6) 对杂种植株进行接种实验, 可筛选出具有高抗性的杂种植株。 解析 28.本题考查植物细胞工程, 染色体变异的实验鉴定以及高抗性的杂种植株的筛选等相关知识。(1) 去除细胞壁获得原生质体需要用纤维素酶和果胶酶处理。(2) 叶肉细胞含有叶绿体, 因此通过peg诱导融合的杂种细胞应含有叶绿体, 以此作为初步筛选杂种细胞的标志。(3) 原生质体失去了细胞壁的保护作用, 因此原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇, 使原生质体处于等渗溶液中, 以维持原生质体正常形态。原生质体经过细胞壁再生, 进而分裂和脱分化形成愈伤组织。(4) 要判断染色体变异的类型, 应剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的根尖, 通过解离、漂洗、染色、制片等过程制成装片, 然后进行显微观察比较染色体的形态和数目。(5) 根据两亲本的差异性条带, 可知再生植株1、2和4既有花椰菜的条带, 又有黑芥的条带, 因此再生植株1、2和4一定为杂种植株。(6) 要筛选出高抗性的杂种植株, 应进行相应的病原体接种实验, 即接种黑腐病菌。答案和解析生物答案 1.a解析 1.dna在nacl溶液的溶解度随nacl溶液浓度不同而不同，当nacl溶液浓度为0.14 mol/l时溶解度最低，可以析出dna，而杂质依然在溶液中，所以采用不同浓度的nacl溶液反复溶解与析出dna的方法可去除部分杂质；滤液中含有dna，所以滤液不能丢弃；用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14mol/l，用玻璃棒反复搅拌，dna就吸附在玻璃棒上；将白色丝状物溶解在nacl溶液中，加人二苯胺试剂后加热，观察颜色变化。答案 2.bc解析 2. 哺乳动物红细胞没有细胞核及细胞器，没有dna，不能合成蛋白质；血红蛋白有颜色， 所以在凝胶色谱法分离过程中易分辨，可用于监测；哺乳动物红细胞没有细胞核及膜性细胞器，所以可用成熟的红细胞来制备纯净的细胞膜。答案 3.a解析 3.植物组织培养是高度分化的细胞在离体的情况下，进行脱分化和再分化的过程。在整个过程中，需要不同的培养基进行诱导；图中ab的过程表示脱分化，此过程不需要光照；形成的愈伤组织全能性最高；试管中培育出的个体与提供体细胞个体的基因型相同，不一定都是纯合子。答案 4.abcd解析 4.在植物组织培养过程中，应严格地进行无菌操作，所以对操作台、培养基、外植体及操作员的手都要进行灭菌。答案 5.a 解析 5.a中幼芽放在根愈伤组织上面，一段时间后出现了木质部细胞，故根愈伤组织分化可能与实验a中幼芽产生的“某物质”有关，故a项正确；诱导根愈伤组织分化，是多种激素共同作用的结果，故b项错误；玻璃纸有一定通透性，若能阻