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临床常用免疫学检查 免疫学检测分体液免疫检测和细胞免疫检测 血清免疫球蛋白检测血清补体细胞免疫检测肿瘤标记物检测自身抗体检测 第一节血清免疫球蛋白检测 是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白 由浆细胞产生 存在于机体的血液 体液 外分泌液和某些细胞的表面 与相应抗原结合后发挥其生物学功能 IG根据其功能及理化性质分为IgG IgA IgM IgD和IgE 一般用免疫比浊法测定 一 免疫球蛋白G IgG 检测 IgG为人体内含量最多的Ig 占Ig的70 80 也是唯一透过胎盘的抗体 1 增高多克隆升高 Ig多项同时升高 慢性感染 慢性肝病 肺结核 自身免疫病 RA SLE等 单克隆升高 免疫增殖病如MM2 降低先天或获得性体液免疫缺陷 重链病 轻链病 使用免疫抑制剂等 二 免疫球蛋白A IgA 检测 IgA分血清型和分泌型 血清型占Ig的10 15 分泌型在外分泌系统中具有重要的免疫功能 如呼吸道 消化道 泌尿生殖道的局部感染密切相关 增高 IgA型MM SLE RA 肝硬化 肾病等降低 IgA缺陷反复呼吸道感染 泌尿道感染等 三 免疫球蛋白M IgM 检测 IgM是五聚体 为分子量最大的Ig 称为巨球蛋白 占Ig的5 10 凝集反应和强大的补体激活能力 在机体早期免疫防御中具有重要作用 增高 感染早期 RA SLE等 巨球蛋白血症 降低 非IgG型重链病 其他类型的MM 免疫缺陷 肾病综合症 使用免疫抑制剂等 四 免疫球蛋白E IgE 检测 IgE是血清中含量最低的一类Ig 属于亲细胞抗体 可与嗜碱性粒细胞 肥大细胞表面IgEFc受体结合 介导I型超敏反应 抗寄生虫免疫中介导ADCC作用 杀伤寄生虫 IgE增高见于 IgE型MM 各种过敏性疾病 寄生虫感染等 第四节肿瘤标记物检测 肿瘤标记物 Tumormarker 是在肿瘤发生和增殖过程中 由肿瘤细胞本身合成 释放或是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质 临床主要应用于肿瘤普查 诊断 疗效观察 主要包括蛋白质类 糖类 酶类 激素类等 不反映机体免疫功能状态 用免疫学的方法进行检测 一 甲种胎儿球蛋白 甲种胎儿球蛋白 AFP 是胎肝合成的一种糖蛋白 出生后AFP的合成很快受到抑制 当肝细胞或生殖腺组织发生恶性病变时 癌细胞出现返祖现象 以致血液中AFP含量明显升高 对原发性肝癌的而言 是特异性最强的标记物 参考值500 g L持续4周 排除妊娠 生殖腺胚胎肿瘤即可确诊 慢性活动性肝炎和肝硬化病例有30 的低浓度阳性 多不超过200 g L AFP异质体 临床上也出现良性肝病的AFP值明显升高 400 g L 或原发性肝癌的AFP值偏低25 肝癌 二 癌胚抗原 癌胚抗原 CEA 由胎儿胃肠道上皮组织 胰和肝的细胞合成 妊娠6个月后渐减少 出生后含量极低 在部分恶性消化道肿瘤中异常升高 消化道肿瘤如胰腺癌 结肠癌和某些肺癌 乳腺癌等常明显升高 三 前列腺特异抗原 前列腺特异抗原 PSA 是前列腺分泌的单链糖蛋白 存在于前列腺管道的上皮细胞中 血清中80 以结合形式 C PSA 存在时 20 以游离形式存在 F PSA 是前列腺癌最有价值的肿瘤标志物 已被广泛应用于前列腺癌的筛选 早期诊断 60 90 前列腺癌患者血清PSA升高 手术后明显下降 前列腺良性增生 前列腺炎可轻度升高 一般 20ug L 前列腺癌患者血清中F PSA 总PSA比值明显较前列腺增生患者低 当PSA值为4 20ng ml时 应用F PSA 总PSA比值来区别癌和增生 F PSA和PSA联合检测对诊断前列腺癌更有意义 四 糖链抗原19 9 糖链抗原19 9 CA 199 是一种糖蛋白 胚胎期分布于胎儿胰腺 肝胆 肠等 成人胰 胆等有少量存在 胰腺癌和消化道癌时升高 可辅助诊断这类癌 尤其对胰腺癌有较高特异性和灵敏度 五 癌抗原125 癌抗原125 CA125 是一种糖蛋白 存在于卵巢癌的上皮细胞内 当患有卵巢癌和子宫内膜癌时 患者血清CA125水平可明显升高 卵巢癌病人血清CA125水平可明显升高 尤其作为疗效观察和判断复发的标准 六 癌抗原15 3 癌抗原15 3 CA15 3 是一种糖蛋白 在乳腺癌患者血清中可见升高 乳腺癌30 50 明显升高 常用于观察乳腺癌治疗疗效及判断有无转移 七 神经元特异性烯醇化酶 神经元特异性烯醇化酶 NSE 在糖酵解途径中 烯醇化酶催化甘油分解 由三个亚基 组成 并形成5种同工酶 亚基同工酶存在于神经元和神经内分泌组织 与神经内分泌起源的肿瘤有关 小细胞肺癌NSE水平明显升高神经母细胞瘤NSE水平也明显升高 第五节自身抗体检测 正常情况下机体免疫系统不对自身组织 细胞产生免疫应答称为免疫耐受 某些因素可导致的免疫耐受破坏 机体免疫系统对自身抗原产生免疫应答 产生自身抗体 自身抗体检测主要用于诊断自身免疫性疾病 AID 主要包括SLE RA 干燥综合征 系统性硬化病 多发性皮肌炎和混合结缔组织病等 一 类风湿因子 类风湿因子 RF 是变性的IgG刺激机体产生的一种自身抗体 主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内 类风湿性关节炎约70 阳性 其它自身免疫性疾病也有一定的阳性率 故特异性不高 但对诊断明确的RA RF的滴度可判断其活动期 二 抗核抗体 抗核抗体 ANA 是指血清中存在的能和自身组织细胞核不同成分发生反应的自身抗体总称 各种细胞核成分包括脱氧核糖核蛋白 DNP DNA 可提取的核抗原 ENA 和RNA等 自身抗体主要是IgG 也可IgM IgA IgD IgE 无器官 种属特异性 因此可以用鼠肝细胞核或Hep 2细胞核作抗原 用IFA进行检测 根据细胞核的荧光图像可分为均质型 边缘型 颗粒型 核仁型 ANA阳性 最多见于未治疗的SLE 阳性率达80 90 活动期SLE几乎100 阳性 也可见于药物性狼疮 混合性结缔组织病 系统性硬化症 多发性肌炎等SLE常见边缘型 均质型颗粒型多见于混合结缔组织病核仁型多见于系统性硬化症 边缘型 均质型 颗粒型 核仁型 三 抗DNA抗体 抗ds DNA 抗双链DNA抗体 见于活动期SLE病人 阳性率70 90 阳性与SLE活动期及狼疮性肾炎发病机制有关 抗ss DNA 抗单链DNA抗体 见于SLE 阳性率70 95 尤其合并狼疮性肾炎患者 四 可提取核抗原多肽抗体谱 可提取核抗原 ENA 是细胞核蛋白的提取物 根据相对分子量的不同分为不同的组分 如Sm 核糖体 Scl 70 Jo 1 SS A SS B等 自身免疫性疾病时机体对它们产生不同的抗体 一般用IBT检测 抗Sm抗体 SLE标记抗体 仅在SLE可检出此种抗体 阳性率20 30 称为肾保护性抗体 阳性时肾损发生率低或肾损程度低 预后较好 抗RNP抗体 抗核糖核蛋白抗体 MCTD阳性率最高 抗SS A 抗SS B 抗干燥综合症A抗原及B抗原抗体 在SjS检出率最高60 左右 一般抗SSB与抗SSA同时存在 抗JO 1抗体 多发性肌炎 皮肌炎 PM DM 标记抗体 检出率10 25 抗Scl 70抗体 系统性硬化症 PSS 标记抗体 检出率30 40 病毒性肝炎标志物检测 病毒性肝炎 viralhepatitis 是由多种肝炎病毒引起的 以肝脏炎症和坏死病变为主的一组传染病 按照病原分类 目前已经确定的病毒性肝炎共有5型 即甲型 HAV 乙型 HBV 丙型 HCV 丁型 HDV 戊型 HEV 近年来还发现庚型 HGV 和输血传播病毒 TTV 但其致病性还有待进一步确定 7种病毒中 除HBV和TTV属于DNA病毒外 其余均属于RNA病毒 甲型和戊型肝炎是粪 口传播途径 传染源是食物和水 以急性感染为主 未见慢性患者和病毒携带者 乙型 丙型和丁型肝炎是垂直传播 血液传播和性传播途径 传染源是慢性患者和病毒携带者 绝大多数属于慢性感染和亚临床感染 甲型肝炎病毒抗体测定IgM型抗体阳性是特异性的早期诊断指标 感染后约1 4周后出现 存在于起病后6个月之内 IgG型抗体出现于恢复期 可持久存在 是保护性抗体 即获得免疫力的标志 也是既往感染的标志 丙型肝炎病毒抗体测定IgG型抗体和IgM型抗体并非保护性抗体 阳性说明血液有传染性 抗病毒治疗后 IgG型抗体一般不会在短时间内转阴 不能作为早期诊断指标和疗效监测指标 IgM型抗体可作用于早期诊断 可反映病情的活动性 乙型肝炎标志物检测 HBV基因组结构 pre s1 pre s2 S P C pre c X HBVDNA3 2kb 乙肝 pre S1pre S1蛋白pre S2pre S2蛋白SHBsAgpre CHBeAgCHBcAgPDNAPXHBxAg 编码 HBsAg pre S2 pre S1 S P pre s1 出现时间 HBV感染后2 6个月 持续时间 急性自限性肝炎 6个月内可消失 慢性肝炎或病毒携带者 可持续阳性 1 HBsAg HBsAg有抗原性而无传染性 HBV S基因 整合 肝细胞DNA 持续表达 空心汤团 HBsAg 有无传染性要看HBV DNA是否同时存在 慢性乙肝患者HBsAg的表达模式 2 抗 HBs 出现时间 急性感染后期或HBsAg消失后 抗 HBs为保护性抗体 其出现标志着HBV感染进入恢复期 HBVC区基因 前C区 C区 前C C蛋白 HBeAg HBcAg 表达 分泌到细胞外 HBeAg进入血液中 3 HBeAg HBeAg是病毒复制和传染性强的标志 4 抗 HBe 出现时间 随着HBeAg的消失而出现 抗 HBe的出现标志着病毒复制减少 传染性降低 抗 HBe 多见于HbeAg转阴的病人 但非保护性抗体 不能抑制HBV增殖 5 HBcAg 乙肝 HBcAg主要存在于HBV感染的肝细胞内或Dane颗粒核心中 进入血液中很快分解 一般血清学方法检测不到HBcAg 而只能检测到抗 HBc 6 抗 HBc 抗HBc IgM 是HBV感染者病毒活动的标志 抗HBc IgG 凡HBV感染者均可阳性 HBcAg的免疫原性最强 不是保护性抗体 有IgM IgA IgG 可终身阳性 7 HBVDNA 是病毒复制和有传染性最直接的证据 乙肝 测定DNA 等于测定HBV 它与HbeAg同时升高 对判断病情和肝炎疗效有实用价值 8 pre s1 pre s2抗原测定 是HBV侵入肝细胞的主要结构成分 pre s1 pre s2蛋白阳性提示HBV复制活跃 乙肝活动期标志物 HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc 急性肝炎早期 传染性强 乙肝病毒标志物的常见组合分析 HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc 急性或慢性现症感染 传染性强 大三阳 HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc 有无传染性应结合HBVDNA检测结果 小三阳 HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc 有过H