食品中山梨酸钾快速检验方法.doc

食品中山梨酸钾快速检验方法方法1 仪器与试剂1.1 仪器PCS多功能食品安全性检测仪，水浴锅，722E型分光光度计，组织捣碎机。1.2 试剂重铬酸钾-硫酸溶液：60mol/L重铬酸钾与0.15mol/L硫酸以1：1混合5g/L硫代巴比妥酸溶液：称取0.50g硫代巴比妥酸溶于20mL蒸馏水中，加1.0mol/L NaOH溶液10mL，完全溶解以后，加1.0mol/L HCl溶液1mL，用蒸馏水稀释至100mL，摇匀。山梨酸钾标准液(1000mg/L)：准确称取山梨酸钾0.2500g于100mL烧杯中，用蒸馏水溶解后，移入250mL容量瓶中，定容至刻度。浓硫酸：分析纯3 操作步骤3.1 样品预处理固体样品：固体样品可食部分粉碎，取5g加45mL蒸馏水，捣碎机捣成匀浆，取匀浆2g于50mL试管蒸馏水定容至50mL，摇匀，过滤。液体样品：称取5g样品（浓缩果汁取2.5g加蒸馏水至5mL），加水45mL摇匀，称取2g于50mL试管中，试管蒸馏水定容至50mL，摇匀。3.2 测定方法样品处理：吸取试样处理液2ml于10ml比色管中，加入2.0mL重铬酸钾-硫酸溶液，摇匀后至100水浴中加热7min，冷水流冷却后加5g/L硫代巴比妥酸溶液2.0mL，摇匀，继续加热10min，冷却后用蒸馏水稀释至刻度。空白对照：空白管内用2mL浓硫酸代替重铬酸钾溶液，其余步骤与样品处理相同。波长的选择：用0.5mg/L的山梨酸钾标准溶液，加入山梨酸检测试剂后显色处理，用PCS多功能食品安全性检测仪进行光谱扫描，生成的红色衍生物在532nm处具有巨大吸收峰。样品测定：采用1cm比色皿，于532nm波长处测定溶液的吸光度。3.3 标准曲线的制备准确吸取1000mg/L山梨酸钾标准液0.0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8 ml、1.0ml、1.2 ml、1.4ml于100mL容量瓶中用水定容。分别吸取1.0ml于相应10ml比色管中，按样品测定方法操作，以山梨酸钾浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制工作曲线。摘要：【目的】建立分光光度法测定食品中的山梨酸含量的方法【方法】以硫酸-重铬酸钾溶液为山梨酸氧化体系，氧化产物丙二醛进一步与硫代巴比妥酸进行显色反应。在吸收波长530nm处测定吸光度。【结果】山梨酸浓度在01.066g/ml范围内呈线性相关，线性范围内吸光度与山梨酸浓度(g/ml)间的关系为：A=0.3715c+0.0047，R2=0.9998，回收率为99.0%101.1%。【结论】该方法具有操作简单、准确度和精密度高，适合于食品中山梨酸钾含量的测定。关键词：分光光度法 硫酸-重铬酸钾 硫代巴比妥酸 山梨酸引言山梨酸俗名花楸酸，化学名称为2，4-已二烯酸。山梨酸及其钾盐是一种的食品防腐剂，在我国可用于酱油、果酱类、酱菜类、罐头类和一些酒类等食品中。山梨酸是一种国际公认安全(GRAS)的防腐剂，安全性很高，日允许量为25mg/Kg。但是如果食品中添加的山梨酸超标严重，消费者长期服用，在一定程度上会抑制骨骼生长，危害肾、肝脏的健康1。我国食品添加剂使用卫生标准(GB2760-1996)中规定使用量： 酱菜、果汁、蜜饯、果冻：0.5;酱油、果酱、软糖、面包：0.1。食品中山梨酸的测定方法有可见分光光度法、紫外分光光度法、气相色谱法和高效液相色谱法，本文采用分光光度法测定，测定含有山梨酸防腐剂的酱油、果汁、酱菜三种产品。提取样品中山梨酸及其盐类，经硫酸-重铬酸钾氧化成丙二醛，再与硫代巴比妥酸形成红色化合物，其颜色深浅与丙二醛含量成正比，于530nm波长处比色定量2。一、材料与方法1、仪器与试剂仪器：722E型分光光度计、组织捣碎机、水浴锅、比色管试剂：重铬酸钾-硫酸溶液 1/60mol/L重铬酸钾与0.15mol/L硫酸以1：1混合5g/L硫代巴比妥酸溶液：称取0.50g硫代巴比妥酸溶于20mL蒸馏水中，加1.0mol/L NaOH溶液10mL，使之完全溶解以后，加1.0mol/L HCl溶液1lmL，用蒸馏水稀释至100mL，摇匀。山梨酸钾标准液(1000mg/L)：准确称取山梨酸钾0.2500g于100mL烧杯中，用蒸馏水溶解后，移入250mL容量瓶中，定容至刻度。2、原理提取样品中山梨酸及其盐类，经硫酸-重铬酸钾氧化成丙二醛，再与硫代巴比妥酸形成红色化合物，其颜色深浅与丙二醛含量成正比，于530nm波长处比色定量。3、操作方法3.1样品处理 称取100g样品，加200ml水于组织捣碎机中捣成匀浆。称取匀浆100g，加水200ml继续捣1min，称取10g于250ml容量瓶中，用水定容，摇匀，过滤备用。3.2试样测定 吸取试样处理液2ml于10ml比色管中，加入2.0mL重铬酸钾-硫酸溶液，摇匀后至100水浴中加热7min，冷水流冷却后加5g/L硫代巴比妥酸溶液2.0mL，摇匀，继续加热10min，冷却后用蒸馏水稀释至刻度，以试剂空白作参比，采用1cm比色皿，于530nm波长处测定溶液的吸光度。二、结果与分析1、建立标准曲线准确吸取1000mg/L山梨酸钾标准液0.0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8 ml、1.0ml、1.2 ml、1.4ml于100mL容量瓶中用水定容。分别吸取1.0ml于相应10ml比色管中，按样品测定方法操作，绘制工作曲线。表1 山梨酸钾标准溶液的工作曲线数据标准工作曲线的线性回归方程如下：A=0.3715c+0.0047，相关系数R2=0.9998。由表1数据可知，测定山梨酸钾的线性关系好，精密度较高。2、准确度及精密度实验按1中的样品溶液的制备和测定方法，对拟含山梨酸防腐剂的样品(自制山梨酸钾添加量分别为0.302、0.501mg/g的苹果泥)进行了精密度实验，同一样品测定6次，测定结果见表2。表2 准确度及精密度实验由上表可得，相对标准偏差较小，回收率在99.0199.80，方法准确度高。相对标准偏差在0.6200.957之间，精密度较高。3、样品分析称取购自某超市的标称含有山梨酸防腐剂的油酱、苹果汁、酱菜三种产品，按1中样品溶液的制备和测定方法，分别测定上述三种样品中山梨酸的含量，测定结果见表3表3 样品测定从表3可以看出，酱油中的山梨酸含量超标，苹果汁、酱菜中的山梨酸含量合格，相对标准偏差在0.300.54之间，方法准确可靠。三、结论通过实验证实， 分光光度法测定食品中的山梨酸含量，该测定方法值得信赖，且该方法具有快速方便、灵敏度