细胞生物学重点1.doc

1 单克隆抗体技术：把小鼠骨髓瘤细胞与经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞（B淋巴细胞）在聚乙二醇或灭活的病毒的介导下发生融合。融合后的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，一方面可分泌抗绵羊红细胞的抗体，另一方面像肿瘤细胞一样，可在体外培养条件下或移植到体内无限增殖，从而分泌大量单克隆抗体。2 细胞拆合：把核与质分离开来，然后把不同来源的细胞质和细胞核融合，形成核质杂交 细胞。3生物膜：细胞内的膜系统与细胞膜统称为生物膜。4生物膜特性：（1）镶嵌性：基本结构是由磷脂双分子层构成的网架上镶嵌以蛋白质；（2）流动性：构成膜的蛋白质分子和脂类分子在膜中的位置不是静止不动的。（3）不对称性：膜两侧的分子结构和性质不同；（4）蛋白质极性：膜整合蛋白多肽链的极性区露出膜表面，而非极性区埋在脂双层的内部，故蛋白质分子既与水溶性分子结合，也可与脂溶性分子亲和。4细胞膜研究上的几种重要学说E.Gorter和FGrendel（1925）:质膜的双层脂分子结构 Davson和Danielli（1935）：双分子片层模型（DanielliDavson模型）：“蛋白质-脂类-蛋白质”三夹板质膜结构模型 J.D.Robertson（1959年）： 单位膜模型(unit membrane model) S.J.Singer和G.Nicolson（1972）： 生物膜的流动镶嵌模型 (fluid mosaic model)液晶镶嵌模型和板块镶嵌模型 脂筏模型（lipid rafts model）5磷脂：膜脂的基本成分（50以上） 分为二类: 甘油磷脂和鞘磷脂 主要特征：具有一个极性头部和两个非极性的尾部（心磷脂除外）；脂肪酸碳链碳原子为偶数,大多数由16,18或20个组成；饱和脂肪酸(如软脂酸)及不饱和脂肪酸(如油酸)6胆固醇的作用：调节膜的流动性，增加膜的稳定性以及降低水溶性物质的通透性等都起着重要作用。7脂质体定义：脂质体是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。8膜蛋白类型：u内在（整合）膜蛋白，外在(周边)膜蛋白。9去垢剂的作用及其类型：去垢剂是一端亲水一端疏水的两性小分子,是分离与研究膜蛋白的常用试剂。分为离子型去垢剂(SDS)和非离子型去垢剂，它不仅可使细胞崩解，并与膜蛋白疏水部分结合使其分离，而且还可以破坏蛋白内部的非共价键，甚至改变亲水部分的构象。10成斑，成帽现象：在某些细胞中，当荧光抗体标记时间继续延长，已均匀分布在细胞表面的标记荧光灰重新排布，聚集在细胞表面的某些部位，即所谓成斑现象；聚集在细胞的一端，即成帽现象。11光脱色恢复技术：研究膜蛋白或膜脂流动性的基本实验技术之一。用荧光素标记膜蛋白或膜脂，然后用激光束照射细胞表面某一区域，使其淬灭变暗。过一段时间，淬灭区域的亮度会恢复到与周围一样。 进一步证明膜的流动性；根据荧光恢复的速度可推算出膜蛋白或膜脂扩散速度。12细胞膜各部分的名称：与细胞外环境接触的膜面称质膜的细胞外表面，与细胞质基质接触的膜面称质膜的原生质表面。样品经冰冻断裂处理后，细胞膜可从脂双层中央断开，各断面命名为：ES，细胞外表面（extrocytoplasmic surface）；EF，细胞外小页断面（extrocytoplasmic face）；PS，原生质表面（protoplasmic surface）；PF，原生质小页断面（protoplasmic face） 。13膜骨架：是质膜下纤维蛋白组成的网架结构。14细胞质膜的功能：（1）为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境; （2） 选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排除,并伴随着能量的传递;（3）提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜传递;（4）为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行;（5）介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接;（6）质膜参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构15膜骨架：是质膜下纤维蛋白组成的网架结构。16红细胞经低渗处理，细胞破裂释放出内容物，留下一个保持原形的空壳，称为血影（ghost）17细胞连接分类：封闭连接，锚定连接，通讯连接。18封闭连接结构：19桥粒是相邻细胞间形成的纽扣状结构。 铆接相邻细胞，提供细胞内中间丝的锚定位点，形成整体网络，起支持和抵抗外界压力与张力的作用。通过质膜下的致密斑连接中间纤维；桥粒中间为钙粘素。半桥粒：通过细胞质膜上的膜蛋白整合素将上皮细胞固着在基底膜上, 在半桥粒中，中间丝不是穿过而是终止于半桥粒的致密斑内。20粘着带：呈带状环绕细胞，位于紧密连接下方，相邻细胞形成带状连接。相邻细胞间的粘合分子为E-钙粘素。 质膜内侧有多种附着蛋白形成的致密斑。连接的细胞骨架成分为actin。粘着斑：位于细胞与细胞外基质间，粘附分子为integrin、胞内骨架成分也是actin。21间隙连接结构：间隙连接处相邻细胞质膜间的间隙为23nm 。连接子(connexon) 中心形成一个直径约1.5nm的孔道。22间隙连接的功能：间隙连接在代谢偶联中的作用 允许小分子代谢物和信号分子通过，是细胞间代谢偶联的基础。 代谢偶联现象在体外培养细胞中的证实。 代谢偶联在协调细胞群体的生物学功能方面起重要作用。间隙连接在神经冲动信息传递过程中的作用： 电突触(electronic junction) 快速实现细胞间信号通讯 间隙连接调节和修饰相互独立的神经元群的行为。 间隙连接在早期胚胎发育和细胞分化过程中的作用：胚胎发育中细胞间的偶联提供信号物质的通路, 从而为某一特定细胞提供它的“位置信息”，并根据其位置影响其分化。肿瘤细胞之间间隙的连接明显减少或消失，间隙联接类似“肿瘤抑制因子23细胞外被(cell coat)又称糖萼：指动物细胞表面存在着的一层富含糖类物质的结构。细胞外基质：是分布于细胞外空间，由细胞分泌的蛋白和多糖所构成的网络结构。24胶原及其分子结构：胶原纤维的基本结构单位是原胶原；原胶原是由三条肽链（链）盘绕成的三股螺旋结构；原胶原肽链具有Gly-x-y重复序列，对胶原纤维的高级结构的形成是重要的； 在胶原纤维内部,原胶原蛋白分子呈1/4交替平行排列,形成周期性横纹。 25被动运输：通过简单扩散或协助扩散实现物质由高浓度向低浓度方向的跨膜转运。转运的动力来自物质的浓度梯度，不需要细胞提供代谢能量。26简单扩散：疏水的小分子或小的不带电荷的极性分子在以简单扩散的方式跨膜转运中，不需要细胞提供能量。也没有膜蛋白的协助，因此称为简单扩散。27简单扩散特点：沿浓度梯度（或电化学梯度）扩散； 不需要提供能量； 没有膜蛋白的协助。氧气，氮气和苯等极易通过细胞膜。28协助扩散特点：比自由扩散转运速率高； 运输速率同物质浓度成非线性关系；特异性；饱和性。 29载体蛋白：既可介导被动运输，又可介导逆浓度梯度或电化学梯度的主动运输，其特点是：通透酶；多次跨膜蛋白；特异性；构象变化；介导被动运输与主动运输。30通道蛋白：只能介导顺浓度梯度或电化学梯度的被动运输，其特点是：具有离子选择性，转运速率高；离子通道是门控的；只介导被动运输。31主动运输：载体蛋白所介导的物质逆浓度梯度或电化学梯度由低浓度的一侧向高浓度的一侧进行跨膜转运的方式。32钠钾泵（NakATP酶）：机制：Na依赖的磷酸化； k依赖的去磷酸化； 如此反复，交替进行；每一循环，消耗1分子ATP，泵出3个Na，泵进2个k；意义：质膜两侧Na、k不均匀分布，具有重要生理作用。 有助于维持动物细胞的渗透平衡；胞外高浓度的Na代表了大量的能量储存；驱动转运溶质进入细胞； 33协同运输：一类由钠钾泵与载体蛋白协同作用，靠间接消耗ATP所完成的主动运输方式。34 胞饮作用与吞噬作用主要有三点区别 特征内吞泡的大小 转运方式内吞泡形成机制胞饮作用小于150rm连续发生的过程需要笼形蛋白形成包被 及接合素蛋白连接吞噬作用 大于250rm需受体信号介导的 触发过程需要微丝及其结合蛋白的参与35细胞通讯：一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个细胞产生相应的反应。细胞间的通讯对于多细胞生物体的发生和组织的构建，协调细胞的功能，控制细胞的生长和分裂是必须的。36细胞通讯方式：分泌化学信号进行通讯（化学通讯） 接触性依赖的通讯：细胞间直接接触，信号分子与受体都是细胞的跨膜蛋白 间隙连接实现代谢偶联或电偶联37信号分子分类：亲脂性信号分子，亲水性信号分子。38受体（receptor）：能够识别和选择性结合某种配体（信号分子）的大分子物质，多为糖蛋白，至少包括两个功能区域：配体结合区域和产生效应的区域。39受体的特征：特异性；饱和性；高度的亲和力。40第二信使第一信使与受体作用后在胞内最早产生的信号分子；包括cAMP、cGMP、三磷酸肌醇（IP3）、二酰基甘油（DG）等；Ca2被认为是第三信使； 41分子开关：在细胞内一系列信号传递的级联反应中，必须有正、负两种相辅相成的反馈机制进行精确控制。 开关蛋白（switch protein）：蛋白激酶激活；蛋白磷酸酯酶使之去磷酸化而关闭。许多开关蛋白就是蛋白激酶本身。 GTP结合蛋白：结合GTP而活化；结合GDP而失