生物梅里埃微生物快速检验建议方案.doc

生物梅里埃微生物快速检验建议方案一、 致病菌检验现状常见细菌性食物中毒的病原微生物有：1、致病性大肠杆菌（特别是出血性大肠杆菌O157：H7）；2、沙门氏菌属；3、致病性弧菌（包括：霍乱弧菌、副溶血性弧菌）；4、金黄色葡萄球菌及其肠毒素；5、近年来发现导致细菌性食物中毒的微生物越来越多，包括单核增生李司特菌、空肠弯曲菌等。因此，包括上述致病菌在内的致病微生物的快速检验，对早日弄清食物中毒的病因，控制疫情，提高卫生防疫水平非常重要。致病菌常规检验方法大致是：食品标本或临床标本单个可疑菌落选择性分离培养（过夜）选择性增菌（过夜）细菌生化鉴定（23天） 纯培养（过夜）检验报告血清凝集试验 其中，增菌是不可缺少的步骤。1、 如果在增菌后能够利用自动化仪器对标本进行快速筛检，就可以尽快发现在那些标本中可能存在致病菌，可能存在那些致病菌，从而可大大缩小检验范围，集中人力检验可疑标本和可疑致病菌。2、 由于大多数细菌目前没有血清试剂，而传统生化鉴定试验周期长，操作繁琐，试剂质量无法保证，严重影响了致病菌确认工作。3、 选择性分离培养的培养基上挑选可疑菌落需要经验，存在漏检的可能。4、 葡萄球菌肠毒素热稳定性很高，加工后的食物虽然检不出，金黄色葡萄球菌，但仍有可能存在葡萄球菌肠毒素，而肠毒素的常规检验方法需要做动物实验，难度大，周期长。鉴于上述原因，我们提出应用“全自动荧光免疫分析仪+API鉴定系统”的快速检验方案如下：二、 致病菌快速检验系统建议方案（一） 检验流程Mini VIDAS快速筛检(45分钟)终止实验选择性增菌 (过夜)食品标本或临床标本 阴性 阳性结果 接种选择性分离平板选择性分离培养（过夜）次代培养，用于复核与留样单个可疑菌落血清凝集试验细菌生化鉴定（424小时）报告结果本系统能达到的效果1、 葡萄球菌肠毒素：从标本处理到上机检测只需1小时。2、 大肠杆菌O157、沙门氏菌、李司特菌、空肠弯曲菌的检验：在增菌后1小时内即可完成筛检试验，从而缩小检验范围、明确检验对象、提高总体检验速度。3、 大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌等最常见肠道致病菌的生化鉴定时间缩短到4小时。4、 包括：革兰氏阴性杆菌（108种）、非肠道革兰氏阴性杆菌（64种）、葡萄球菌（22种）、链球菌（47种）、酵母样真菌（43种）、厌氧菌（67种）、棒状杆菌（33种）、李司特菌（6种）、奈瑟氏及嗜血杆菌（10种）、弯曲菌（18种）、芽孢杆菌（24种）、乳酸菌（52种）、肠杆菌分型（111种）在内的五百多种细菌可以得到快速、准确的鉴定。5、 可方便、准确、快速地开展爱滋病、衣原体等项目的检验。三、系统性能简介（一） 用mini VIDAS快速筛检致病微生物本系统主要用于快速筛检标本中可能存在的病原微生物。1、应用原理应用酶联免疫法，最后测蓝色荧光（ELFA）。抗原（细菌、蛋白）的检测是应用夹心的技术，包被针上有抗体包被，所测得的荧光与标本中抗原的含量成正比。2、检测项目（1） 人血清免疫项目(包括爱滋病)，人致病性寄生虫、病毒项目，激素类，其它免疫项目等共五十多项（2） 食品微生物(李斯特菌属、单核增生李斯特菌、弯曲菌属、大肠杆菌O157、沙门氏菌属、葡萄球菌肠毒素检测，沙门氏菌免疫浓缩、大肠杆菌O157免疫浓缩)八项。（3） 即将推出爱滋病、结核病、淋病等基因探针法检测项目。（4） 厂家可根据用户需要生产专用试剂条，例如：霍乱弧菌和副溶血性弧菌的技术已经成熟，当国内用户每年消耗2万条时即可生产。3、工作容量（1） 设两个相互独立工作的检测仓，可同时进行12个相同或不同的测试。（2） 每天可进行约6080项测试。4、附件、配件 机电一体化设计，内置微电脑、控制键盘、打印机，无须任何配件、附件。5、技术优势（1） 简单快速l VIDAS试条即可使用，有条码标记，只加样无须配置任何试剂；l 按一个键即可自动完成全部分析操作过程并自动打印报告；l 标本增菌后不需分离培养，即可上机检测，仪器运行几十分钟后自动打印报告，阴性结果，表明标本不含目标微生物，只需将阳性标本的增菌肉汤做分离培养，可大大缩小检验范围，并使检验目标明确。l 机电一份化设计，检测仓、计算机、荧屏、键盘及打印机合为一体，无须任何配件、附件；l 整机性强，使用、维护简便。（2） 结果准确l 应用免疫夹心方法，对每个标本做两次免疫反应，大大提高检测的特异性，从而保证检测结果的可靠性。l 特大固相吸附表面积，提高免疫捕获的数量，增加灵敏度。l 采用荧光检测方法，灵敏度比可见光方法高出1000倍。l 上述三项技术有力地保证了爱滋病检测的灵敏性。l 获美国食品及药物管理局（FDA）、日本厚生省、AOAC（国际公职分析家协会）、USDA（美国农业管理局）、中国进出口商品检验局等政府及权威机构认可。（3） 安全可靠l 应用ELISA技术，最后测蓝色荧光（ELFA）；l VIDAS试条直接使用的设计，去除所有污染的可能性；l 内设自检系统，无管道，无须清洁，无交叉污染；（4） 稳定性高l 仪器14天内只需做一次质控；l 试剂有效期长达一年。（二） 用API系统鉴定可疑致病菌应用API系统可在4小时内鉴定分纯的常见肠道致病菌（大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、变形杆菌）及霍乱弧菌、副溶血弧菌等致病性弧菌。API系统由APILAB Plus软件和专用试剂盒组成。生物梅里埃将为用户免费升级最新版本的软件。做为细菌鉴定的国际金标准，API具有下述优点：1、API=创新1970年，API系列在细菌学领域对传统的技术进行了一次标准化、微量化的彻底变革，使用操作简单，判断结果容易。API细菌鉴定更加简单，快速和可靠。API 20 E是第一个由生化试验条和细菌鉴定数据库组合而成的鉴定系列，通过与美国、日本、澳大利亚及欧洲等国家和地区的主要国际标准中心合作，API系列不断得到开发。API还建立了一种独特的计算方法，即数值鉴定法。根据这种方法设计出相辅的计算机软件，使鉴定更加容易和准确。2、API=标准随着被微生物学家的广泛使用，操作简便，高效的API系列很快成为全球性的鉴定标准。1500多篇科技出版物均都涉及API产品；（其中仅关于API 20 E的超过600篇）；API系统一直作为评估其它鉴定产品效果的参照方法；API产品已鉴定出了许多新的细菌菌种（如：葡萄球菌属和链球菌属内的新菌种）。3、API=鉴定所有微生物如今，API系列范围广泛，包括15个鉴定系列，包括可鉴定的细菌种类有550多个种，现在又开发出新的试剂条，可用于新出现的临床意义的细菌，如棒状杆菌、弯曲杆菌、利期特氏菌、奈瑟氏球菌的鉴定。4、API=可靠25年来，API在细菌学鉴定方面已获得了许多极珍贵的经验：大约1000种不同生化试验在常规中应用，在细菌代谢方面和生产技术上具有专门