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文档简介
饲料中粗蛋白质含量的测定 凯氏定氮法 Contents 1 适用范围 适用范围 饲料中含氮物质包括真蛋白质和氨化物 非蛋白氮 两者总称为粗蛋白质 本方法适用于配合饲料 浓缩饲料和单一饲料等粗蛋白质含量的测定 适用范围 蛋白氮 真蛋白质提供氮源 非蛋白氮 氨基酸 酰胺 铵盐 粗蛋白质 测定意义 蛋白质是生命的基础 是细胞组成 酶 激素免疫抗体等的主要成分 是组织更新 修补的原料 饲料中蛋白质的质和量直接关系到动物生命生长 发育 繁殖和生产 因此 测定饲料中粗蛋白质含量对动物生活和生产有重要作用 测定饲料原料和成品料中粗蛋白质含量的 为科学配置饲料提供可靠依据 测定原理 凯氏法测定试样中含氮量 即在催化剂作用下 用硫酸破坏有机物 使含氮物转化成硫酸铵 加入强碱进行蒸馏使氨逸出 用硼酸吸收后 在用标准浓度的酸滴定 测出氮含量 将结果乘以换算系数6 25 计算出粗蛋白质含量 仪器设备及试剂 样品粉碎机40目分析筛分析天平消化炉消化管凯氏蒸馏装置滴定管 98 浓硫酸硫酸钾硫酸铜硼酸溶液标准盐酸溶液混合指示剂蔗糖 试样选取 四分法 样品 测定步骤 1 试样的消化称取0 5 1g试样 准确至0 0001g 无损地放入消化管中 加入硫酸铜0 4g 硫酸钾6g 与试样混合均匀 再加浓硫酸10ml 将消化管放置在消化炉上加热 此装置需安装在通风橱内 待样品焦化 泡沫消失 加大火力至410 直至溶液呈透明的蓝绿色 将试样消化液冷却 无损失地转移至100ml容量瓶中 冷却后用蒸馏水稀释至刻度 摇匀 则为试样分解液 测定步骤 2 试样的蒸馏取2 硼酸溶液20ml至锥形瓶中作为反应吸收液 并加混合指示剂2滴 将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入该液面下 准确移取试样分解液10ml注入蒸馏装置的反应腔中 用少量蒸馏水冲洗进样入口 塞好玻璃塞 并在入口处加水密封好 再在碱液入口缓慢加入10 20ml40 氢氧化钠溶液 亦使之流入反应腔中 并把碱液入口封存好 进行蒸馏 以锥形瓶中溶液变蓝绿色开始计时3min 然后将冷凝管末端离开锥形瓶液面 再蒸馏1min 用少量蒸馏水冲洗冷凝管末端 洗液亦流入吸收液中 测定步骤 3 滴定用硼酸吸收氨后 立即用0 05mol L的HCl标准溶液进行滴定 溶液由蓝绿色变为灰红色为终点 4 空白测定称取蔗糖0 01g 以代替试样 按上述测定步骤进行空白测定 消耗0 05mol L盐酸标准溶液的体积应不得超过0 3ml 5 计算粗蛋白质 注意事项 每个试样取两平行样进行测定 以其算术平均值
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