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文档简介

第二节基因工程的原理和技术 温故而知新 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒 载体 基因工程操作的工具 基因工程的原理和技术 1 筛选含有目的基因的受体细胞 2 目的基因的表达 步骤一获得目的基因 人工合成 利用PCR技术扩增 已知序列 从基因文库获得 未知序列 DNAlibrary 聚合酶链式反应 PolymeraseChainReaction 氢键断裂 形成单链DNA 引物与DNA模板结合 形成局部双链 在酶的作用下 不断延伸 合成双链DNA 多次循环 获得大量双链DNA分子 PCR技术扩增 鸟枪法 散弹射击法 从基因文库获得 人工合成法 逆转录法 根据已知氨基酸序列直接合成DNA 步骤二形成重组DNA分子 步骤三将重组DNA分子导入受体细胞 1 基因工程中常用的受体细胞有哪些 2 导入过程如何 大肠杆菌 枯草杆菌 土壤农杆菌 酵母菌和动植物细胞 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径 步骤四筛选含有目的基因的受体 利用标记基因来筛选 通过检测标记基因的有无 或利用标记基因体现的性状 来判断目的基因是否导入受体细胞 对目的基因进行分子水平的检测 通过合成标准探针 利用DNA杂交技术来进行目的基因的检测 步骤五目的基因的表达 1 通过鉴定目的基因的产物蛋白来确定目的基因的表达 2 目的基因导入受体细胞后 受体细胞 或受体细胞发育来的生物体
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