病原菌的筛选原则PPT课件.ppt

血 无菌体液 尿标本 痰标本病原菌筛选原则重要病原菌 1 血液及骨髓细菌培养 2 血液培养常见致病菌 3 血培养前10位病原菌 4 血培养阳性结果的解释 真菌血症 不太可能不确定可疑致病菌 金葡肺炎链球菌肠杆菌科细菌铜绿假单胞菌白色念珠菌 棒状杆菌属非炭疽芽孢杆菌属 痤疮丙酸杆菌 凝固酶阴性葡萄球菌 5 血培养尤其应注意以下细菌的检出 布鲁氏菌HACEK菌群马尔尼菲青霉菌 6 布鲁氏菌 血培养皿培养5天后 菌体镜下形态 革兰染色 7 HACEK菌群 此群系人类口腔 呼吸道 生殖道的正常菌群 在一定条件下可引起严重感染 主要引起细菌性心内膜炎 菌血症和混合细菌性伤口感染HACEK是由5个英文单词的字头组成H代表嗜血杆菌属 Haemophilus A代表放线杆菌属 Actinobacillus C代表心杆菌属 Cardiobacterium E代表艾肯菌属 Eikenella K代表金杆菌属 Kingella 8 HACEK菌群 共同特征是生长缓慢 需48 72h才见菌落 生长需要CO2 故应置CO2培养箱只有营养丰富的培养基如巧克力 血平板等才能支持其生长 在选择性培养基中 如麦康凯或伊红美兰琼脂则不能生长 培养基中含血红素可促进生长 9 流感嗜血杆菌 10 嗜血杆菌属 嗜沫和副嗜沫嗜血杆菌 嗜沫嗜血杆菌是嗜血杆菌属中唯一生长不需V因子和X因子者 故可在普通羊血平板上生长 副嗜沫嗜血杆菌的生化反应与嗜沫嗜血杆菌相似 但生长需外源性V因子 卟啉试验为阳性两菌均为上呼吸道的正常菌在嗜血杆菌属中 此两菌常与心内膜炎有关文献报道 两菌与多种感染有关 如头颈部感染 软组织感染 腹部感染等 11 放线杆菌属 培养特性与鉴定 球状 球杆状的革兰阴性杆菌 不形成芽孢 相邻的菌细胞连在一起 于葡萄糖液体培养基中呈长杆状或长丝状培养2 3天后 菌落直径1 3mm 圆形 光滑 灰白色 中心带有皱折并紧紧粘附于琼脂表面 衰老菌落在显微镜下呈现 星状 结构形态上与布鲁氏菌 嗜血杆菌 巴斯德菌相似 无动力 12 13 人类心杆菌 该菌为多形性革兰阴性杆菌 阳性血培养瓶中的细菌革兰染色后 初始的菌体呈细小 革兰阴性杆菌 且易于形成花环状 这种血液肉汤培养后革兰染色表现为花环状结构的现象是该菌所特有的 在普通血琼脂平板上形成不溶血 无色透明的凹陷菌落 麦康凯平板上不生长 幼龄培养菌常呈革兰阳性的 革兰染色可见花环状结构 该菌氧化酶 吲哚阳性 触酶阴性 当从成人血培养中分离到形成花环状结构的革兰阴性杆菌时 应首先考虑人类心杆菌 因为这对心内膜炎的诊断和早期治疗非常重要 当临床医生非常怀疑为人类心杆菌时 可通过硝酸盐还原试验阴性来确认 14 人类心杆菌 15 啮蚀艾肯菌 啮蚀艾肯菌是口腔里的正常菌群 但也是心内膜炎 拳击伤口 人和动物的咬伤的重要致病菌 在BAP上不溶血 而常常首先于巧克力平板上识别出来 在巧克力平板上 该菌会在菌落边缘向外延伸形成扁平的外沿 在5 CO2环境下生长更好 BAP上菌落凹陷或附着生长 当平板打开时会散发出明显的漂白剂气味 在确证之前不要靠近闻 麦康凯平板上不生长 本菌为革兰阴性 菌体小 细长的直杆菌 16 啮蚀艾肯菌 鉴定的主要特性凹陷 菌落形态为干燥 扁平 放射状或不规则的圆形 中心湿润 延长培养时间 其菌落周围的培养基呈淡绿色 触酶 吲哚阴性 氧化酶阳性 啮蚀艾肯菌是惟一不在麦康凯平板生长 触酶阴性 氧化酶阳性 鸟氨酸阳性的革兰阴性杆菌 一旦确认触酶阴性 氧化酶阳性 很可能为机体正常口腔菌群 包括HACEK菌群 之一 从而排除危险的高度致病性革兰阴性杆菌的可能性 17 啮蚀艾肯菌 18 金氏金菌 金氏金菌在BAP上生长良好 形成大 光滑 不透明的白色或米黄色 溶血菌落 与肠杆菌科相似 但本菌在麦康凯平板上不生长 革兰染色表现为短球形革兰阴性杆菌 该菌种触酶阴性 氧化酶阳性 金氏金菌分离于关节液 血液培养或其他无菌组织 19 金氏金菌 20 马尔尼菲青霉菌 血培养皿上形态 培养后菌落乳酸酚棉兰染色 帚状枝 骨髓瑞士染色可见吞噬细胞内菌体 裂殖 双相性 21 脑脊液细菌培养 脑脊液培养常见细菌 革兰阳性菌革兰阴性菌真菌 肺炎链球菌脑膜炎奈瑟氏菌新型隐球菌B群链球菌大肠艾希菌白色假丝酵母菌A群链球菌铜绿假单胞菌消化链球菌卡他布兰汉菌结核分枝杆菌类杆菌产单核细胞李斯特菌不动杆菌炭疽芽孢杆菌肺炎克雷伯菌葡萄球菌流感嗜血杆菌 22 脑脊液细菌培养 急性脑膜炎常见致病菌 年龄细菌新生儿大肠埃希氏菌 无乳链球菌 B群 产单核李斯特菌 疱疹病毒 2个月无乳链球菌 产单核李斯特菌 大肠埃希氏菌 10岁病毒 流感嗜血杆菌 肺炎链球菌 脑膜炎奈瑟氏菌年轻人病毒 脑膜炎奈瑟氏菌成人肺炎链球菌 脑膜炎奈瑟氏菌老年人肺炎链球菌 革兰阴性杆菌 产单核李斯特菌AIDS病人新型隐球菌 23 脑脊液培养注意事项 1标本送检 培养脑膜炎奈瑟氏菌 流感嗜血杆菌等苛养菌时 应保温送检2怀疑新型隐球菌感染 1 涂片 应进行墨汁染色 革兰染色可能会为阴性 2 培养 若涂片为阳性 应接种相应培养基 24 脑脊液培养注意事项 1凝固酶阴性杆菌和棒状杆菌属可能会引起中枢神经系统分流术感染 CNSshunt 2一些重要的细菌检测 脑膜炎奈瑟氏菌 产单核李斯特菌 光滑小菌落 在哥伦比亚血平板上产生狭窄的 溶血环 菌落灰白色 室温有动力 在37 动力缓慢 触酶 在半固体培养基 MIU 内 可出现倒伞形生长 新型隐球菌 25 脑膜炎奈瑟氏菌 26 产单核李斯特菌 27 新型隐球菌 28 尿液细菌培养 正常人体内 膀胱中的尿液是无菌的 从膀胱中穿刺取出的尿也是无菌的 尿液经尿道排出时 受到尿道中细菌的污染而混有细菌 经尿道排出的中段尿污染细菌数一般不会超过103CFU ml 当患有泌尿系感染时 尿中的菌数一般高于104 105CFU ml 因而 以此界限作为诊断泌尿系感染的依据 29 尿路感染常见病原菌 80 为革兰阴性杆菌 其中以大肠埃希菌最为常见 占泌感的70 以上 其次为变形杆菌 铜绿假单胞菌 克雷伯菌 肠杆菌 沙雷菌 产气杆菌 沙门菌等20 为革兰阳性菌 其中以肠球菌为多见 次为葡萄球菌真菌感染呈上升趋势 30 尿液细菌培养 标本 通常为清洁中段尿 需要时可用导尿管或膀胱穿刺液等 尿标本应及时接种 否则细菌生长 影响结果判断 接种 用定量接种环取一环 10ul 尿液标本进行接种 31 尿液细菌培养结果报告 G 杆菌 32 尿液细菌培养结果报告 导尿管尿 应视为致病菌 当菌计 104cfu ml 应做敏感并加上批语 有临床症状的重复分离株可视为病原菌 穿刺等无菌尿 只要有细菌生长 就应鉴定并做药敏 33 呼吸道标本细菌培养 呼吸道正常菌群 34 呼吸道可疑致病菌 35 呼吸道标本细菌培养 标本 痰 纤支镜灌洗物 支气管肺灌洗吸出液 气管抽出液或刷子 肺穿刺或活组织 鼻咽拭子等培养基 至少包含哥伦比亚血平板 BA 巧克力平板 CH 培养环境 5 10 CO2 36 呼吸道标本细菌培养 咽拭 主要病原菌 A群 溶血链球菌 隐秘杆菌 不需报告咽炎中的非致病菌 金黄色葡萄球菌 肺炎链球菌 流感嗜血杆菌 卡他莫拉菌 溶血链球菌 所有革兰阴性杆菌 所有酵母菌 37 化脓性链球菌 溶血隐秘杆菌 38 呼吸道标本细菌培养 痰 肉眼观察 痰的性状 唾液 含血黏液痰 水样 白粘带脓性 黄色脓性 其他 并记录 痰涂片检查 合格 39 痰标本质量的评估 不合格标本指唾液或唾液严重污染的痰标本 含鳞状上皮细胞多 而白细胞少 合格标本WBC 25 LP上皮细胞 10 LP 40 CAP常见致病菌 痰 41 呼吸道标本细菌培养 痰 注意事项 Pae 铜绿假单胞菌 的粘液型因其粘性强 易致气管阻塞等 故即使少量也要报告 所有病原菌均按比例进行报告