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文档简介

研究背景,在花色育种中的应用,花色是花卉最重要的观赏性状之一,花色主要由三大类色素决定,类黄酮、类胡萝卜素和甜菜色素,利用反义RNA抑制基因的活性，使花的颜色变浅,引入外源基因来补充某些品种缺乏合成某些颜色的能力，使颜色变深,包括花器官结构、花枝着生状态、花序类型、植株形态等的改良,转rolC基因菊花品种表现为丛生、矮化，叶多分裂,将DOH1基因以反义形式导入石斛，获得分枝性强且矮化的转基因石斛,1,2,3,在形态育种中的应用,蛋白酶抑制剂基因,包括抗虫和抗病性,应用最广泛的是Bt基因,几丁质酶基因,1,2,3,4,在抗性育种中的应用,在花卉保鲜育种中的应用,分子育种应注意的问题,分子育种与传统育种方法需紧密结合,1,加强部门、行业、学科间的交流与合作,2,把目的基因的开发利用与花卉基因文库的保存紧密地结合起来,3,加强国际合作，借鉴已有的研究成果，少走弯路,4,无法以种子繁殖或种子繁殖后代明显变异分离的、传统的嫁接方式也不能从根本上改变花卉品种,重点研究的是将抗病、抗虫、抗冻、抗热基因引进到花卉植株中来，通常统称为抗逆基因的导人。,如何将抗逆基因导入到花卉植株中，从而获得抗逆基因新品种，直接关系到花卉生产的利益。,应用范围,研究重点,研究意义,01,02,03,分子育种的目的及意义,花卉分子育种的主要内容,研究思路与设想,1,2,3,将目的基因分离出来,构建重组分子导入植物,筛选获得目的基因表达的后代,将带有目的性状基因的供体总DNA片段导入植物,筛选带目的性状的后代,培育新品种,利用化学合成或PCR，体外克隆出目的基因包括已知基因和未知基因,试验路线,试验路线,目的基因,宿主植物,表型筛选,克隆,转化,鉴定,研究思路与设想,转化组织,构建基因组文库,化学合成法PCR扩增,构建cDNA文库,已知基因的获得,未知基因的获得,试验路线,试验路线,试验路线,遗传转化,直接转化法,其他,间接转化法,试验路线,直接转化法,基因枪,PEG介导,电击,花粉管通道,试验路线,带有转化基因的农杆菌活化,受体植物,叶盘,侵染,共培养,筛选培养,诱导成苗,转化组织,试验路线,炼苗,试验路线,培养过程中利用标记基因筛选,标记基因,选择标记基因(Slectivegene),报告基因(Reportgene),抗生素类选择基因抗除草剂类选择基因生物安全性标记类选择基因,筛选与鉴定,试验路线,原理：葡萄糖酸苷酶基因（Gus），催化葡萄糖苷酯类物质水解。其中很多水解产物具有发色团或形成荧光物质。例：组织化学法测定Gus活性作用底物为X-gluc,产物是一种不可溶的5,5-二溴，4,4-二氯靛蓝；,Gus检测,试验路线,检测,外源基因整合,外源基因拷贝.,外源基因表达,
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