（化学专业论文）瑞香狼毒根化学成分的研究.pdf

原创性声明 本人声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。除本文已经注明引用的内容外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也 j 不包含为获得内鏊直太堂及其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同 志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：邀签! 生 指导教师签名： 日 期：划l ：么：么 日期： 在学期间研究成果使用承诺书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：内蒙古大学有权将 学位论文的全部内容或部分保留并向国家有关机构、部门送交学位论文的复印件和磁盘，允 许编入有关数据库进行检索，也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文。 为保护学院和导师的知识产权，作者在学期间取得的研究成果属于内蒙古大学。作者今后使 用涉及在学期间主要研究内容或研究成果，须征得内蒙古大学就读期间导师的同意；若用于 发表论文，版权单位必须署名为内蒙古大学方可投稿或公开发表。 。 学位论文作者签名：送查：雄 e t 期：童q 【l 笸：6 指导教师签名： 日期： 内蒙古大学硕上学位论文 瑞香狼毒根化学成分的研究 摘要 瑞香狼毒为瑞香科狼毒属植物s t e l l e r ac h a m a e j a s m el ，其干燥的根由于 在抗癌、杀菌、杀虫等方面具较强的作用而引起国内外大量学者的关注。本论 文对瑞香狼毒根的化学成分进行了研究，并且对瑞香狼毒的研究概况作了简要 综述。 本文对瑞香狼毒根用9 5 7 , 醇回流提取，提取物分别采用不同极性的溶剂进 行萃取，然后利用硅胶柱色谱、制备薄层色谱、萃取、重结晶、高效液相等技 术进行分离纯化。通过理化常数、红外光谱、核磁共振氢谱、碳谱和二维核磁 共振谱等数据并结合文献分析鉴定了3 个化合物，其结构为分别为邻苯二甲酸 二丁酯( i ) 2 个，蔗糖( i i ) ，新狼毒素a ( i ) ，并利用气相色谱一质谱联用技 术对瑞香狼毒根中油状物进行了分析。 关键词：瑞香狼毒，邻苯二甲酸二丁酯，蔗糖，新狼毒素a s t e l l e r ac h a m a e j a s m el h a sb e e nt a k e nn o t eo fb ys o m er e s e a c h e ri nm a n y c o n t r i e sb e c a u s eo fi t sa n t i c a n c e r , a n t i b a c t e r a le t a l t h ec h e m i c a lc o n s t i t u e n t si nt h e r o o t so fs t e l l e r ac h a m a e ja s m el h a v eb e e ns t u d i e d ，t h eg e n e r a ls i t u a t i o nh a v eb e e n r e v i e w e di nt h i st h e s i s i np r e s e n ts t u d y , t h er o o to fs t e l l e r ac h a m a e ja s n el w a se x t r a c t e db y9 5 e t h a n 0 1 t h ea b s t r a c t i o n sw e r es u b s e q u e n t l ye x t r a c t e dw i t hd i f f e r e n tp o l a r s o l v e n t t h r e ec o m p o u n d sh a v eb e e ni s o l a t e da n dp u r i f i e db yu t i l i z i n gc o l u m n c h r o m a t o g r a p h y , p r e p a r a t i v et l c a n dr e c r y s t a l l i z a t i o nt e c h n i q u e s t h es t r u c t u r e so f t h r e ec o m p o u n d sh a v eb e e ni d e n t i f i e db yi r , 1dn m r ( 1 h n m r , ”c n m r ) ，2 d n m r ( h s q c ，h m b c ) a n d r e f e r e n c el i t e r a t u r e s t h e ya r ed i b u t y lp h t h a l a t e ，s u c r o s e ， n e o c h a m a e j a s m i n a k e y w o r d s ：s t e l l e r ac h a m a e j a s m el ，d i b u t y lp h t h a l a t e ，s u c r o s e ， n e o c h a m a e j a s m i na 内蒙古大学硕士学位论文 目录 摘昌要l a b s t r a c t 第一章瑞香科植物和瑞香狼毒化学成分文献综述1 1 1 瑞香科植物简介1 1 2 瑞香狼毒植物学特征1 1 3 瑞香狼毒的地理分布及药理作用2 1 4 瑞香狼毒化学成分研究进展2 1 4 1 香豆素类化合物3 1 4 2 萜类4 1 4 3 黄酮类化合物5 1 4 4 木脂素类8 1 4 5 挥发油类8 1 4 6 其它类化合物9 第二章瑞香狼毒根中化学成分的提取，分离和鉴定1 0 2 1 研究目的和意义1 0 2 2 实验仪器和材料1 0 2 2 1 实验仪器。1 0 2 2 2 实验试剂1 0 2 2 3 实验材料1 1 2 3 化学成分的提取和分离1 1 2 3 1 提取。1 l 2 3 2 化学成分纯化和鉴定1 2 2 4 瑞香狼毒根油状成分的g c - m c 分析1 4 2 4 1g c m s 的测试条件1 4 2 4 2 乙醚提取物分离油状成分的g c - m c 分析鉴定1 5 第三章结果与讨论1 7 展望。2 2 参考文献：一2 3 附图2 7 致j 射。4 2 瑞香科( t h y m e l a e a c e a ) 是被子植物门( a n g i o s p e r m a e ) 、双子叶植物纲( d i c o t y l e d o n e a e ) 、蔷薇亚纲( r o s i d a e ) 、( m y r t a l e s ) 的1 科。瑞香科植物在世界上约有5 0 属5 0 0 余种， 广布于全世界热带和温带地区，但主产非洲南部、地中海沿岸至大洋洲。我国有9 属，分别 是瑞香属( d a p h n e ) 、荛花属( w i k s t r o e m i a ) 、狼毒属( s t e l l e r a ) 、沉香属( a q u i l a r i a ) 、 结香属( e d g e w o r t h i a ) 、鼠皮树属( r h a m n o n e u r o n ) 、假狼毒属( s t e l l e r o p s i s ) 、栗麻属( d i a t h r o n ) 、毛花瑞香属( e r i o s o l e n a ) ，共有9 0 多种，分布遍及全国，主要生长子长江流域 以南各省区，其中以瑞香属与荛花属居多【1 ，2 j 。本科有毒植物主要分布于狼毒属、瑞香属、荛 花属，且多为药用植物，具显著的生理活性，但对皮肤及粘膜具有强烈的刺激性【l 】。狼毒属 ( s t e l l e r a ) 共有6 种，分布于亚洲温带地区，在我国有1 种【3 一，即瑞香狼毒。 一 1 2 瑞香狼毒植物学特征 瑞香狼毒( s t e l l e r ac h a m e j a s m e l ) 为瑞香科狼毒属植物，是少用中药“狼毒”三种 原植物之一，俗称断肠草，馒头花，洋火头花、山丹花、闷头草、一把香等，是瑞香科狼毒属 多年生草本植物，其高2 0c m 5 0 c m ，根茎粗大木质化，成圆柱形；茎直立丛生，少则3 - - - 5 个，多则2 0 个以上；单叶互生或对生，叶全缘，长1 2 c m 2 8a m ，宽0 3 0c m 0 9a m ， 均无毛【5 , 6 , 7 , 8 1 ，披针形或线形，叶柄短；头状花序，顶生，花萼冠状，花白色或黄色，萼筒细 管状，顶端五裂；雄蕊1 0 枚，2 轮环生；子房上位，头状，种子l 枚；返青期6 月初，花期 7 - - - 8 月，果期9 1 0 月【4 9 】，瑞香狼毒再生能力强，冬季地上部分干枯死亡，以地下部分越冬。 产种量大，结实能力强，成年株可年产种2 0 0 粒左右，果皮厚而硬，种子坚固，生殖能力强。 单叶披针形，蜡质层厚。它能忍受长期干旱，根系入土深，吸水能力强，丛生枝条多，冠层 繁茂，在干草原上，瑞香狼毒地上部分春季时较其他植物萌发早，入秋时又有二次萌发，其粗大 的直根系可深入地下吸收水分因为强大的生存力和繁殖力使瑞香狼毒在北方干旱草原上得 以大肆蔓延。 。 内蒙古大学硕士学位论文 1 3 瑞香狼毒的地理分布及药理作用 瑞香狼毒多生长于海拨2 3 0 0 一- - 4 2 0 0m ，年均温度o 。c 左右的干燥向阳山坡及高山亚高山 草地 1 6 , 1 7 】。我国广泛分布于西北、东北、华北、西南等地，主要分布于青海省的天然草地、 四川省的甘孜州、阿坝州天然草场及梁山州的西北部【1 1 ，3 ，4 ，12 1 。瑞香狼毒多生于沙地、山地与 丘陵，干草原、沙质草原和典型草原的退化草地上，为一般草原植物群落的伴生种，在重度退 化的草原上已成为主要的建群种。在同一类型的草原地带，由于其局部生态条件的差异，使瑞 香狼毒分布呈斑块状镶嵌，或随机分布，定居在碎石和石质坡地上以及沙质草地上【1 3 】，其与牧 草争水、争肥、争空间，严重影响草场利用及牧草的品质与繁衍，引起草原退化，实为我国 天然草场一大祸害。据调查，甘肃有4 6 6 万h i i l 2 草原遭受危害，每年牧草减产1 3 7 5 亿k g ， 经济损失近1 5 0 0 - - 2 0 0 0 万元【1 4 】；青海省天然草地上生长的瑞香狼毒面积达7 3 3 万h 1 2 ，密度 为每百平方米3 5 0 株丛，最多可达1 9 9 8 - 5 0 0 0 株丛【1 5 】；海北洲海晏县青海湖乡每百平方米有 狼毒4 0 0 一- 1 4 0 0 株丛，盖度为2 0 - - 4 0 。另据不完全统计，内蒙古哲里木盟阿鲁旗己经形成 了以瑞香狼毒为主要植物群落的草场约4 万h m 2 ，有瑞香狼毒生长的草场约1 3 3 万h m 2 以上， 占全旗1 0 4 万h m 2 草场面积的2 8 ；在内蒙古乌兰察布干草原，狼毒已成为退化草地的景观 植物1 1 4 j 。 中药狼毒始载于神农本草经，列为下品，为少用中药。其味苦辛，性平，有毒，入肺 脾肝经，有逐水祛痰、破积杀虫的功效【4 引，主治水肿腹胀、痰、食、虫、积、心腹疼痛、慢 性气管炎、咳嗽气喘、淋结、皮肤、骨、疥癣、痔缕等。经过多年的现代药理与临床研究， 结果表明，瑞香狼毒中含有的化合物，特别是二萜类、双二氢黄酮类、木脂素类等成分有抗 肿瘤作用、抗h i v 病毒作用、抗菌作用、抗结核作用以及对免疫系统的作用，提示其具有潜 在的重要药用价值【4 6 j 。 1 4 瑞香狼毒化学成分研究进展 关于瑞香狼毒化学成分的研究始于2 0 世纪6 0 年代。近几年来，随着现代高科技研究手段 的发展，许多国内外学者对瑞香狼毒进行了更进一步的理论化、系统化的研究，取得了突破 性进展，为其深层次开发提供了可靠的依据。目前从瑞香狼毒中分离鉴定出结构的化学成分 已经有非常多种类型，总结归纳主要有萜类、黄酮类、香豆素类、木脂素以及高分子有机酸 等化合物。 2 一一 内蒙古大学硕士学位论文 【_ - 。- 。1 。_ _ 。_ 。1 。1 。1 。一 1 4 1 香豆素类化合物 据文献报道，目前发现香豆素类化合物有植物生长调节、光敏、抗菌抗病毒、平滑肌松 弛、抗血凝等作用，香豆素类化合物在瑞香狼毒的根部和地上部分均有分布，是瑞香科植物 的一类特征成分之一。目前已从瑞香狼毒中分离鉴定出约1 2 种香豆素，这些香豆素多数具有 较强的生物活性。大致可以分为3 类【1 8 1 9 。2 。 第1 类为简单香豆素类，包括伞形花内酯( u m b e l l i f e r o n e ) ( 1 ) 、瑞香内酯有名瑞香素。 d a p h n e t i n ) ( 2 ) 及在其7 位形成的单糖甙类瑞香甙( d a p h n i n ) ( 3 ) 和一种双糖甙、东莨菪素 ( s c o p o l e t i n ) ( 4 ) 等。 第2 类主要为呋哺环与香豆素母核在7 、8 位连接形成的角型呋喃香豆素类，有牛防风素 ( s p h o n d i n ) ( 5 ) 、异佛手柑内酯( i s o b e r g a t e o ) ( 6 ) 、茴芹香豆素( p i m p i n e l l i n ) ，还有一个呋 哺环与香豆素母核在6 、7 位连接形成的直型呋喃香豆素一一_ 异茴芹香豆素， ( i s o p i m p i n e l l i n ) ( 8 ) 。 第3 类为双香豆素类，包括西瑞香素( 又名双百瑞香素，d a p h n o r e t i n ) ( 9 ) 、及其7 0 _ 葡 萄糖甙( c h a m a e j a s o s i d e ) ( 1 0 ) i 异西瑞香素( i s o d a p h n o r e t i n ) ( 1 1 ) 【4 9 】等。 牛防风素( s p h o n d i n ) ( 1 ) 、异佛手柑内酯( i s o b e r g a p t e o ) ( 2 ) 、茴芹香豆素 ( p i m p i n e l l i n ) ( 3 ) 和异茴芹香豆素( i s o p i m p i n e l l i n ) ( 4 ) 是前苏联学者t i k h o m i r o v a 1 8 】于 1 9 7 4 年最先从瑞香狼毒中发现的香豆素类化合物。 h 3 c o h 3 c 3 o 4 o c h 3 1 9 8 5 年，前苏联学者m o d o n o v a 2 5 1 又自瑞香狼毒地上部分首次分离鉴定出伞形花内酯 ( u m b e l l i f e r o n e ) ( 5 ) 、瑞香内酯( 又译为瑞香苷、白瑞香素，d a p h n e t i n ) ( 6 ) 和西瑞香素 ( d a p h n o r e t i n ) ( 7 ) ，同时分得东莨菪素( s c o p o l e t i n ) ( 8 ) 。 3 h o h 3 c o o o h 3 c o h oo 7 8 蒙古学者n a r a n t u y a a 刀于1 9 9 4 年自瑞香狼毒地上部分首次分离鉴定出瑞香苷( 又称白瑞 香苷，d a p h n i n ) ( 1 0 ) ，同时也得到一新的双香豆素苷类化合物西瑞香素一7 一o _ 葡萄糖苷 ( c h a m a e j a s m o s i d e ) ( 9 ) ， 1 9 9 5 - 1 9 9 6 ，我国学者刘桂芳等 2 6 , 2 7 】自中国产瑞香狼毒根中又分得 一新化合物异西瑞香素( i s o d a p h n o r e t i n ) ( 1 1 ) ，同时还得到了西瑞香素、伞形花内酯及瑞香 素。：， 二一 h 3 c o 八o 兰囝h 3 c o a v o 1 4 2 萜类 o g l 1 0 萜类( t e r p e n e ) 【2 8 】无论是它们在植物界分布的广泛程度，还是从它们对人类生活的作用来 看都是一种重要的植物成分。这类成分从结构上可分为倍半萜、单萜、二萜、三萜等类别。 我们非常熟悉的植物激素脱落酸是典型的倍半萜结构，赤霉素是典型的二萜类结构。从瑞香 狼毒根部已鉴定分离的萜类化合物达11 种，其中二萜类化合物多数具有显著的生理活性，特 别是二萜原酸酯类化合物。1 9 8 2 年，n i w a 【2 9 】自瑞香狼毒根中分离得到的4 种具有抗癌活性的 瑞香烷型( d a p h n a n e ) 化合物，它们分别为h u r a t o x i n ( 1 2 ) 、s u b t o x i na ( 1 3 ) 、s i m p l e x i n ( 1 4 ) 、 p i m e l e a - f a c t o rp ( 1 6 ) 。1 0 年后冯威健等 3 0 , 3 1 1 分离得到强抗癌活性成分尼地吗啉 4 内蒙古大学坝十学位论文 ( g n i d i m a c r i n ) ( 1 7 ) 及一新化合物s t e l l e r a m a c r i n 。1 9 9 3 年i k e k a w at e t s u r o 进一步分离得 到抗癌活性成分s t e l l e r a m a c r i na 和b 1 3 2 】( 1 8 ，1 5 ) ，1 9 9 6 年得到一显著抗白血病作用的化合 物n e o s t e l l i n d 3 i ( 1 9 ) ，1 9 9 7 年e n d o y u i c h i 等再得到一个具有抗h i v - i 病毒作用且细胞毒性 很低的c o m p o u n di ( 2 0 ) d 4 1 ，冯宝民在2 0 0 1 年又发现一新化合物新瑞香素( n e o s t e l l e r i n ) 【2 0 1 。 j 2 ：r i = r 4 = h , r 3 一= ，r 4 = m e ( c h 2 ) ( c 自h = c h ) ， ，1 6 7 ：r r l ，：= 。r 2 h = ，r r a 。：, r r 3 4 = ：h h r ，r 3 ：= ：p p h h c c o 。0 3 ：r i = m e c o o r 2 = m e ( c h 2 ) 8 ( c h = c h ) r 3 = r 4 = h 。“4 1 一， ， 7 d 一，、l jd d l jd d h ，、n n ：r i = r 4 = h 口, r 一2 = 。m ，r e ( h c h 、，2 r ) , h r 一3 r = m u ： ；8 “：“r 1 1 = r 。4 ”= 。m 喝e , r “3 4 = o ”h 一, 哩r 2 。= ”b 。z o 。c 。h 3 5 ：r1 i = o h ，r 2 = m e ( c h 2 ) ( c h = c h ) 2 ，r 4 = m e 。 o p h 3 c c o o 1 9 1 4 3 黄酮类化合物 h 2 0 o h 3 黄酮类化合物( f l a v o n o i d ) 又称黄酮体、黄碱素，是植物界中分布最广的一类成分，它 常以游离态或与糖结合成苷的形式存在于自然界中。黄酮类成分对植物的生长、发育、开花、 结果以及抵御异物的侵入等起着重要的作用3 5 1 ，瑞香狼毒中的黄酮类成分主要有c - 3 c - 3 5 内蒙古大学坝上学位论文 连接的双黄酮类化合物( 狼毒素类化合物) 、狼毒色原酮和黄烷一3 一醇及含有黄烷单元的双黄酮 类。其中，狼毒素类含量较高。瑞香狼毒中的黄酮类化合物有一共同特点：b 环都有羟基、甲 氧基或葡萄糖基取代，单糖苷皆为葡萄糖苷。 对于瑞香狼毒中的黄酮类化合物的研究，最早是我国化学家黄文魁先生，1 9 6 3 年他分离 得到了第一个瑞香狼毒中的双二氢黄酮类化台物，命名为狼毒素( c h a m a e j a s m i n e ) 。到目前为 止，人们己经从瑞香狼毒中分离出大量黄酮类化合物。它包括1 9 7 7 年黄文魁分离得到的狼毒 素( c h a m a e j a s m i n e ) ( 2 1 ) ，1 9 8 4 年杨伟文等得到的7 一甲氧基狼毒素 ( 7 - m e t h o x y l c h a m a e j a s m i n e ) ，1 9 8 4 - 1 9 8 6 年间，日本学者m a s a t a k en i w a 研究组分离得到八 种双二氢黄酮同系物及其异构体：狼毒素a ，b ，c ( c h a m a e j a s m i na ，b ，c ) 【3 6 】( 2 2 ，2 3 ，2 4 ) ，新_ 狼毒素a ，b ( n e o c h a m a e j a s m i na ，b ) 3 7 1 ( 2 5 ，2 6 ) ，异狼毒素( i s o c h a m a e j a s m i n ) i s l ( 2 7 ) ，狼毒 素外消旋体c h a m a e j a s m i n e ( d 1 ) 、内消旋体异狼毒素i s o c h a m a e j a s m i n ( m e s o 一) ，1 9 9 5 年日本 学者i k e g a w at e t s u o 【3 8 】又自瑞香狼毒中分离得到的较强抗h i v 病毒的优狼毒素a ( 2 9 ) ，b ， c ( e u c h a n m a e j a s m i na ，b ，c ) 。 ：1 9 9 5 年刘桂芳【2 2 】分离得到一个新的二氢黄酮类化合物：37 ，1 4 - 一- 甲基一4 ，1 1 一二甲氧 基一5 ，7 一二羟基苯骈二氢黄酮【4 0 】( 3 2 ) 。1 9 9 9 年j i n 嘞3 分离出一个二氢黄酮苷类化合物：二氢山 奈酚一7 一o - b - d - 葡萄糖苷，同时得到狼毒色原酮( c h a m a e c h r o m o n e ) ( 2 8 ) 及一个新的狼毒色原 乏 酮衍生物m o h s e n o n e ( 3 1 ) ；1 9 7 6 年蒙古学者r e z a n o v a l 4 4 分离得n - 氢山奈酚( 3 0 ) ；2 0 0 0 2 0 0 1 年冯宝民t 2 1 , s l 】分得新狼毒素- 甲、狼毒色原酮和芫花醇乙，同时自该植物中首次分离鉴定出旋光 j 纯的7 一甲氧基狼毒素和一个新化合物s 一( + ) - 1 ，5 - - - 苯基- 3 - 羟基- 1 - 戊酮；2 0 0 1 年徐志红等 分离得到的瑞香狼毒素a ，b ( r u i x i a n g l a n g d u s ua ，b ) m7 j ；4 ，47 ，5 ，5 ，7 ，7 ! 一h e x a h y d r o x y 一3 ，3 一b i f l a v o n e ；2 0 0 2 年z h i - h o n gj i a n g 得至0 的7 - m e t h o x y l n e o c h a e j a s m i n a ，2 0 0 3 年刘欣等得到二氢瑞香素乙( d i h y d r o d a p h n o d o r i nb ) 4 0 2 3 等。 ：o 6 2 6 2 8 7 h 2 7 h o o c h 3 0 c h 3 0 3 2 1 4 4 木脂素类 h 3 木脂素类( 1 i g n a n s ) 是一类苯丙素氧化聚合而成的天然产物，常指其二聚物，少数为三聚童 物和四聚物，它有许多生物活性。 1 9 8 5 年，日本学者t a t e m a t s uh i r o s h i 4 5 】自瑞香狼毒根中分离鉴定出具有毒鱼活性的木o j 脂体类化合物鹅掌楸树脂醇b ( 1i r i o r e s i n o lb ) 和松脂醇( p i n o r e s i n 0 1 ) 。1 9 9 4 年，日本学者 i k e g a w at e t s u o 6 1 l 研究发现，木脂体类化合物桉素( e u d e s m i n ) 具有抗h i v 病毒作用。2 0 0 1 年， 徐志红【6 2 】首次分离出一种新的木脂素类化合物( 一) - p i n o r e s i n o lm o n o m e t h y l e t h e r ，其具有抗 菌活性。2 0 0 3 年j 刘欣等【2 3 】发现双木脂素：罗汉松树脂酚、拉帕酚、牛蒡苷。 1 4 5 挥发油类 挥发油( v o l a t i l eo i l s ) 又称精油( e s s e n t i a lo i l s ) ，是一类具有芳香气味的油状液 体的总称。在室温下能挥发，可随水蒸气蒸馏。挥发油类成分在植物界分布很广，含有挥发 油的药材也很多，在我国野生与栽培的芳香药用植物有数百种之多。挥发油为多种类型化合 物的混合物，含有化学成分都比较复杂，由十几种到一百多种成分组成，其中有脂肪族化合 物、芳香族化合物、更多为萜类衍生物。 8 内蒙古入学硕士学位论文 1 9 8 6 年，杨伟文【5 9 】用气相色谱质谱( g c m s ) 联用技术对瑞香狼毒根的挥发油进行了研究， 共分离得到了2 7 种成分，其中1 2 种成分( 占精油总量的6 2 5 ) 分别鉴定为卜苯甲基丙二酮 一1 ，2 、正辛烷、肉桂酚、2 ，6 一二甲基庚烷、2 ，6 一二甲基辛烷、5 一甲基烷、正十二烷、正十三 烷、2 ，5 一二甲基十二烷、卜苯基己酮一3 、7 ，1 0 - 十 k - - 烯酸甲酯和3 ，7 ，1 1 一三甲基十二碳一2 一 反一6 一顺一1 0 一三烯醇。其中，最后2 种成分分别占挥发油总量的1 7 8 9 和2 2 0 7 。于风兰【删 等从新鲜瑞香狼毒茎叶经正己烷提取，脱腊后进行g c - m s d s 联用分析，鉴定出2 0 个化合物。 主要成分为正十八烷，正十九烷，2 ，6 ，1 0 ，1 4 一四甲基十六烷，十六烷酸，十六烷酸甲酯，十 六烷酸乙酯，9 ，1 2 ，1 5 - 十八碳三烯酸甲酯，9 ，1 2 - 十八碳二烯酸，9 ，1 2 ，1 5 - 十八碳三烯酸和 十八烷酸。 1 4 6 其它类化合物 甾醇类化合物1 9 8 0 年gs c h r o e d e r 5 2 】等学者首次分得7 一氧代甾醇、7 a 一羟基甾醇、7 b 一羟基甾醇；1 9 8 7 年刘桂芳【5 3 】等分离鉴定出谷甾醇。 ， 。 葸醌类化合物，1 9 9 7 年马晴高【5 4 l 首次分离得到大黄素甲醚。另外，瑞香狼毒根中还含有 b 一谷甾醇、胡萝卜苷、2 ，6 - - - 甲氧基对苯醌1 5 引、1 ，5 - - - 苯基一卜戊酮、1 ，5 = - - 苯基2 一烯一卜 戊酮、对羟基桂皮酸、正二十二酯、咖啡酸正二十酯1 2 0 】和s 一( + ) - 3 - 羟基_ 1 ，5 一二苯基- - 1 - 戊酮、 硬脂酸及三萜类化合物白桦酸1 2 3 等成分。有报道，瑞香狼毒中总酸性成分含量为 1 7 7 0 m g g - i 1 5 6 1 ，多糖含量占2 5 5 7 【5 7 1 ，总皂苷含量占2 7 5 ，鞣质含量占3 6 2 【5 8 】。： 瑞香狼毒根茎叶中还含有锌、铜、铝、砷、铅、镉、汞、钛、钒及镍等微量元素jj 在瑞 香狼毒钙、钾、镁、铅、铜、锌、镉、铁、锰等9 种金属元素中，钙、钾、镁含量较高，而对 人类健康有害的元素铅、镉含量比较低j ： - ：， ： 9 由于近几年的过度放牧，瑞香狼毒在内蒙古的分布面积在逐步扩大，特别是在局部地区 瑞香狼毒已经成为退化草原的优势种，这对草地生态系统产生了极大的压力。瑞香狼毒全株 有毒，家畜误食可导致其死亡，作为一个畜牧业大省其分布广泛危害严重。 2 2 实验仪器和材料 2 2 1 实验仪器 ，： 7 ： 。 i ： n e x u s 一6 7 0 f t i r 型傅里叶变换红外光谱仪，k b r 压片，美国 ， j y 0 2 s 型紫外分析仪，北京君意东方电泳设备有限公司 ? ：j一 一 。， ：， ：。 r e - 5 2 a a 型旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂 ： ， s h z - c 循环水多用真空泵，巩义市英峪予华仪器厂 ， x t t - 2x 4 显微熔点测定仪( 温度计未校正) ，北京泰克仪器有限公司 b r u k e r a v a n c e5 0 0 型核磁共振仪，d m s o 为溶剂，t m s 为内标，测定温度为3 0 ， 美国 2 2 2 实验试剂 序号试剂与材料 1石油醚( 沸程6 0 9 0 ) 2 乙醚 规格 分析纯 分析纯 3氯仿分析纯 4乙酸乙酯分析纯 产地 天津市北联精细化学品开发有限 公司 天津市北联精细化学品开发有限 公司 天津市北联精细化学品开发有限 公司 天津市北联精细化学品开发有限 公司 内蒙古人学硕 ：学位论文 5 乙醇( 9 5 )分析纯 6柱层析硅胶( 2 0 0 一3 0 0 目) 7 薄层层析硅胶板g f 2 5 4 2 2 3 实验材料 天津市北联精细化学品开发有限公司 青岛海洋化工厂分厂 青岛海洋化工厂分厂 瑞香狼毒的根采集时间2 0 0 9 年9 月初，采集地点内蒙古呼和浩特市大青山。采集样 品洗干净，撕碎，阴干备用 2 3 化学成分的提取和分离 2 3 1 提取 将8 k g 阴干的瑞香狼毒根用9 5 的乙醇回流提取，提取三次，每次3 小时，合并提取液， 经减压浓缩后得到约1 1 3 0 9 棕黑色浸膏。取1 0 7 0 9 此浸膏分散于3 5 的乙醇溶液中。依次用 有机试剂石油醚、乙醚、氯仿乙酸乙酯萃取，每种萃取三次。减压浓缩后得到石油醚、乙醚、 氯仿，乙酸乙酯萃取浸膏，质量分别为1 4 7 9 、l l l g 、7 5 9 、7 8 9 。提取过程如图2 一l 所示： 内蒙古大学硕j ：学位论文 8 k g 阴干的瑞香狼毒的根 ( 取乙醇浸膏加7 眙) 依次加入石油醚，乙醚，氯仿，乙酸乙酯萃取后浓缩 0 砒# 砷材，、， 、， 7 一一、 二。q 一物) ，。! 一 内蒙古大学硕士学位论文 6 0 9 乙醇浸膏 硅胶柱层析( 1 0 0 - 2 0 0 目) 1 1r r1r 、，、 石油醚：乙酸乙 石油醚：乙酸乙酯石油醚：乙酸乙酯 酯= 3 ：5 = 4 0 ：1 = 1 0 ：l lj l r r 1r ，r - 9 8 黄色油状物状物，处 6 - 5 0 3 淡黄色 m s 析 “i j 一，a l ， 7 士亡 1 ：工，石倒i 乙酸乙酯 晶 物i i i 瑞香狼毒根乙醇提取物分离过程 ( 二仿提取物 物，用尽量少的乙酸乙酯溶解，加入一，剩 余的溶剂于烘箱中低于5 0 烘干至不结块，得到一褐色粉末状样品。用硅胶(目) 法装柱，干法上样，并不断搅拌赶出气泡。以石油醚一乙酸乙酯系统 梯度，用硅胶gf板以石油醚一乙酸乙酯和乙酸乙酯一乙醇体系为展开试剂监测收集，每 ，共得到个组合并相同组分。 塑鍪直奎兰堡主兰垡笙塞 当石油醚：乙酸乙酯= 3 0 ：l 时，合并组分5 3 0 ，浓缩后得到黄色油状物质，再用硅胶柱反 复梯度洗脱，得到黄色油状物，经过鉴定和化合物1 一样的物质。当石油醚：乙酸乙酯= 1 0 ：4 时，合并组分5 4 7 0 ，浓缩后得白色物质，经重结晶得到白色粉末即化合物i i i ，分离过程如 图2 3 所示： ，r 、 厂、石油醚：乙酸乙酯= 3 0 ：1 ，收集馏分 一， 5 - 3 0 ，黄色油状物，石油醚一乙酸乙酯 体系反复梯度洗脱，得与化合物i 一 圭胶柱层析 样物质 一 厂 、 一、 石油醚：乙酸乙酯= 1 0 ：4 馏分 y7 5 4 - 7 0 ，反复梯度洗脱，重结晶， 得化合物i i i 图2 3 瑞香狼毒根氯仿提取物分离过程 f i 醇- 3p r o c e d u r eo fi s o l a t i o no fc h l o r o f o r me x t r a c t i o n 2 4 瑞香狼毒根油状成分的g c m c 分析 2 4 1g o m s 的测试条件 仪器：7 8 9 0 a 气相色谱仪，5 9 7 5 c 质谱仪( m s ) 色谱条件： 色谱柱：d b 5 一m s ，辅助通道温度：3 2 0 。c ，柱温：8 0 ( 2 ( 0 5 m i n ) 一3 0 m i n - 1 6 0 一1 0 m i n 一1 8 0 ( 3 m i n ) ，进样口温度：3 0 0 。 样品进样方法： a g i l e n t 自动进样器，不分流、进样1l l1 ，载气：h e 质谱条件： 离子化方式：e l ，电子加速电压：7 0 v ，离子源温度：2 3 0 。c ，监测方式：s c a n ，进样口温度： 2 6 0 。c ，辅助通道温度：2 8 0 。c ，采集到质谱图用n i s t 标准质谱序进行检索分析。 1 4 表2 1 乙醚萃取物中油状物1 化学成分结果分析 t a b l e 2 - - 1a n a l y s i sr e s u l t so fc o n s t i t u e n t so fe s s e n t i a lo i lf r o mp e t r o l e u me t h e r e x t r a c t i o n ( 1 ) 编号保留时间 化合物名称 相对分子质量 ( n u ) ( t r m i n )( c o m p o u n d ) ( r e l a t i v em o e c u l a r m a s s ) 6 。7 6 1 0 3 3 1 1 3 3 1 2 9 4 1 3 5 2 1 3 8 4 2 2 9 6 ( e ，e ) - 2 ，4 - 十二二碳二烯醛( ( e ，e ) 一2 ，4 - d o d e c a d i e n a l ) 邻苯二甲酸：二丙酯( 1 ，2 - b e n z e n e d i c a r b o x y l i ca c i d ，d i p m p y le s t e r ) 邻苯二甲酸二丁酯( d i b u t y lp h t h a l a t e ) 1 ，3 ，5 - 三甲苯( b e n z e n e ，1 , 3 ，5 - t r i m e t h y l - ) 氟苯氧丙胺( f l u o x e t i n e ) 环丁醇 c y c l o b u t a n o 1 - ( 3 ，4 - 二羟基苯基) 一2 - 甲氨基乙醇e p i n e p h r i n e 1 8 0 2 5 0 2 7 8 1 2 0 3 4 6 1 7 2 1 8 3 82 4 9 3 3 , 7 ，1 1 一三甲基一2 ，6 ，1 0 一十二烷三烯醛( 3 ，7 ，1 1 - t r i m e t h y l d o d e c a 一2 ，6 ，1 0 - t r i e n a l ) 2 6 4 _ 一i i i i - _ - _ - - - _ - _ - _ _ _ - _ - _ - _ _ - _ _ - - _ i _ - _ _ _ _ _ l - l _ _ - l - l l _ - - _ _ _ _ _ - - _ - - _ _ _ _ - _ _ - _ _ - _ - _ i _ _ - - _ l _ - _ - - - _ _ - _ - _ _ _ _ _ _ _ - _ - _ l - - _ _ _ - - _ - - _ - _ _ _ _ _ - _ _ _ - _ _ _ _ _ _ - - 一 1 2 3 4 5 6 7 内蒙古人学硕上学位论文 油状物2 串度 t i c ：o o o o d d a t a m s 表2 2 乙醚萃取物中油状物2 化学成分结果分析 t a b l e 2 - - 2a n a l y s i sr e s u l t so f c o n s t i t u e n t so f e s s e n t i a lo i lf r o mp e t r o l e u me t h e r e x t r a c t i o n ( 2 ) o ， 卜 鲫鲫吾舳鲫鲫坩 酽 化合物1 黄色油状物i r ( k b r ) ：2 9 6 1 c m 、2 9 2 0c m 、2 8 5 1c m 。1 显示具有饱和的c h 。、c h 2 ，1 7 3 8c i l l q 处的强单峰说明化合物中有c = o ，11 7 5 c m - 11 2 6 4 c m - 1 为c o - c 的不对称伸缩振动吸收峰， 3 0 5 3 7 1 c m 一，3 0 6 8 8 8 c m _ 1 说明苯环的c h 伸缩振动；1 5 8 8 2 8 1 c m 、1 5 8 0 3 3 c m 一、1 4 6 6 7 3 c m _ 1 和1 6 1 1 4 3 c m 、1 5 8 0 2 2 c m - 1 、1 4 6 0 6 0 c m - 1 是苯环的骨架振动，充分证明苯环的存 在：7 2 1 5 7 c m 一，7 2 3 1 6 c m 一：苯环二取代c h 面外弯曲振动：结合1 3 c n m r 、1 h n m r ，初步确定化 合物为一酯类化合物。化合物的核磁共振数据见表3 1 表3 1化合物i 的核磁共振数据 t a b l e 3 。1n m rd a t ao fc o m p o u n di c 化学位移c 级数连接h 化学位移与h 远程相关c 位移与h 远程相关h c n m r 和d e p td e p t 或h n m r 和删q c舳c h h c o s y 删q c 1 6 6 9 q 一 1 3 1 7 q 1 3 1 4 7 6 01 2 8 67 6 0 - 7 6 5 c h 1 2 8 6 7 6 51 6 6 9 1 3 1 4 c h 6 4 94 1 51 6 6 9 3 0 01 8 64 1 5 - 1 5 8 c h 2 3 0 01 5 86 4 9 1 8 6 1 3 41 5 8 - 1 3 1 c h 2 1 8 61 3 16 4 93 0 o1 3 4 1 3 1 - 0 8 3 c h 2 1 3 4 0 8 33 0 0 1 8 6 c h 3 根据c o s y 和h m b c 可以确定4 1 5 - 1 5 8 - 0 8 3 为一个正丁基，末端c h 。( c 为6 4 9 ，h 为4 1 5 ) 应该连接一个o ，并与1 6 6 9 长程相关，说明1 6 6 9 为酯羧基。由c o s y 和h m b c 可以确定1 3 1 4 与 1 2 8 6 相连，j 1 1 2 8 6 离1 6 6 9 碳更近。结合文献【6 3 】，其核磁数据均和邻苯二甲酸二丁酯数据 吻合，推知化合物i 为邻苯二甲酸二丁酯，化学式为c 。h ：。q ，化合物的结构如下t