（参考课件）支原体.ppt

支原体又叫霉形体，属柔膜体纲，是一类无细胞壁的细菌，具有多形性，能通过细菌滤器。是目前已知能在无生命的培养基中繁殖的最小原核细胞型微生物。,第17章支原体（Mycoplasma）,1,特点:(1)无细胞壁，细胞柔软，多形性，能通过细菌滤器（多形性、可塑性、滤过性）(2)在人工培养基中生长繁殖，形成“煎荷包蛋状”菌落(3)基因组小，含有DNA和RNA(4)以二分裂或芽生方式繁殖(5)对青霉素有抵抗力常污染实验室培养的细胞及生物制品,2,一、形态与染色外围只有胞浆膜，常呈球状、两极状、环状、杆状偶见分枝丝状，无鞭毛，革兰氏染色呈阴性，着色不良，姬姆萨或瑞氏染色良好，呈淡紫色。支原体的细胞膜具有三层结构，内、外层主要是蛋白质，中间层主要是脂质(固醇含量高）。,3,二、培养特性由于基因组小，合成能力较弱，营养要求较高，需添加外源脂肪酸、甾醇、辅酶I、氨基酸等。生长缓慢（2-6d长出微小菌落），菌落呈“荷包蛋状”（猪肺炎支原体除外），菌落中心深入培养基中，致密、色暗；周围长在培养基表面，较透明。,4,无细胞壁二分裂方式繁殖典型菌落呈油煎蛋样,5,可在鸡胚的卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长，有些菌株可致鸡胚死亡。也能在细胞培养中生长，不一定引起细胞病变，但可妨碍病毒的细胞培养。,液体培养基中，生长数量少，不易见浑浊，仅有小颗粒沉于管底。,6,三、与细菌L型的区别,支原体L型遗传上与细菌无关与原菌有关，常可以回复需甾醇一般不需甾醇在一般培养基中稳定大多需要高渗培养生长慢，菌落小菌落稍大0.1-0.3mm0.5-1.0mm菌落中心深埋于培养基中菌落生长于基质表面，不易刮除，光亮、透明易于刮除，较暗、不透明液体培养混浊度低有一定混浊度对洋地黄皂苷敏感不敏感,7,四、生理生化特性,根据对糖类分解利用能力不同，分为两群：一群能分解葡萄糖及其他多种糖类产酸不产气，称发酵型。另一群不分解糖，称非发酵型，但能利用精氨酸作为碳源和能量来源。,8,常用的生理生化实验：,葡萄糖发酵和精氨酸水解试验尿素水解试验(区分脲原体与其它支原体)洋地黄苷敏感性试验,9,五、抗原及分型,支原体的抗原由细胞膜上的蛋白质和类脂组成。可用相应抗血清做生长抑制试验、代谢抑制试验、免疫荧光试验及ELISA等进行鉴定和分型。,抵抗力较一般细菌弱，对理化因素敏感,10,病原性支原体常常定居于多种动物呼吸道、泌尿生殖道、消化道粘膜表面及乳腺、眼等，引起牛传染性胸膜肺炎、猪喘气病、禽败血霉形体感染等，传播途径主要是呼吸道。单独感染时，常常症状轻微或无临床表现，当细菌或病毒等继发感染或受外界不利因素作用引起疾病。特点是潜伏期长，慢性及地方性流行。主要毒力因子：胞黏素，与黏膜呼吸道上皮细胞的纤毛有关，粘附导致纤毛损害并脱落从而使肺易发继发感染。,六、致病性,11,七、诊断直接镜检：形态多样，意义不大。分离培养：过滤除菌病料，进行细菌L型鉴定及2-3次克隆、纯化（0.45m过滤）。生理生化反应：洋地黄苷、尿酶及葡萄糖、精氨酸分解试验。缩小选用抗血清的范围，种的鉴定必须用血清学方法最后确定，这与细菌鉴定到种只需作生理生化测定不同。血清学检查：生长抑制试验、代谢抑制试验等,12,第2节猪肺炎支原体,猪地方流行性肺炎（猪喘气病）的病原。形态多样，大小不等，以环形为主。兼性厌氧，营养要求高，菌落不呈“荷包蛋状”以哺乳仔猪和幼猪最为易感，表现为咳嗽和气喘，发病率高，死亡率低。存在于病猪肺的细支气管和支气管上皮细胞表面和纤毛，经呼吸道传播，通常由病猪传给低日龄易感猪，也可经风力传播数公里之遥。,13,鸡毒支原体,主要感染鸡和火鸡，引起慢性呼吸道病（ChronicRespiratoryDisease，CRD）。病原体存在于病鸡和带菌鸡的呼吸道、卵巢、输卵管和精液中，可通过垂直传递或交配将病传遍整个鸡群，鸡群一旦染病难以彻底根除。在其它病原微生物继发感染时加重病情。,14,嗜血支原体,寄生于红细胞表面，大多球状。对青霉素及同类药物有抗性，体外不能培养。感染多无临床症状，在隐性感染的动物体内可存在数年之久。嗜血支原体具有黏附素，菌体的黏附致使红细胞凹陷进而破坏细胞骨架，增加其脆性。嗜血支原体感染的主要特点是引致贫血，本质是自身免疫病。,15,立克次体（Rickettsia）,立克次体是一类介于病毒与细菌之间的原核细胞型微生物，专性细胞内寄生。在形态结构和繁殖方式等特性上与细菌相似，而在生长要求上又酷似病毒。此类微生物引起人和动物立克次体病（如Q热、斑疹伤寒、恙虫病等）。可经气溶胶传染，是潜在的生物武器。为纪念HowardTaylorRicketts而命名。,16,一、生物学特性1.多形性，主要是球杆状。2.大小介于细菌和病毒之间，多数不能通过细菌滤器。3.革兰氏阴性，有细胞壁4.专性细胞内寄生5.以二分裂方式繁殖6.酶系统不完整，依赖宿主细胞提供ATP、辅酶I和辅酶A等才能生长,17,18,7.对理化因素抵抗力不强，尤对热敏感，对某些广谱抗生素敏感，但对磺胺药不敏感，反而能促进其生长。8.致人畜疾病的立克次体多寄生于网状内皮系统、血管内皮细胞或红细胞，寄生于虱、蚤、蜱、螨等节肢动物中，通过叮咬感染人和动物。,19,二、致病性,立克次体主要寄生于节肢动物的肠壁上皮细胞中或进入它们的唾液腺或生殖道内。人畜主要经这些动物的叮咬而感染。侵入皮肤的立克次体先在局部淋巴组织或小血管内皮细胞中生长繁殖，引起内皮细胞肿胀、增生、坏死；微循环发生障碍以及形成血栓；红细胞渗出血管周围组织，引起特征性皮疹。若菌体经血流在全身各器官的小血管内皮细胞中大量增殖后再释入血流会引起第二次菌血症，使各血管形成血栓、坏死等。,20,主要病原性立克次体,种类传染源媒介昆虫主要临床表现免疫力普氏立克次体人人体虱发热、头痛、皮疹持久（流行性斑疹伤寒）神经系统、心血管系统损伤斑疹伤寒立克次体鼠鼠蚤发热、头痛、皮疹持久（地方性斑疹伤寒）鼠虱恙虫病东方体鼠恙螨局部黑色焦痂持久（恙虫热）发热、头痛、皮疹内脏损害贝纳柯克斯体家畜蜱发热、头痛一定程度（动物间）心内膜炎,21,普氏立克次体（R.prowazekii),人虱人人人虱流行性斑疹伤寒传播方式,22,柯克斯体（Coxiella）,此属仅有成员贝氏柯克斯体，惯称Q热立克次体，引致Q热。专性寄生，耐热、嗜酸，具有滤过性，通过气溶胶即可传染人类。,形态：多为短杆状，常成队排列，无鞭毛，无荚膜，可形成芽孢。,培养特性：不能在人工培养基上生长，通常用鸡胚或细胞培养。鸡胚为卵黄囊接种。,23,抗原相的变异：一种宿主依赖性的变异现象，实质是菌体脂多糖（LPS）的抗原性变异。I相菌株具高度感染性，表面复杂碳水化合物阻断了抗体与菌株表面蛋白的结合。I相菌株经鸡胚或细胞培养可变为II相菌株，其表面蛋白暴露可被抗体结合，毒力减弱。,24,致病性：人畜共患，主要引起人类Q热，表现为发热、头疼、肌痛等。吸入感染是最主要途径，也可经接触污染物及吮食乳汁而感染。其感染靶细胞为单核细胞和巨噬细胞，肝脏巨噬细胞吞噬后将其带入血循环而后定位于雌性动物生殖系统和乳腺，目前对其发病机理缺乏了解。,25,微生物诊断1.分离培养采胎盘、子宫分泌物、乳汁及其他排泄物，病料接种易感动物腹腔,分离毒株作鸡胚或细胞培养,结合血清学试验2.血清学试验采集急性期及康复期的动物血清，用已知Ag作凝集试验、补体结合试验、ELISA等。,26,衣原体（Chlamydia）,衣原体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物，具有滤过性。介于立克次体和病毒之间，可引起人和家畜的衣原体病。,27,一、生物学特点革兰氏阴性，圆形或椭圆形含DNA和RNA两种核酸细胞壁具有胞质膜及外膜，但无肽聚糖。细胞内寄生（鸡胚或细胞培养、动物接种）5.须利用宿主细胞的三磷酸盐和中间代谢产物作为能量来源。6独特的发育周期，并以二分裂方式繁殖7对某些抗生素敏感,28,独特的发育周期：两种颗粒结构元体（EB）：小而致密，成熟型，有细胞壁高度易感性；2.网状体（RB）：大而疏松，繁殖型，无细胞壁，不具感染性。,29,衣原体的发育周期,30,包涵体（inclusion)：是衣原体在细胞空泡内繁殖过程中所形成的集团形态，内含无数子代元体和正在分裂的网状体。,31,二、分类衣原体属亲衣原体属较重要的衣原体有以下4种：沙眼衣原体：人的沙眼肺炎亲衣原体：人的急性呼吸道疾病鹦鹉热亲衣原体：畜禽肺炎、关节炎、流产，也可引起人的肺炎牛羊亲衣原体：牛羊关节炎、脑脊髓炎、腹泻,32,三、致病性,衣原体引致多种动物和人的多种炎症，并可影响生殖系统。致病机理复杂，涉及黏附、细胞内生长及持续感染及散播等过程，而且与宿主免疫系统相互作用。它会分泌一种外膜蛋白糖脂外抗原使相邻细胞变得易感。,33,四、诊断分离培养(1)人工培养基不生长，接种鸡胚或鸭胚卵黄囊。(2)在感染细胞胞浆内可观察到各发育阶段（包涵体）血清学试验用已知Ag检测未知Ab,采用补体结合试验、琼扩、ELISA等,