病原微生物采集运输要求.ppt

病原微生物采集与运送,主要内容1、病原微生物的分类2、病原微生物的采集3、病原微生物的运送4、高致病性病原微生物的运输要求,1、病原微生物的分类,病原微生物：是指能够使人或者动物致病的微生物。,1.1、病原微生物的分类,我国在病原微生物实验室生物安全管理条例中按危害程度，将病原微生物分为四类：第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不够成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。第一类、第二类病原微生物统称为高致病病原微生物。,人间传染的病原微生物名录介绍,为了规范人间传染的病原微生物的实验室操作，确保实验室安全卫生部制订了人间传染的病原微生物名录（以下简称名录），名录已于2019年1月11日下发。编写依据：中华人民共和国传染病防治法病原微生物实验室生物安全管理条例（2019.11.12)中华人民共和国国家标准（GB19489-2019）实验室生物安全通用要求危险品航空安全运输技术细则VS联合国编号(UN2814和UN3373),1.2、应城市疾控中心病原微生物检验项目类别,三类病原微生物：致泻性大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌等6种（实验活动：食品、环境、可疑样品病原菌检测）。甲肝病毒、乙肝病毒、麻疹病毒、风疹病毒（实验活动：免疫人群抗体水平检测）流行性感冒病毒（非H2N2亚型）（实验活动：样本采集与送检）,二类病原微生物结核杆菌（实验活动：可疑人群痰检及结核菌培养）霍乱弧毒（实验活动：疫源地、外环境及可疑人群病原检测）HIV病毒（实验活动：可疑人群血清HIV抗体初筛）乙脑病毒、脊灰病毒、狂犬病毒（实验活动：免疫人群抗体水平检测及相关流行病学调查）口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、SARS冠状病毒（实验活动：样本采集与送检及相关流行病学调查）,2、病原微生物采集,标本采集的部位、时间、质量是决定检测结果第一条件采集标本时：早、快、近（病变部位）、多、净,样本采集注意事项,1.生物安全防护水平设备（个人防护用品、防护材料、器材和防护设施）2人员:掌握专业知识和操作技能3.措施:有效防止病原微生物扩散和感染4.保证样本质量:技术方法、手段5.详细记录：来源、采集过程和方法等,采样的规范性-获得可靠实验室检测结果,方法：正确时间：合理数量：足够品种：多个（同一病人、环境）保存：妥善（不同样品、不同条件）运输：安全,采集的复杂性,同一个病人采集多种标本血液/血清鼻咽拭子粪便/肛拭子脑脊液组织一起疫情多次采样(回顾性的、新发病人、恢复期病人)环境标本水体、食物、动物、媒介,样本采集注意点,生物安全：个人防护容器可靠:无菌、耐压、防渗漏防止交叉污染：采样中、物品使用记录与编号：及时、准确,温度对病毒的影响,病毒对热不稳定5560数分钟，病毒的衣壳蛋白质就发生变性，使病毒失去感染力。离体以后，甚至体温也会使一些病毒丧失活性。4几天(冻干，长期）-70几个月几年-196长期病毒必须低温储藏。,短期保存运输,保持低温避免反复冻融到实验室前424hr-70days,离子环境和PH,所有的病毒都应放在等渗和生理PH环境中，对离子环境和PH的允许界限相当宽，但不同的病毒有差异。,辐射,用电离辐射(X线、丙种射线、非电离辐射如紫外线)能对病毒灭活。几乎所有的电离辐射都引起多核苷酸链致命的毁坏，双股核苷酸链的某一个部分断列都能使病毒致死。紫外线:DNA的损害是使核苷酸相邻的嘧啶硷基二聚物RNA病毒形成尿嘧啶二聚物所致死。,禽流感标本采集,下呼吸道标本灌洗液、痰上呼吸道标本鼻咽拭子、抽取液血清双份(溶血）其他消化道/尸检标本,SARS标本采集,呼吸道标本鼻咽拭子血标本全血，血清（双份)消化道标本粪便其他尿液/尸检标本,手足口病,疱疹液脑脊液血清咽拭子粪便,AFP(急性迟缓性麻痹）,双份粪便（48hr内采集）质量：5g病人年龄15岁带冰运输资料：送检单，个案表，,3、病原微生物运输的要求,运输实施,陆路运输水路运输民用航空运输：申请单位应当凭省级以上卫生行政部门或中国疾病预防控制中心核发的可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书到民航等相关部门办理手续。,分类,名录中第三类病原微生物运输包装分类为类的病原微生物菌（毒）种或样本。名录中第四类病原微生物。,包装的要求,基本要求要有三层包装：1、主容器：采样管内装标本，材质为无菌塑料管、螺口、密封性能完好。其外包裹有的吸收材料。2、辅助容器：要求要防水、防泄漏。（专用塑料袋）3、外包装：样本运送箱,其他,送检单要随身携带，不要跟样品放在一起。样本保存温度的要求。（常温、低温）。,运送要求,按国家运输规定中应由两名专业的技术人员运送。,4、高致病性病原微生物的运输要求,卫生部第45号令可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定2019年2月1日起施行,高致病性病原微生物样本分类,国际民航组织危险物品航空安全运输技术细则分类包装要求，将相关病原和样本分为A、B两类。联合国编号分别为UN2814（UN2900动物）和UN3373。,A类感染性物质,一类在运输中，一旦有暴露发生，即能够在所有人类和动物中引起永久性残疾、导致威胁生命或致命疾病的传染性物质。达到该标准的能引起人体疾病或引起人与动物疾病的感染性物质的联合国编号为UN2814，而只能引起动物疾病的该类感染性物质则为UN2900。,B类感染性物质,没有达到归属为A类标准的感染性物质。B类感染性物质的编号为UN3373。生物制品，B类”（Biologicalsubstance,CategoryB）,包装要求,运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的容器或包装材料应当达到国际民航组织危险物品航空安全运输技术细则（Doc9284包装说明PI602）规定的A类包装标准，符合防水、防破损、防外泄、耐高温、耐高压的要求，并应当印有卫生部规定的生物危险标签、标识、运输登记表、警告用语和提示用语。,基本三层包装系统,可以应用于所有的感染性物质:主容器。初级容器防水、防渗漏，内装标本。其外包裹有的吸收材料。次级包装。次级包装为第二层持久的、防水、防渗漏的包装，它封闭和保护初级容器。多个包有缓冲材料的初级容器可放于同一个次级包装中，但是，这要求同时也放入足够的吸收材料以确保一旦发生泄漏后所有液体都可被吸收。外层包装。次级包装包裹有合适的缓冲材料后，即可被装入外层运输包装。外层运输包装保护其内容物免受外界影响，如运输过程中的物理损坏。最小的外部总尺寸应为10 x10cm。,主容器包装要求,病原微生物菌（毒）种或者样本应正确盛放在主容器内，主容器要求无菌、不透水、防泄漏。主容器可以采用金属或塑料等材料，必须采用可靠的防漏封口。主容器外面要包裹有足够的样本吸收材料，一旦有泄漏可以将所有样本完全吸收。主容器的表面贴上标签，标明标本类别、编号、名称、样本量等信息。,辅助容器,辅助容器是在主容器之外的结实、防水和防泄漏的第二层容器，它的作用是包装及保护主容器。多个主容器装入一个辅助容器时，必须将它们分别包裹，防止彼此接触，并在多个主容器外面衬以足够的吸收材料。相关文件（例如样品数量表格、危险性申明、信件、样品鉴定资料、发送者和接收者信息）应该放入一个防水的袋中，并贴在辅助容器的外面。辅助容器必须用适当的衬垫材料固定在外包装内，在运输过程中使其免受外界影响，如破损、浸水等。,冷冻剂的使用,在使用冰、干冰或其他冷冻剂进行冷藏运输时，冷冻剂必须放在辅助容器和外包装之间，内部要有支撑物固定，当冰或干冰消耗以后，仍可以把辅助容器固定在原位置上。如使用冰，外包装必须不透水。如果使用干冰，外包装必须能够排放二氧化碳气体，防止压力增加造成容器破裂。在使用冷冻剂的温度下，主容器和辅助容器必须能保持良好性能，在冷冻剂消耗完以后，仍能承受运输中的温度和压力。当使用液氮对样品进行冷藏时，必须保证主容器和辅助容器能适应极低的温度。此外，还必须符合其他有关液氮的运输要求。主容器和辅助容器须在使用制冷剂的温度下，以及在失去制冷后可能出现的温度和压力下保持完好无损。主容器和辅助容器必须在无泄漏的情况下能够承受95kPa的内压，并能保证在40到55的温度范围内不被损坏。,A类感染性物质的包装与标签,B类感染性物质的包装与标签,外包装标示提供了所包装内容物的信息，危险的性质和应用的包装标准。包装或第二层包装的所有标示都应清楚可见并且没有被其他标签或标示所覆盖。每一个包裹都应在其外包装或第二层包装上显示如下信息：寄件人的姓名和地址责任人的电话号码和出货信息收货人的姓名和地址联合国编号紧跟恰当的货物名称（UN2814“感染人类的传染性物质”或者UN2900“影响动物的传染性物质”）。专业名称不允许出现在外包装上。储藏温度（选择）当使用干冰或液氮时：制冷剂的专业名称，正确的联联合国编号和净重,标示,标签名称：感染性物质最小尺寸：100100mm（最小包装5050mm）每一包装的标签数：1颜色：黑色和白色“感染性物质”字样应该标明。在一些国家还要求印有“一旦循坏和泄露，立即通知公共卫生机构”的语句,有两种类型的标签：45角放置的方形（菱形）危险性标签，绝大多数的各类危险性货物都要求有此标签；具有多种形状的管理标签，一些危险性货物要求有单独或附加于危险性标签的该类标签。专门的危险性标签应贴于每一运输的危险性货物的外表面（除特殊的例外）。,标签,高致病性病原微生物运输登记表,标记航空：发货人姓名，地址和电话号码收件人姓名，地址和电话号码航空：正确的运送名称（生物制品，B类”）,最小尺寸：方框边线的宽度至少应为2mm，字母和数字至少为6mm高。航空运输时方框每边至少长为50mm。颜色：未特别指定，标记于外包装上最外层，并与底色明显不同，清晰可读即可。水陆运输（公路、铁路和海路）：无需其他标记航空运输：帖明标记，生物制品，B类”,申请单位,从事疾病预防控制、医疗、教学、科研、菌（毒）种保藏以及生物制品生产的单位，因工作需要，可以申请运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本。,申请在省、自治区、直辖市行政区域内运输,申请在省、自治区、直辖市行政区域内运输的，由省、自治区、直辖市卫生行政部门审批。省级卫生行政部门应当在5个工作日内做出是否批准的决定；符合法定条件的，颁发可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书;不符合法定条件的，应当出具不予批准的决定并说明理由。,申请跨省、自治区、直辖市运输,申请跨省、自治区、直辖市运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的，应当将申请材料提交运输出发地省级卫生行政部门进行初审；对符合要求的，省级卫生行政部门应当在3个工作日内出具初审意见，并将初审意见和申报材料上报卫生部审批。,卫生部应当自收到申报材料后3个工作日内做出是否批准的决定。符合法定条件的，颁发可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书；不符合法定条件的，应当出具不予批准的决定并说明理由。对于为控制传染病暴发、流行或者突发公共卫生事件应急处理的运输申请，省级卫生行政部门与卫生部之间可以通过传真的方式进行上报和审批；需要提交有关材料原件的，应当于事后尽快补齐。,运输申请,申请单位在运输前应当向省级卫生行政部门提出申请，并提交以下申请材料（原件一份，复印件三份）,申请材料,可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输申请表；法人资格证明材料（复印件）；接收高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的单位(以下简称接收单位)同意接收的证明文件；第七条第（二）、（三）项所要求的证明文件（复印件）；容器或包装材料的批准文号、合格证书（复印件）或者高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输容器或包装材料承诺书；其它有关资料。,接收单位应具备的条件,具有法人资格；具备从事高致病性病原微生物实验活动资格的实验室；取得有关政府主管部门核发的从事高致病性病原微生物实验活动、菌（毒）种或样本保藏、生物制品生产等的批准文件。,专人护送,运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本，应当有专人护送，护送人员不得少于两人。申请单位应当对护送人员进行相关的生物安全知识培训。在护送过程中采取相应的防护措施。,运输后续工作,规定第十六条在运输结束后，申请单位应当将运输情况向原批准部门书面报告。,运输审批流程,附:应城市疾病预防控制中心手足口病样本采集运送要求,一、手足口病相关资料手足口病(Handfootmouthdisease,HFMD)是由肠道病毒引起的传染病，多发生于5岁以下的婴幼儿，可引起发热和手、足、口腔等部位的皮疹、溃疡，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。引发手足口病的肠道病毒有20多种，其中柯萨奇病毒(CoxAsckievirus)A16型(CoxA16)和肠道病毒71型（Enterovirus71.EV71）最常见。从有关资料表明，HFMD的病原体经历了较大的变迁。对药物具有抗性，75酒精，5来苏对肠道病毒没有作用，对乙醚，去氯胆酸盐等不敏感。但对紫外线及干燥敏感，各种氧化剂(高锰酸钾、漂白粉等)、甲醛、碘酒都能灭活。病毒在50可被迅速灭活，但1mol浓度二价阳离子环境可提高病毒对热灭活的抵抗力，病毒在4可存活1年，在-20可长期保存，在外环境中病毒可长期存活。,二、标本采集对象,标本采集对象是暴发疫情出现时手足口病的临床诊断病例和病例发病所在社区（村）的临近无病例的社区（村）或托幼机构的5岁以下的儿童（作为健康对照人群）。用于病毒分离的标本包括粪便、咽拭子和疱疹液，如果患者出现神经系统症状，可以采集脑脊液标本。对于血清学诊断，需要在急性期和恢复期采集双份血清标本。临床标本在运输和贮存过程中要避免反复冻融，如果不能确保-20的条件，应该在08运输和保存。标本应冷冻运输，运输时要附有必要的信息，如标本编号、发病日期和标本采集日期。,三、标本种类及采集、运送,（一）粪便标本采集病人发病7日内的粪便标本，用于病原检测。粪便标本采集量58g/份，采集后立即放入无菌采便管内，4暂存立即(12h内)送达实验室，20以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于70冰箱。（二）咽拭子标本采集病人发病3日内的咽拭子标本，用于病原检测。用专用采样棉签，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将棉签放入装有35ml保存液（维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，以防干燥。4暂存立即（12h内）送达实验室，20以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于70冰箱。,（三）血清标本采集急性期（发病03d）和恢复期（发病1430d）双份配对血清用于抗体检测。静脉采集35ml全血，置于真空无菌采血管中，自凝后，分离血清，将血清置于20以下冰箱中冷冻保存。（四）疱疹液在手足口病的实验室诊断中，从疱疹液中分离到病毒具有很高的诊断价值，可