甲型肝炎减毒活疫苗再免疫的研究

1 / 8 甲型肝炎减毒活疫苗再免疫的研究 刘翌 1 徐志一 1 欧阳佩英 1 赵守军 1 吴婉贞 2 【摘要】 目的 对甲型肝炎减毒活疫苗加强免疫的可能性进行研究。方法 分别设置再免疫组、初免疫组和自然感染组。用 Abbott EIA 改良法定性和定量检测血清中的甲型肝炎抗体。 结果 再免疫后甲型肝炎抗体阳性率和几何平均滴度在 2周内升高，与初免疫组抗体阳性率和几何平均滴度缓慢上升至 3 个月以后达到高峰形成对比。再免疫组和自然感染组对活疫苗免疫反应存在区别，这在研究疫苗免疫持久性时应予考虑。再免疫组初免成功抗体又转阴者， 再免疫后抗体阳性率83.3%(10/12)，显著高于初免疫失败者再免疫后的阳性率50%(17/34)，两者又均高于初免疫者 (29.6%)。结论 再免疫可引起免疫回忆反应，且初免疫成功率直接影响到再免疫的效果。 Abbott EIA 改良法检测血清中甲型肝炎抗体仍低估了原发性免疫反应，需用更为灵敏特异的方法检测疫苗抗体。 【关键词】 病毒性肝炎疫苗 肝炎，甲型 接种 Studies on Re-immunization with Live Attenuated Hepatitis A Vaccine Liu Yi, Xu Zhiyi, Ouyang 2 / 8 Pei-ying, et al. Department of Epidemiology, Shanghai Medical University, Shanghai 200032 【 Abstract】 Objective The possibility of re-immunization with a booster dose of live attenuated hepatitis A (HA) vaccine was studied. Methods Children randomly sampled were divided into three groups with re-immunization, primary immunization and immunity via natural infection. Antibodies against heaptitis A virus (anti-HAV) were detected qualitatively and quantitatively with modified Abbott enzyme immunoassay (EIA). Results Proportion of children with positive anti-HAV and its mean geometric titer (GMT) increased within two weeks after re-immunization, and as compared, those increased slowly and GMT reached the peak three months after primary immunization. Response to the live attenuated vaccine differed between the groups of re-immunization and immunity via natural infection, and should be taken into consideration in studying immune persistence of the vaccine. Proportion of children, who converted negative of their anti-HAV after primary immunization, with positive anti-HAV after re-immunization was 83.3% 3 / 8 (10/12), significantly higher than that in those who failed in primary immunization and then were vaccinated again (50%, with 17/34), and that in both of them were higher than in primary immunization (29.6%). Conclusion Reminiscence could be induced by re-immunization, and the effects of it depended on primary immunization. Detection of anti-HAV with modified Abbott EIA still underestimated primary immune reaction. A more sensitive and specific method for detecting anti-HAV after vaccination should be used. 【 Key words】 Viral hepatitis vaccines Hepatitis A Vaccination 甲型肝炎减毒活疫苗安全性良好，既往所用疫苗滴度偏低，估计在 105.5TCID50 左右，抗体阳转率和保护效果不理想。国内数以千万计的儿童 接种了低滴度疫苗，如果活疫苗再次免疫，能引起免疫反应，将不失为一种有效的补救措施。 材料与方法 1.疫苗：卫生部昆明医学生物学研究所生产的甲型肝炎 (甲肝 )减毒活疫苗 (H2 株 )。两批疫苗滴度均为105.5TCID50 左右，每剂 1 ml，皮下注射。 4 / 8 2.对象：在苏州地区随机选取两年前已接种过 1剂疫苗者 54 人，再接种 1 剂疫苗为再次免疫组 (再免组 )。将两年前为对照组的 71人，经筛检甲肝抗体仍为阴性者，接种 1剂疫苗作为初次免疫组 (初免组 )。初筛甲肝抗体阳性、本次试验仍为阳性者 20人，作为自然感染组，也 接种 1 剂疫苗，观察自然感染组对活疫苗的免疫反应。对试验者采血检测抗-HAV总抗体和抗 -HAV IgM。再免组于第一针免疫后 3 个月采血， 24个月后加强免疫，再免后半个月和 3个月时再分别采血。初免组和自然感染组采血时间均为免前及免后半个月和3 个月。 3.实验室检测：用 Abbott 试剂酶标改良法检测血清中抗 -HAV抗体，每份血清加样量由 10 l 增至 40 l 。同时设置甲肝标准品 (购自 WHO 指定的荷兰红十字会国际标准中心 )，定量推算甲肝抗体水平，计算抗体几何平均滴度(GMT)。采用浙江医学科学院生产试剂检测抗 -HAV IgM。 结果 1.再免反应性：再免后甲肝抗体阳性率和 GMT 在 2周内跳高，这与初免后抗体阳性率和 GMT缓慢上升至 3 个月以后达高峰形成对比 (表 1， 2)。表 2 中抗体 GMT计算包括随访到的所有样本。自然感染组接种疫苗后抗体 GMT略有波动，经方差分析未见差异 (表 2)，未见 2 倍以上升高者，因而认为疫苗免疫和自然感染免疫对活疫苗免疫反应存在区别。 5 / 8 表 1 再免组和初免组抗 -HAV阳性率比较 免疫后采血 时间 再免组 初免组 第一针 第二针 人数 阳性 数 (%) 人数 阳性数 (%) 人数 阳性数 (%) 2 周 53 31(58.5) 69 5(7.2) 3 个月 54 16(29.6) 54 35(64.8) 71 21(29.6) 24个月 54 8(14.8) 表 2 再免组、初免组和自然感染组抗 -HAV 水平比较 (GMT， mIU/ml) 免疫后采血 时间 再免组第二针 初免组 自然感染组 人数 GMT 人数 GMT 人数 GMT 免前 54 14.3 71 0 20 15 206.5 2 周 53 77.7 69 12.0 18 17 298.2 3 个月 54 81.2 71 21.3 20 11 776.1 将甲肝抗体阴性样本的抗体水平定为 10 mIU/ml，检测方法灵敏度为 20 40 mIU/ml 6 / 8 根据再免组少数研究对象复种后抗体水平变化推测这部分人发生了原发性免疫反应。如再免组有 3 人复种后 3个月抗体才阳转，抗体 GMT仅为 132.7 mIU/ml，推测为原发性免疫反应。初免组免后 2周阳转人数 5 人，抗体 GMT 113.0 mIU/ml，免后 3个月又有 16人抗体阳转，共计 21人抗 体阳转，抗体 GMT为 128.5 mIU/ml。说明初免后抗体水平呈缓慢上升趋势，高峰大多发生在初免 3 个月以后。这符合原发性免疫反应抗体水平变化规律。 2.再免组和初免组抗 -HAV阳性率比较：再免组初免成功 (即抗 -HAV阳转 )后又转阴者，再免疫后 3个月抗体阳转率83.3%(10/12)，显著高于初免组免后 3 个月阳转率29.6%(21/71， Fisher精确检验法： P=0.000 65)。说明初免成功又转阴者，即使用低滴度疫苗再免，仍有抗体反应。 再免组初免失败 (即抗 -HAV 未阳转 )者，再免后 3个月阳转率 50%(17/34)，显著高于初免组的 29.6%(2=4.15 ， P 再免组既往初免 3个月阳转率与本次初免组免后 3个月阳转率均为 29.6%。说明两批疫苗免疫原性相近，用于对比初免与再免抗体效应，不致引起偏差。 再免组再免后 2 周阳性率 (58.5%)主要是首次免疫反应后的回忆反应所致。再者，初免抗体阴性者，再免后抗体阳转率 (50%)高于初免者 (29.6%)，故而推测当时的免疫水平7 / 8 未被现有检测试剂测出。由此可以解释何以在一次现场试验中，疫苗免疫的抗体阳转率为 41%，保护率却达 70% 1。所 以提高甲肝抗体检测试剂灵敏度，可更准确地估计疫苗的免疫学效果。 本结果表明，与其他活疫苗不同，甲肝活疫苗加强免疫，有良好的效果。再免后的免疫回忆反应似主要由抗原作用所致，因为抗体在再免后 2周内达到高峰，而病毒充分繁殖需要更长时间，而且再免后 3个月的抗体反应也未见显著增高。 活疫苗免疫后抗体水平远低于自然感染，估计疫苗免疫效果不能维持终身。儿童接种了低滴度疫苗，加强免疫是必要的，但加强免疫时间间隔还需进一步研究。 活疫苗免疫和自然感染免疫对活疫苗免疫反应的区别，可能是由于自然感染产生的 高水平甲肝抗体中和了进入机体的活病毒，而疫苗免疫抗体未能完全中和活病毒，进而激发了机体免疫回忆反应。这在研究疫苗免疫持久性时应予考虑。 初免成功抗体又阴转者再免后抗体阳转率高于再免组初免抗体未阳转者，两者阳转率又均高于初免者，说明初免成功率直接影响到加强免疫效果。 本次再免后有 19人 (35.2%)抗体阴性，效果仍很不理8 / 8 想。提高疫苗滴度，可望提高初免成功率，以及再免有效性，从而大大降