免疫学应用医学PPT课件.ppt

免疫学应用,1,本课要解决的一些问题,体外Ag-Ab反应原理是什么？ Ag-Ab反应有什么特点？ 现代医学免疫学检验应用有哪些？ 人工主动免疫与被动免疫的意义 现代医学免疫治疗方法,2,2018,免疫学应用,免疫诊断 抗原、抗体诊断技术 细胞诊断技术 免疫预防 人工主动免疫 人工被动免疫 免疫治疗 免疫调节增强、抑制 免疫治疗,3,2018,免疫诊断,抗原、抗体诊断技术 抗原和相应的抗体之间可以发生特异性结合，这种反应还能在体外进行（试管内或玻片上）。呈现出凝集、沉淀等可见的反应现象。 抗原抗体的结合具有特异性，可以用已知抗体检测未知抗原，也可以用已知抗原检测未知抗体，来达到实验诊断或研究的目的。 抗体主要存在于血清中，试验时一般都需要血清做试验材料，所以传统上将体外的抗原抗体反应又称为血清学反应。,4,2018,抗原、抗体诊断技术,体外抗原抗体诊断技术,血清学试验,凝集反应：直接、间接（正向、反向、抑制）、协同,沉淀反应：液相（比浊技术）、凝胶（扩散、电泳）,补体参与的反应：溶血试验、补体结合试验,中和反应：病毒NT、毒素NT,标记技术,酶免疫分析：ELISA,荧光免疫分析：荧光抗体染色技术、荧光免疫测定,放射免疫分析：放射免疫、免疫放射,金免疫分析：斑点金免疫层析试验、斑点金免疫渗滤试验,化学发光免疫分析：发光酶、化学发光、电化学发光,其他：免疫印迹技术等,5,2018,酶免疫分析,6,2018,免疫比浊,7,2018,化学发光免疫分析,8,2018,流式细胞术,9,2018,抗原抗体反应原理,Ag决定簇和Ab分子超变区相互作用(相互吻合,具有互补性)，分子表面特异的可逆的弱结合力在极短距离内才能发生。 两个阶段： 特异性结合阶段，这种结合是基于两种分子间的结构互补性和亲和性；快、几秒到几分。 可见反应阶段：抗原抗体复合物在环境因素（电解质、温度、PH等）影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀等肉眼可见反应；慢、数分钟到数小时。 物质基础： 抗原表位与抗体高变区间的互补结合 抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合 抗原抗体之间的结合力 亲水胶体转化为疏水胶体,10,2018,抗原抗体反应特点,特异性： 抗原与抗体结合反应的专一性 分子基础是抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性,11,2018,抗原抗体反应特点,两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应,抗原抗体交叉反应示意图,交叉反应（cross reactions）,12,2018,抗原抗体反应特点,前带(prezone)：抗体过量 后带(postzone)：抗原过量 等价带(equivalence zone)：抗原抗体比例合适,抗原抗体反应比例性示意图,比例性（可见性）：抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系,13,2018,抗原抗体反应特点,阶段性 第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见 第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、 沉淀和细胞溶解等现象,14,2018,抗原抗体反应特点,可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性 影响因素： 抗体对相应抗原的亲合力亲合力越高，结合越牢固，越不易解离 环境因素对复合物的影响pH、离子强度,15,2018,抗体,混有SPAg,抗体-SPAg,抗体-SPAg,分离剂,一、抗原抗体结合,二、分离抗体,可逆性示意图,抗体,16,2018,抗原抗体反应类型,17,2018,抗原抗体反应类型,18,2018,抗原抗体反应类型,按实际用途分为: 免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique,IHCT) 免疫测定(immunoassay),按检测现象分为: 放射免疫技术 荧光免疫技术 酶免疫技术 化学发光免疫技术 金免疫技术,按测定反应体系的物理状态分为: 均相免疫测定(homogenous immunoassay） 非均相免疫测定(heterogenous immunoassay),标记免疫技术：用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等标记抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，通过检测标记物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析,19,2018,凝集反应,间接凝集反应,载体颗粒：人O型红细胞、绵羊红细胞、乳胶颗粒等,20,2018,凝集反应,反向间接凝集反应,21,2018,凝集反应,间接凝集抑制反应,如：临床上乳胶凝集抑制试验妊娠早期诊断,22,2018,沉淀反应,单向琼脂扩散,(1)抗体混于凝胶中 (2)抗原加入孔内 (3)抗原自由扩散,标准品抗原浓度测定,沉淀环直径,抗原浓度,(4)测定沉淀环直径 (5)在标准曲线上查找相应抗原浓度,23,2018,沉淀反应,双向琼脂扩散,(1)抗原抗体双向自由扩散 (2)24小时出结果 (3)呈现沉淀线或弧,24,2018,免疫酶技术,25,2018,免疫荧光技术,26,2018,金免疫标记技术,27,2018,金免疫标记技术,阳性,弱阳性,阴性,无效,质控线,测试线,尿样,斑点金免疫层析试验检测HCG,28,2018,免疫细胞检测,非特异性免疫细胞检测 中性粒细胞运动、吞噬和杀菌功能检测 巨噬细胞检测 NK细胞检测 特异性免疫细胞检测 T细胞亚群、数量、功能检测 B细胞功能检测,29,2018,免疫预防,人工主动免疫 是给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，刺激机体产生特异性免疫力。 经人工主动免疫产生的免疫力出现较慢，但免疫力较持久，临床上多用于预防。 死疫苗：伤寒、乙脑、百日咳、狂犬病及钩体病等疫苗 活疫苗：活疫苗有卡介苗、麻疹、风疹、脊髓灰质炎等疫苗 类毒素：白百破三联疫苗 新型疫苗：亚单位疫苗:HBsAg、合成疫苗、基因工程疫苗。,30,2018,免疫预防,人工被动免疫 给机体输入抗体等效应物质，直接产生免疫作用 人工被动免疫产生的免疫力出现较快，但免疫力不持久，临床上多用于临时治疗。 抗血清 免疫球蛋白 细胞因子,31,2018,免疫预防,32,2018,免疫预防,33,2018,免疫治疗,利用免疫学原理，针对疾病发病机制，应用制剂人为调整免疫状态，达到到治疗或缓解疾病的目的。 免疫调节 免疫增强：用与肿瘤辅助治疗，抗病毒治疗 免疫抑制：用于