四川儿童患者细菌耐药监测报告.ppt

微生物培养在女性 生殖道感染的诊断价值,四川大学华西第二医院临床检验科 周伟,提 纲,背景介绍,生殖道感染（reproductive tract infection） 指体内微生物平衡失调和通过性接触或医疗操作使病原体（细菌、病毒、衣原体等）由体外进入体内引起的生殖器官的感染。,背景介绍,按感染部位 上生殖道感染：也称盆腔炎，包括子宫内膜炎、输卵管炎、输卵管卵巢囊肿、盆腔结缔组织炎及盆腔腹膜炎等 下生殖道感染：包括外阴炎、阴道炎及宫颈炎。 感染方式 性行为（sexually transmitted disease,STD） 直接接触 医院诊疗措施 血液及母婴 自身内源性感染,背景介绍,临床症状：外阴瘙痒、白带异常、性交不适感、急性尿道炎、腹痛和宫颈红肿压痛等。 在不同的部位可以由同一种病原体引起，或不同病原体混合感染，不同的病原体可以有相同或相似的的临床表现。,背景介绍,常见病原微生物 杜克雷嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、阴道毛滴虫、梅毒螺旋体、沙眼衣原体等一般都是有临床意义 酵母样菌、解脲脲原体、金黄色葡萄球菌、溶血链球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌仅在某些临床条件下致病,背景介绍,常见病原体 许多病原体仅限于特殊部位，部分如下,2015年我院产科生殖道标本分离菌构成比（n=521）,2015年我院生殖道分离酵母样菌构成比（n=489株）,注：白色假丝酵母比例下降，非白色假丝酵母菌（光滑、克柔）增加 克柔假丝酵母菌对氟康唑天然耐药，光滑念珠菌对氟康唑敏感性降低,常见病原微生物及耐药现状,阴道毛滴虫 甲硝唑敏感性大于90%-95% 甲硝唑耐药约5% 美国CDC资料,常见病原微生耐药现状,念珠菌属,黎小东，宋卫忠，李平，等.广州地区妇女外阴阴道念珠菌病的病原分类及其体外药敏分析.国际检验医学杂志，2013,34（17）：2281-2284,常见病原微生耐药现状,Gonococcal Isolate Surveillance Project, 27 sites, United States, 2014,我院产科生殖道分离大肠埃希菌药敏 （n=127,2015年）,注：产ESBLs:31.5%；氨苄西林耐药率80%；头孢曲松耐药率41%；喹诺酮类2038%；四代头孢、头霉素类、酶抑制剂、碳青霉烯类、阿米卡星耐药率低,我院产科生殖道分离粪肠球菌药敏结果 （n=62,2015年）,说明：对头孢类抗生素、氨基糖苷类、克林霉素天然耐药；氨苄西林敏感性性高（90%),我院产科生殖道分离B群链球菌药敏分析 （n=43，2015年）,说明： 青霉素100%敏感；红霉素耐药率85%；喹诺酮类、克林霉素耐药率60%,检测流程,标本采集 标本的选择和采集方法非常重要 常规不鼓励选择阴道标本 厌氧菌培养仅限于特定标本 尽量在抗菌药物使用前进行采样,采集部位大量的正常菌群使结果难以解释,可以进行厌氧培养的标本：来自剖腹产的胎盘、子宫（子宫内膜）、后穹窿穿刺术、输卵管、卵巢、前庭大腺 不能进行厌氧培养的标本：宫颈内膜、阴道、尿道、阴道、恶露、会阴等 怀疑BV时，阴道分泌物涂片或唾液酸酶测定比培养更有效,前庭大腺：直接针吸采集标本；通过指触诊 从舌下腺大管采集腺脓肿的脓液标本 子宫内膜：最好通过吸引刮匙采集。不应该使用无保护的拭子通过子宫颈采集。 盆腔炎：所有标本都通过侵入性操作技术采集：输卵管或卵巢标本外科手术；后穹窿穿刺术采集腹水。 子宫内节育环：将整个装置包括所有渗出液置于无菌容器送检，避免阴道或宫颈定植菌污染。 衣原体感染：宫颈柱状上皮细胞内寄生，通过拭子快速擦拭宫颈内区域采集细胞和分泌物。衣原体不能在阴道鳞状上皮细胞系生长，不会导致阴道炎，不能送检阴道分泌物,外阴损伤部位经刮取、吸引和活检采集的标本，仅对梅毒有诊断价值。如果有梅毒样病变，使用干纱布仔细刮擦病变部位直至出现浆液（避免出血，会干扰暗视野显微镜检查结果解释），将一滴置于干净玻片上，立即观察螺旋性运动。 儿科要求：藻酸钙拭子适合用于采集儿童生殖道标本。生殖道标本通常用于调查潜在的虐待或月经前外阴阴道炎或尿道炎。青春期前的女孩绝大多数性传播疾病与阴道相关而不是子宫颈。,子宫颈或宫颈内标本 避免受到阴道分泌物的污染 去除子宫颈外口粘液 润滑剂可能对淋病奈瑟菌有毒性,正确的储存及运送标本 样本未能及时送达实验室时，必须储存在适当的环境下，以防止病原菌死亡，或因共生菌滋生过多，使得病原菌分离不出来，如淋球菌培养标本需37保温，厌氧培养标本禁止冷藏。 使用标本运送培养基：保持细菌活性。,尿道分泌物检测,适应证：尿道炎、阴道滴虫病、念珠菌性阴道炎（SMIs推荐诊断念珠菌性阴道炎应同时采集阴道、宫颈和尿道拭子常规培养酵母菌）。常表现为急性尿道综合征或尿道膀胱炎 尿道炎病原：常见的包括肠杆菌科细菌和腐生葡萄球菌；不常见病原沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、解脲脲原体、金黄色葡萄球菌、溶血链球菌、产单核李斯特菌、阴道毛滴虫、HSV和腺病毒等。 标本主要采集尿道拭子或首次晨尿或长时（4h以上）间不排尿的首次尿,SMIs：UK Standards for Microbiology Investigation,阴道、宫颈、宫腔分泌物检测,适应证:VVC、BV、滴虫病、宫颈炎、子宫内膜炎、盆腔炎性疾病（PID） 标本类型：阴道分泌物、高位阴道拭子、宫颈拭子、各种抽吸物、胚胎产物,阴道、宫颈、宫腔分泌物检测,病原 阴道正常菌群：乳杆菌属、链球菌属、肠球菌属、CNS等。 厌氧菌如拟杆菌属和厌氧球菌、阴道加德纳、酵母菌、大肠埃希菌样菌（coli-forms）、UU和支原体也属阴道正常菌群，但特定条件下也可引起阴道感染。,阴道、宫颈、宫腔分泌物检测,病原 外阴阴道炎：主要青春期前女性，常见致病菌GAS、SA、白念、NG、HI。不常见病原如沙门菌、志贺菌、饶虫等。 细菌性阴道病（BV）：相关病原包括普雷沃菌、阴道加德纳菌、动弯杆菌属、消化链球菌属和人型支原体等。 B群链球菌: 单核细胞增生李斯特菌：可致孕妇、新生儿和免疫抑制患者严重感染,阴道、宫颈、宫腔分泌物检测,脓毒性流产：可导致严重的孕妇感染甚至生命危险。大多数感染为多种病原，并涉及厌氧菌。梭菌属脓毒症并发流产具有潜在致病性。 化脓性宫颈炎：明确的病原包括CT、HSV、NG。 产后子宫内膜炎：主要为外阴阴道菌群上行进入子宫引起感染 输卵管炎：涉及多种病原，包括CT、NG、Mh、混合细菌，输卵管标本较子宫内膜拭子更好。,阴道、宫颈、宫腔分泌物检测,盆腔炎性疾病（PID）：通常是一种多病原微生物感染性疾病，常见病原包括CT、NG、HIV、厌氧菌、肠杆菌科细菌、化脓性链球菌，其它如CMV、滴虫、肠球菌、放线菌、生殖支原体、Mh、UU（有争议） 宫内节育器（IUCDs）：宫内放置避孕器可能与PID有关。感染可由多种病原引起，分离出放线菌尤其衣氏放线菌可能有临床意义。,B群链球菌检测,B群链球菌（Group B streptococci，GBS） ，又名无乳链球菌（Streptococcus alactiae），具有较强的粘附能力，可定植于人体的阴道、直肠，是人体重要的条件致病菌。,在20世纪70年代，GBS已被证实为围产期母婴感染的主要致病菌之一，在围产医学中占有不可忽视的地位，同时它也是婴幼儿败血症和脑膜炎最常见的原因,B群链球菌筛查,GBS的危害,母体： 产道定植：10-30% 宫内侵入：流产、早产、宫内 发育迟缓、产后相关感染 新生儿： 肺炎： 败血症： 脑膜炎：20-60%神经系统后遗症,死亡率5-20%,50-65%,围产期GBS预防指南 Prevention of Perinatal Group B Streptococcal Disease,为了防止早发性GBS疾病，解决所面临的挑战 ,2010年美国疾病预防控制中心（CDC）制定了围产期GBS预防指南,该指南已经获得以下认可： 美国妇产科学院 美国儿科学会 美国护士助产士协会 美国家庭医生协会 美国微生物学会 美国流行病学会 美国药理学会,对所有孕妇于妊娠3537 周进行GBS筛查，结果阳性者进行预防性治疗； 以下情况，应进行GBS检查和预防性治疗 ： 本次妊娠有GBS 菌尿； 上次新生儿GBS 感染史； 在妊娠37 周之前分娩； 羊膜破裂18小时； 分娩温度超过38.0 C 根据统计,这种方案会对26.7%的分娩者进行预防性治疗, 可以预防86 %的新生儿早发GBS 感染,B群链球菌筛查,早期产道定植干预是控制GBS感染的有效措施,美国CDC:对35-37周孕妇进行GBS常规筛查，阳性者进行抗生素预防治疗。 抗生素：青霉素（一线）、克林霉素,更多信息参见：/groupbstrep/index.html,GBS的取样部位和方法,取样部位：阴道和直肠 阴道下1 / 3 肛门括约肌25cm,GBS感染分娩期抗生素治疗方案,有无青霉素过敏,青霉素G，首次剂量500万单位（静脉注射）然后每4小时250300万单位，直至分娩或者氨苄西林，首次剂量2g（静脉注射），然后每4个小时1g，直到分娩,病人在接受青霉素或头孢菌素时有无出现下列任一症状？ 过敏症、血管性水肿、呼吸窘迫、荨麻疹,头孢唑啉，首次剂量2G，然后每8个小时1g，直到分娩,是否对红霉素和克林霉素敏感,万古霉素每12小时1g（静脉注射）直至分娩,克林霉素每8小时900mg（静脉注射）直至分娩,小结,女性生殖道标本微生物培养主要检测各种临床综合征的病原，包括外阴阴道炎、细菌性阴道病、生殖器溃疡、