地中海贫血产前诊断课件

-地中海贫血症的产前诊断,21班 文俊,（1）地中海贫血,地中海贫血 （-thalassemia，简称地贫）： 是指珠蛋白基因突变或缺失使珠蛋白链的合成受到抑制而引起的溶血性贫血。 珠蛋白基因缺失或点突变均可导致地贫，分别称为缺失型或非缺失型地贫，其中缺失型最常见。,（1）地中海贫血,珠蛋白异常基因型非缺失型,链部分合成，称为 地贫 或 地贫2,链完全不能合成，称为 0 地贫 或 地1,受累珠蛋白基因以 T 表示，如基因型 T 表示2个珠蛋白基因中1个发生了点突变或数量有限的几个碱基缺失。,体细胞中基因缺陷基因型,珠蛋白异常基因型缺失型,完全不能合成链,可合成25% 链,可合成50% 链,可合成75% 链,（1）地中海贫血, Hb Barts 胎儿水肿综合征 基因型：0地贫纯合子0 0（-/-） 发病机制： 由于不能合成链，形成Hb Barts（4） Hb Barts（4）对氧的亲和力很高，在氧分压低的组织中不易释放氧，造成组织缺氧而致胎儿水肿。,临床表现： 多于妊娠3040周死亡或早产，且早产亦常在半小时内死亡。,（1）地中海贫血, HbH 病 基因型： 0地贫和+地贫的双重杂合子0 +（-/-） 发病机制：由于3个基因缺失或缺陷，使链的合成量严重减少，形成HbH(4)。 4对氧的亲和力高，不易释放O2，导致组织缺氧； HbH四聚体不稳定，易降解形成H包涵体，沉淀在红细胞膜上，使红细胞变形性降低，易被破坏，产生慢性溶血性贫血。,临床表现： 轻度或中度贫血，肝脾肿大（约65%），轻度或间歇黄疸； 当继发感染或服用氧化性药物后溶血性贫血症状加重。,轻度到中度贫血，肝脾肿大。,（1）地中海贫血, 轻型（标准型）地中海贫血 基因型： 0地贫杂合子A 0（/-）我国居多 +地贫纯合子+ +（-/-） 患者有2个基因缺失或缺陷。 常为Hb Barts胎儿水肿综合征和HbH病的父母。 临床表现： 能合成一定量珠蛋白链，无明显贫血症状或表现为轻度溶血性贫血。红细胞有轻度形态和渗透性改变。,（1）地中海贫血, 静止型地中海贫血 基因型：+地贫杂合子A +（/-） 患者有1个基因缺失或缺陷。 患者无任何临床症状和异常血象，仅在出生时的脐血中检出1%5%的Hb Barts。 与0地贫杂合子（A 0）结婚时，有1/4可能生出HbH病患儿。,情况综述,王某，女，28岁，教师，其夫钱某，29岁，教师，两人均为广西人，无不良嗜好，自觉身体健康，非近亲婚配。王某姨妈患有HbH病，一直未婚，钱某的家族中未发现疑似病人。王某现怀孕7周，担心胎儿的健康前来咨询。医生建议两人均进行地中海贫血的筛查，经过全血常规筛查、红细胞脆性试验和血红蛋白电泳分析，确诊王某为轻型-地中海贫血，钱某为静止型-地中海贫血。,核型分析,基因诊断证实，王某基因型为0地中海贫血杂合子A0(/-)，钱某基因型为+地贫杂合子A+（/-）,?,a+a0,aAa0,aAa+,a+a0 1/4,aAa0 1/4,aAa+ 1/4,aAaA 1/4,产前诊断,因孕妇已怀孕7周 故选用绒毛吸取术 绒毛吸取术是指在超声引导下行穿刺术，取出胎盘内的绒毛组织进行细胞培养、分子遗传学或生化遗传学检查，进行染色体诊断或基因诊断。分为经腹绒毛活检及经宫颈绒毛活检，是一种成熟的产前诊断方法，成功应用于早孕期诊断胎儿染色体异常及各种遗传性的单基因疾病。,绒毛吸取术其优点为孕早期即可作出诊断，对孕妇造成的损伤和痛苦较小 缺点：制成的染色体形态稍差，有时会出现“假嵌合体” 且引起流产的风险较高,操作步骤,经宫颈绒毛活检： 1.经宫颈绒毛活检时，孕妇适度充盈膀胱，取膀胱截石位; 2.窥阴器暴露宫颈，消毒阴道后，在超声的实时引导下，将绒毛活检针经宫颈置入胎盘内，理想位置是沿胎盘长轴进入，远离胎囊和子宫肌层; 3.将针放置到适当位置后，用含有3-4ml细胞转移液的20ml注射器抽吸。当看到有少许血液进入导管时说明取样可能成功。注射器保持负压状态将活检针内容物转移入细胞培养液中检查所取绒毛量。,经腹绒毛活检： 1.孕妇适度充盈膀胱，取平卧位，手术前行超声检查选择合适的进针点，特别注意进针时不要损伤小肠。 2. 消毒皮肤，覆盖无菌手术孔巾，在超声实时监控下，活检针经孕妇腹部、子宫肌层进入胎盘，尽量延长活检针在胎盘内的走行距离。3.将针放置到适当位置后，用含有3-4ml细胞转移液的20ml注射器抽吸。当看到有少许血液进入导管时说明取样可能成功。注射器保持负压状态将活检针内容物转移入细胞培养液中检查所取绒毛量。,基因检测,第一步： DNA提取 通过绒毛膜细胞获取DNA 第二步： PCR-RFLP 主要步骤 DNA酶切Southern印记杂交分析 DNAPCR 酶切电泳分析,PCR产物片段中包含RFLP切点，则可将扩增产物用相应的限制酶处理，经电泳后检测其多态性，结合系谱分析，进行基因诊断。,PCR-RFLP,结果分析,14KB,18KB,对照组,A1 正常,A2 A+,A3 AO,A4 +O,1.A1条带染色较深，说明两条染色体产生的酶切片段大小一样，是14kb的纯合子，该个体的基因型为 / ，则胎儿正常; 2.A2条带为10kb和14kb的杂合子，基因型为 / -,则胎儿为静止型地贫; 3.A3的一条染色体为14kb，另一条染色体的两个 基因均缺失，基因型为 /-，则胎儿为轻型地贫; 4.A4的一条染色体为10kb，另一条染色体的两个基因均缺失，基因型为-/-，则胎儿为HbH患儿。,诊断建议