久实牌蝙蝠蛾被毛孢在肾移植受者中的临床应用和机制探讨.doc

久实牌蝙蝠蛾被毛孢在肾移植受者中的临床应用和机制探讨青海久实公司突破了青藏高原上难以再生、难以重现、难以复制珍贵稀有可食动植物资源的历史，拥有国家级发明专利技术的自主知识产权中国被毛孢菌粉的生产方法（专利申请 号：200710050273.7）。公司“久实宝”系列产品生产所用菌种，经过国家权威机构中国科学院微生物研究所的检测，鉴定结果为蝙蝠蛾被毛孢为唯一无性型冬虫夏草鉴定号：（2007）微检字第101号，同时被中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的要求该产品菌种列入收藏（保藏中心登记入册 编号GMCCNo.2126）。蝙蝠蛾被毛孢（Coydyceps Sinensis）仅分布于我国青藏高原及其边缘地区海拔3000-6000米的高寒草甸阴湿地区。是寄生于蝙蝠蛾幼虫上的真菌中国被毛孢 （Hirsutella sinensis）。独特的地理、生态、气候环境；独特的生物物种；独特的滋补和药用价值，成为中华医药千年传承的传奇珍品。蝙蝠蛾被毛孢富含四十多种人体必 需的营养成分。虫草多糖、虫草素、虫草酸、D-甘露醇、腺苷、尿苷和SOD（超氧化物歧化酶），四种有机酸：软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸，具有降血脂作 用，对血压进行双向调节。五种维生素：VB1、VB2、VB12、VE、VK补充人体必需的维生素。六种肽类化合物，有效增强人体免疫活性。八种微 量元素：钠、钾、钙、铁、锌、硒、锰、铜，是新陈代谢的物质基础。十八种氨基酸是增强免疫的物质基础。历代医药典籍将蝙蝠蛾被毛孢药性药效归纳为，“性温， 甘，平。归肺、肾经；温而不澡，补而不滞；阴阳并补；补肺益肾，止血化痰。用于久咳虚喘，久涝咯血，肾虚遗精，腰膝酸痛，理诸虚百损”。是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。现代医学从功能上将其归为免疫调节。进一步映证了传统中医 “理诸虚百损” 的功效。蝙蝠蛾被毛孢不但对人体各种脏器的功能具有调节作用，还存在某些直接抗病功能。现代药理药效研究表明蝙蝠蛾被毛孢具有： 1、可迅速增强机体免疫力，双向调节内分泌； 2、改善心血管功能； 3、有降血糖、降血脂的作用； 4、有雄性激素样作用。对性功能低下、减退、淡漠有改善作用； 5、抗肿瘤作用； 6、有抗肾衰、抗肾炎作用； 7、抗疲劳、抗衰老作用； 8、对术后病人有抗炎症、促愈合作用； 9、抗器官移殖后的排异作用； 10、对各种免疫功能失调造成的症状有缓解作用。 冬虫夏草(Cordyceps sinensis)是中国传统的植物药材，能够有效地提高机体的免疫防御功能，调节机体的免疫状态。近年来，在中国作为免疫调节剂而被广泛应用于器官移植术后。我们回顾性研究分析了应用百令胶囊(100发酵冬虫夏草菌丝体干粉制剂)在临床肾移植受者术后的预防排斥反应，促进肾功能恢复，减少其他免疫抑制剂的用量及其毒性，保护肝功能等方面的资料，报道如下。资料与方法1纳入标准 (1)原发病为慢性肾小球肾炎、终末期肾脏病并首次肾移植患者；(2)患者无肝炎、糖尿病病史；(3)ABO血型相符，配型结果人类白细胞抗原(HLA)i3个位点，受者群体反应性抗原(PRA)均lO，淋巴细胞毒试验10。2一般资料 按纳入标准选择2005-2007年在我科行同种异体肾移植的67例患者。在基础免疫抑制剂方案相同的情况下按是否加用百令胶囊分为两组，对照组42例，男27例，女15例；平均年龄(40596)岁，28例服用环孢素A(cyclospoHne A，CsA)，14例服用他克莫司(FKS06，日本藤泽公司)；治疗组25例，其中男16例，女9例，平均年龄(38769)岁，18例服用CsA加百令胶囊，7例服用FK506加百令胶囊。肾移植术前所有患者均为终末期肾病尿毒症期，术前接受血液透析治疗对照组(0903)年，治疗组(0802)年；供肾热缺血时间对照组(35 4-12)min，治疗组(3314)rain；冷缺血时间对照组(4517)h，治疗组(4715)h。3药物用法 所有患者术前1天口服霉酚酸酯(MMF，骁悉，上海罗氏制药有限公司；赛可平，杭州华东医药公司)1520 g，环孢素A(CsA，新山地明，瑞士诺华制药公司；新赛斯平，杭州华东医药公司)45 mgkg或FK506 01 mskg，泼尼松(四川美大康药业集团)80 mg。术中到术后第2天静脉滴注甲基泼尼松龙(辉瑞制药有限公司)05 sd，术后第3天及第4天静脉滴注甲基泼尼松龙025 gd，一般是术后第3天起口服环孢素A45 ms(kgd)或FK506 O1ms(kgd)；泼尼松自40 msd开始，每天递减5mg，至20 msd维持，1年后减为10 mgd维持；治疗组术后3天口服100冬虫夏草菌丝体干粉(百令胶囊，杭州华东制药公司)1 g，每天3次口服。根据血肌酐水平和血药浓度调整CsA或FK506用药剂量。1年内百令胶囊的剂量基本不变。4检测项目所有患者肾移植术后1个月内，每周常规空腹检测2次血、尿常规，肝、肾功能，血药浓度，血清总蛋白、血清白蛋白，血尿酸(UA)等，术后13个月期间每周常规空腹检测以上指标至少1次，36个月每2周检测1次上述指标，051年每个月检测上述指标1次。上述基本上是在同一中心进行检测。5统计学方法各组数据以面s表示，行两组间对应指标的t检验；两组间对应指标发生率的比较行x2检验。P005)；感染发生率治疗组显著低于对照组(P005)；血UA、尿RBC、尿WBC治疗组显著低于对照组(P001)。3 两组血常规比较(图1) 两组血RBC和WBC在肾移植术后的12周前差异无统计学意义；治疗组此两项在肾移植12周后显著高于对照组(P005，P001)；治疗组淋巴细胞数在移植4周后显著高于对照组(P001)，并且恢复至正常值(1540 X109L)的时间较对照组提前约6个月。4 两组肝功能、血清蛋白及胆红素比较(表3)治疗组谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血总胆红素及血直接胆红素值显著低于对照组(P001)；治疗组血清总蛋白、血清白蛋白值显著高于对照组(P001)。5两组免疫抑制剂用量比较(图2) 治疗组CsA及FK506用量在12周后显著低于对照组(P005，P001)。冬虫夏草是一种具有补肝养肾、益气生精、滋补强身的中药。1。百令胶囊是由中国自主研制开发的100发酵冬虫夏草菌丝体干粉制剂，具有调节人体免疫功能的作用，目前已被广泛应用于哮喘病、抗肿瘤、慢性支气管炎、慢性肾功能衰竭和预防肾移植术后排斥反应的临床治疗旧4。有研究认为百令胶囊在预防和治疗慢性移植物排斥反应方面起到了重要作用6。本研究结果提示，术后用药48周后，治疗组与对照组在急、慢性排斥反应、移植肾存活率、术后SCr和BUN等方面差异无统计学意义，可能与随访时间太短有关。而使用百令胶囊后患者尿中RBC和WBC，血清总蛋白、血清白蛋白显著增加，说明其具有保护肾脏，改善肾炎症状的作用，并有抑制蛋白尿和改善低蛋白血症的效果；治疗组比对照组血uA显著减少，提示百令胶囊在预防或者减少肾移植术后痛风的发生有着潜在的作用。这可能与冬虫夏草促进蛋白质合成，纠正血浆氨基酸紊乱，和对巨噬细胞和淋巴细胞转化及白细胞介素一1生成的免疫抑制作用相关8现阶段冬虫夏草对血液系统的研究仍较少。邓跃毅等H。研究提示冬虫夏草制剂含有虫草多糖、麦角甾醇、多种氨基酸、多种维生素及微量元素等，这些成分是核酸、蛋白质合成的前体成分，其可明显提高骨髓造血干细胞的产生，可使骨髓造血干细胞增殖周期缩短，刺激其生长增殖，有利于骨髓造血功能的恢复，具有显著的促生血作用。我们的研究结果提示：治疗组在肾移植术后的前3个月内血RBC及WBC与对照组比较差异无统计学意义，这可能是因为在术后早期大量的免疫抑制剂的应用强而有效的抑制了造血系统的增殖，而百令胶囊在短期内尚不能克服这些抑制骨髓造血的不良反应。但是在术后3个月以后RBC及WBC治疗组较对照组显著升高，这与百令胶囊的促进造血的功能可能有直接关系。治疗组淋巴细胞在手术4周后较对照组增加，这可能与百令胶囊具有刺激造血干细胞的产生、分化有关，也与其对机体免疫系统有双向调节作用，对网状内皮系统及实质器官以外的巨噬细胞和淋巴细胞有明显的激活作用有关叽。数据显示使用百令胶囊可使肾移植术后肝功能恢复及胆红素分泌、排泄功能有显著改善，这提示冬虫夏草制剂对肝细胞可能具有保护作用，肾移植患者使用百令胶囊后可以减轻其他免疫抑制药物的肝毒性，加快有害物质的清除，减轻肝细胞损伤，并促进受损肝细胞的恢复。有研究表明冬虫夏草制剂治疗后肝脏炎性细胞浸润、肝细胞坏死均较模型组为轻，枯否细胞功能明显增强，免疫复合物在肝内沉积也显著减少。关于百令胶囊是作为免疫抑制剂还是免疫调节剂，目前尚没有统一的说法，我们认为百令胶囊更适合作为免疫调节剂。本研究提示两组在肾移植术后前3个月内基础免疫抑制剂的用量差异无统计学意义，这可能是因为在术后的前3个月内是受者与供者器官的激烈较量期，在此期间免疫抑制剂用量与基础用量的差异不是很大，免疫抑制剂的减量也是较为谨慎。肾移植术3个月后治疗组较对照组的钙调神经抑制剂用量(CsA、FKS06)显著减少，这可能是因为百令胶囊所具有免疫调节作用在发挥作用，具体机制还有待于进一步阐明。肾移植术后感染发生率治疗组显著低于对照组，研究者认为这是一个综合因素的结果。冬虫夏草制剂对机体免疫系统有双向调节作用，在对实质器官进行选择性免疫抑制的同时，不降低机体的系统免疫防御作用，对体液免疫亦有调节作用，可使血清IgG升高，降低感染的发生率引；Kuo等研究了冬虫夏草对支气管小泡灌洗液(BALF)细胞功能的调节，发现冬虫夏草以剂量依赖方式抑制脂多糖激活的BALF细胞增殖，还减少脂多糖激活的BALF细胞培养物的IL-B3、IL-6、IL88、IL10的产生，另外，还增加激活的BALF细胞的IL12和IFN一y的产生，这些结果提示了百令胶囊具有抗炎、抗感染的作用；钙调蛋白抑制剂(CsA、FKS06)用量