趋化因子T细胞激活分泌调节因子与2型糖尿病肾病的相关性研究.docx

趋化因子T细胞激活分泌调节因子与2型糖尿病肾病的相关性研究 【摘要】目的：通过检测糖尿病患者在不同时期的血清中的趋化因子T细胞激活分泌调节因子水平的检测，可以发现糖尿病肾病发生的发展中的意义。根据尿液标本中的白蛋白和肌酐的比率，检测各组别血清最好使用ELISA方法：并结合其他临床检测指标，进行相关性分析和回归性分析。测试的结果如下：血清中RANTES的水平是会随着糖尿病肾病病情的加重程度而逐渐升高的，并且各组间是呈现差异显著（P小于0.01）。RANTES与DM病程、收缩压、血肌酐呈正相关性。结论：血清中RANTES水平与糖尿病肾病的发生发展呈正相关，提示RANTES参与了其发生发展， 可作为早期预测、早期诊断、判断病情的重要炎症指标。 【关键词】趋化因子T细胞激活分泌调节因子；2型糖尿病肾病；趋化因子 趋化因子T细胞激活分泌调节因子（regulated on activation in normal T cell expressed and secreted， RANTES）是C-C趋化因子家族的重要成员之一，有激活和趋化多种白细胞的功能，并促进炎症细胞浸润，参与炎症反应和免疫调节。国内外文献一致报道糖尿病肾病（diabetic kidney disease， DKD）RANTES在尿液血清中水平均明显增高，RANTES在血清的水平的意义尚无定论，本研究通过对DM患者及不同病期的DKD患者血清中趋化因子RANTES水平的检测，探讨其在DKD发生发展中的临床意义。 对象与方法 1 研究对象 1.1分组标准 1.1.1实验组 病例来源于2009年1月到6月间，在兴城市人民医院内分泌科病人，符合1999年世界卫生组织糖尿病诊断标准并同时排除一些影响血清RANTES水平者，比如糖尿病肾病期即尿毒症及其他肾脏疾病患者，合并恶性肿瘤和各种急、慢性感染者，以及有患有哮喘、类风湿性关节炎、子宫内膜病变患者等。根据美国糖尿病协会（American Diabete Association ，ADA）（2007）推荐筛查和诊断微量白蛋白尿采用测定即时尿标本的白蛋白与肌酐的比率（urinary albumin-to-creatinine-ratios ，ACR）随机选取正常白蛋白尿组（DM）（ACR300ug / mg），每组各20例，共计60例。其中男性32例，女性28例，年龄38到70岁，平均年龄（59.5610.64）岁。 1.1.2对照组 选择2009年1月到6月间，兴城市人民医院体检中心的健康体检者20例。 2 研究方法 2.1 临床资料收集 记录受试者姓名、性别、年龄、体重、DM病程、DKD病程，常规测量收缩压、舒张压。并根据公式：GFR（ml/min）=（140一年龄）体重（kg）/72血清肌酐（mg/d1）0.85（女性），算出GFR值。 2.2 测试者的标本采集 进行测试的患者在3日内不能进行剧烈的运动，并且隔夜空腹12小时，在第二天的清晨对测试者进行静脉的抽取两份，一份是在室温静置30分钟，2000转并且坚持10分钟的离心，将分离的血清放置于零下80冰箱里保存，用于检测RANTES。另一份立即进行血糖、血脂、糖化血红蛋白的指标检测，除此之外，用培养杯放置清晨首次的中间尿液，分别用于检测测试者的尿白蛋白和尿肌酐。 2.3 测定方法 2.3.1 一般项目测定 血糖测定采用葡萄糖氧化酶法，血脂测定采用酶比色测定法，糖化血红蛋白测定采用比色法测定，尿白蛋白的测定采用放射免疫法， 血、尿肌酐采用酶法，血尿素氮采用谷氨酸脱氢酶法，hs-CRP采用免疫透射比浊法。 2.3.2 RANTES测定 人RANTES ELISA 试剂盒（美国Rb公司），严格按照说明书操作。 2.4统计学方法 计量资料用s表示，偏态计量资料用中位数表示，各组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用q 检验、2检验或秩和检验。血清RANTES水平与临床参数的相关性分析采用Spearman秩相关分析及多元线性逐步回归分析。所有数据资料汇总采用SPSS13.0软件包进行数据处理，PDKD1组DM组，差异具有统计学意义（P DKD1组DM组NC组，且四组间的差异均有统计学意义（P 0.01），见表2。 表2 糖尿病各组与对照组血清hs-CRP与RANTES的比较 组别例数hs-CRP（mg/ml）血清RANTES（ng/ml） NC组203.341.78319.5837.42 DM组208.783.08489.1532.03 DKD1组2012.274.19*600.2236.84* DKD2组2016.593.93*#725.6553.95*# F值49.565319.47 P值0.0000.000 注：与NC组比较，P0.05；*与DM组比较，P0.05；#与DN1组比较，P 3 血清RANTES水平与临床检测指标的相关性分析 Spearman秩相关分析显示，RANTES与DM病程 、收缩压、空腹血糖、HbA1C 、血肌酐、hs-CRP正相关，r值分别为0.363， 0.515，0.496，0.541，0.511，0.789。 4 血清RANTES水平各影响因素的回归分析 做进一步的探讨，在上述Spearman秩相关分析的基础上，剔除与血清RANTES水平相关性过小的因素，以血清RANTES水平为因变量，以DM病程、收缩压、空腹血糖、HbA1C、血肌酐为自变量，进行多元性逐步回归分析，结果显示，DM病程、收缩压、血肌酐进入方程，得出回归方程Y=291.195+1.205*（血肌酐）+1.397*（收缩压）+4.036*（DM病程），决定系数r2=0.515， 提示血清RANTES水平受DM病程、收缩压、血肌酐的影响。 讨论 RANTES是一个分子量为8kD的小分子蛋白，是C-C趋化因子家族的重要成员之一，通常在正常人体中呈低表达状态，只有在慢性炎症期才显著表达。肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞等肾组织在炎症因子刺激下均可分泌RANTES2-4。RANTES可能通过趋化巨噬细胞来刺激间质的肌成纤维细胞，从而导致细胞外基质蛋白的沉积及间质的纤维化。 经过试验证明，血清组的要高于正常组，并且是随着ACR的升高而升高的，并且在统计学上各组间没有明显的差异，在DKD发展的不同阶段，所以两者在过程中且血清RANTES的水平受DM病程、收缩压、血肌酐的影响。 此外，RANTES与hs-CRP有着良好的相关性，hs-CRP作为非特异性炎症标志物已被临床广泛认同，因RANTES并且因为RANTES由于肾小管上皮及肾小球分泌的优于hs-CRP有可能出现炎症标志物应用在临床上. 参考文献 陆再英，钟南山.内科学M.第7版.北京：人民卫生出版社，2008：776