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第一章:1.生物技术的特点(八高一低)高水平,高综合,高投入,高竞争,高风险,高水平;高智力,高控性,低污染。2.生物工程有时也称生物技术,主要包含四个研究领域即以基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程等为主要研究内容的技术体系。转基因食品是利用分子生物学手段,将某些生物的基因转移到其它生物物种中去,使其出现原物种不具有的性状或产物,以转基因生物为原料加工生产的食品就是转基因食品。产量高,营养丰富和抗病能力强是转基因食品的优势。1.利用基因工程对食品进行改良,以提高食品产量和质量,改善风味,使人们吃到更多、更好的食品。2.食品品质的改善2.1.1营养品质的改良,如使得食物蛋白质.油脂.碳水化合物含量更加丰富。2.1.2 保鲜性能用基因工程的方法将ACC还原酶和ACC氧化酶的反义基因和外源的ACC脱氨酶基因导入正常植株中,获得乙烯缺陷型植株,达到控制果实成熟的目的,已在番茄中实现。把鱼中抗冻蛋白基因整合植入蔬菜和水果中时,可明显改善果蔬食品冷冻后的品质2.2 提高产量。将大白鼠的生长激素基因注射到小白鼠的受精卵内,成功地培育出“超级鼠”,体重比一般小白鼠增加2倍2.3 改善工艺。一般牛乳的酪蛋白分子含丝氨酸,已被磷酸化从而使酪蛋白表面带有大量阴离子,易结合钙离子而沉淀。用丙氨酸代替丝氨酸,降低磷酸化,使蛋白不易与钙离子结合,从而提高牛奶的热稳定性,防止牛奶消毒中有沉淀现象2.4 保健食品和食品疫苗通过重组DNA技术选育出具有抗肝炎功能的西红柿被人食用后,可以产生类似乙肝疫苗的预防效果3 现状1983年世界上第一例转基因植物问世以来,植物基因工程研究进入了蓬勃发展阶段。全世界已分离目的基因几百个,获得转基因植物近200种1、生物技术定义? 是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,采用先进工程技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。2、生物技术(生物工程)及其主要研究领域(发酵工程、生化反应工程、酶工程、细胞工程、基因工程、蛋白质工程)。3、生物技术的特点 八高一低第二章:PPPPACTG123456789101 2 3 4 5 6 7 89 10胞嘧啶(C)腺嘌呤(A)鸟嘌呤(G)胸腺嘧啶(T)脱氧核糖磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸8.碱基对9.氢键10.一条脱氧核苷酸链的片段1. 真核细胞基因结构和原核细胞的有何相同点和不同点?相同点:都是由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区组成。不同点:原核细胞基因的编码区是连续的,真核细胞基因的编码区是间隔的,不连续的。2.真核细胞基因组中的基因常有内含子存在,能否在原核细胞中表达?能,为什么?不能,为什么? 不能,因为原核细胞缺乏对真核基因中内含子的剪接功能和转录后加工系统。原核生物必须有相应的原核RNA聚合酶可识别原核细胞的启动子, 以催化RNA的合成。 基因表达是以操纵子为单位,操纵子由数个相关的结构基因和调控功能的部位组成的。因此在构建原核表达载体时必须有1个强的原核启动子及其两侧的调控序列。3. PUC质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件 ( A B C D ) A.AmPr B.ori复制子 C.LacZ标记 D.多克隆位点 在含某个基因的载体中,将目的基因DNA片段插入该基因,导致该基因的功能失活如:抗性基因的插入失活筛选,含Tetr和Ampr基因的载体,若将目的基因插入Tetr基因,导致Tetr基因失活,形成重组质粒Tets和Ampr4.利用PCR技术扩增目的基因 概念:PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术 原理:_ DNA复制_条件:已知基因的核苷酸序列、四种脱氧核苷酸、一对引物、DNA聚合酶前提条件:方式:以_指数_方式扩增,即_2n_(n为扩增循环的次数)结果:使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增5.PCR技术扩增过程a、DNA变性(90-95):双链DNA模板在热作用下, 氢键 断裂,形成_单链DNA_ b、复性(55-60):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部_双链_c、延伸(70-75):在Taq酶的作用下,从引物的5端3端延伸,合成与模板互补的_DNA链_。 6.1.用一定的_限制酶_切割质粒,使其出现一个切口,露出_黏性末端_2.用_同一种限制酶切断目的基因,使其产生_相同的黏性末端3.将切下的目的基因片段插入质粒的_切口处,再加入适量DNA连接酶,形成了一个重组DNA分子(重组质粒)7. 1.下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容,正确的组合是c2、下列属于获取目的基因的方法的是( d )利用mRNA反转录形成从基因组文库中提取从受体细胞中提取 利用PCR技术 利用DNA转录 人工合成A. B. C. D.3.细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因在基因工程中的主要作用是b A提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B有利于对目的基因是否导入进行检测C增加质粒分子的分子量D便于与外源基因连接4. 有关基因工程的叙述正确的是dA限制酶只在获得目的基因时才用B重组质粒的形成是在细胞内完成的C质粒都可作为运载体 D蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料5.哪项不是基因表达载体的组成部分( b ) A.启动子 B.终止密码 C.标记基因 D.目的基因6.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法( b ) A基因枪法 B显微注射法 C.农杆菌转化法 D花粉管通道法1)以下说法正确的是 c A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来2)不属于质粒被选为基因运载体的理由是 d A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA3)有关基因工程的叙述中,错误的是( a ) A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶4)有关基因工程的叙述正确的是 ( d ) A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料5)基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 ( c ) A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达下列获取目的基因的方法中需要模板链是( b )A.从基因文库中获取目的基因B.利用PCR技术扩增目的基因C.反转录法 D.通过DNA合成仪利用化学方法人工合成下列有关基因工程的叙述中,错误的是啊 a、cA 、DNA连接酶将粘性末端的碱基对连接起来B、基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C、基因治疗主要是对有缺陷的进行修复D、蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料第二章基因工程复习题一、选择题1. 限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是 (D)A 修复自身的遗传缺陷B 促进自身的基因重组C 强化自身的核酸代谢D 提高自身的防御能力2.生物工程的上游技术是(D)A 基因工程及分离工程B 基因工程及发酵工程C 基因工程及细胞工程D 基因工程及蛋白质工程3. 基因工程操作的三大基本元件是:(I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体) (A)A. I + II + III B. I + III + IV C. II + III + IV D. II + IV + V4. 多聚接头( Polylinker )指的是(A)A. 含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工 DNA 片段B. 含有多种复制起始区的人工 DNA 片段C. 含有多种 SD 顺序的人工 DNA 片段D. 含有多种启动基因的人工 DNA 片段5.下列五个 DNA 片段中含有回文结构的是(D)A. GAAACTGCTTTGAC B. GAAACTGGAAACTGC. GAAACTGGTCAAAG D. GAAACTGCAGTTTC6. 若将含有 5 末端 4 碱基突出的外源 DNA 片段插入到含有 3 末端 4 碱基突出的载体质粒上,又必须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少,则需用的工具酶是(D)I T 4 -DNA 聚合酶 II Klenow III T 4 -DNA 连接酶 IV 碱性磷酸单酯酶A. III B. I + III C. II + III D. I + II + III7.下列有关连接反应的叙述,错误的是(A)A. 连接反应的最佳温度为 37 B. 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%C. 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mMD. 连接酶通常应过量 2-5 倍8. T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起,其底物的关键基团是(D)A. 2 -OH 和 5 PB. 2 -OH 和 3 -PC. 3 -OH 和 5 PD. 5 -OH 和 3 -P9. 载体的功能是(I 运送外源基因高效进入受体细胞 II 为外源基因提供复制能力 III 为外源基因提供整合能力) (D)A. IB. I + IIIC. II + IIID. I + II + III10.克隆菌扩增的目的是 (I 增殖外源基因拷贝 II 表达标记基因 III 表达外源基因) (D)A. I + IIB. I + IIIC. II + IIID. I + II + III11下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中,错误的是(C)A. 大肠杆菌繁殖迅速B. 枯草杆菌分泌机制健全C. 链霉菌遗传稳定D. 酵母菌表达产物具有真核性12.考斯质粒(cosmid)是一种(B)A. 天然质粒载体B. 由 -DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体C. 具有溶原性质的载体D. 能在受体细胞内复制并包装的载体13. 某一重组 DNA ( 6.2 kb ) 的载体部分有两个 SmaI 酶切位点。用 SmaI 酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子,其长度总和与已知数据吻合,该重组分子插入片段上的 SmaI 酶切位点共有(D)A.4 个B. 3 个C. 2 个D. 至少 2 个14. 外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是 (I 融合基因能稳定扩增 II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解 III 表达产物易于亲和层析分离 ) (D)A.IIIB. I + IIC. I + IIID. II + III15.提高重组率的方法包括 (I 加大外源 DNA 与载体的分子之比 II 载体分子除磷 III 连接酶过量 IV 延长连接反应时间) (A)A. I + IIB. I + II + IIIC. I + III + IVD. II + III + IV16.识别基因序列不同,但酶切后产生的粘性末端相同的一类酶为 ( B )A.同工酶 B.同尾酶 C.同裂酶 D.同位酶17.pBR322质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件( ABD )A.AmPr和Tetr B.ori复制子 C.LacZ标记 D.多克隆位点18.噬菌体外包装目的基因片段的大小应为 ( D )A.小于噬菌体DNA的50% B. 小于噬菌体DNA的75%C.大于噬菌体DNA的105% D.为噬菌体DNA的75%105%19.DNA连接酶的功能是 ( AB )A.恢复3-OH与5-P之间的磷酸二酯键 B. 恢复缺口 C.恢复裂口 D.可使平末端与粘性末端连接20.PUC质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件 ( A B C D )A.AmPr B.ori复制子 C.LacZ标记 D.多克隆位点21.下列属于获取目的基因的方法的是( D )利用mRNA反转录形成从基因组文库中提取从受体细胞中提取 利用PCR技术 利用DNA转录 人工合成A. B. C. D.22.的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因在基因工程中的主要作用是 B A提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B有利于对目的基因是否导入进行检测C增加质粒分子的分子量D便于与外源基因连接23. 有关基因工程的叙述正确的是 DA限制酶只在获得目的基因时才用B重组质粒的形成是在细胞内完成的C质粒都可作为运载体 D蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料24.哪项不是基因表达载体的组成部分( B ) A.启动子 B.终止密码 C.标记基因 D.目的基因25.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法( B ) A基因枪法 B显微注射法 C.农杆菌转化法 D花粉管通道法26.以下说法正确的是 ( C )A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来27.不属于质粒被选为基因运载体的理由是( D )A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因D、它是环状DNA28.有关基因工程的叙述中,错误的是( A ) A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶29.有关基因工程的叙述正确的是 ( D )A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料30.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 ( C )A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达31.下列获取目的基因的方法中需要模板链是( B )A.从基因文库中获取目的基因B.利用PCR技术扩增目的基因C.反转录法D.通过DNA合成仪利用化学方法人工合成32.下列有关基因工程的叙述中,错误的是 ACA 、DNA连接酶将粘性末端的碱基对连接起来B、基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C、基因治疗主要是对有缺陷的进行修复D、蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料二、 是非判断题 1.DNA连接酶是一种能催化二条DNA链之间形成磷酸二酯键的酶,因此该酶既可修复基因序列中的缺口,也可修复裂口。 ()2.质粒提取后,在琼脂糖电泳出现一条带时说明质粒提取纯度高,当为三条带时为纯度不高。( )3、入噬菌体的插入型载体只有一个单一限制酶切点,替换型载体有2个成对的限制性酶切点。( )4、原核细胞和真核细胞转录的mRNA均具有与rRNA结合的SD序列,以利于进行有效的转录。()5、 cDNA文库是包含有细胞中所有mRNA,因此该文库能包含细胞所有的遗传信息。( X )三、 填空题 1、 在LacI标记基因插入外源基因,经IPTG诱导,在X-gal培养基中显 白 色,为 阳性 克隆,未插入基因的克隆显 蓝 色,为 阴 性克隆。2、 理想的质粒克隆载体应具备以下基本条件,如 能自主复制 、一种或多种限制酶的酶切位点 、 筛选标记 、分子量小易拷贝 。3、点突变的基因系列在碱基替换中,若为一个嘌呤换成另一个嘌呤或一个嘧啶换成另一个嘧啶者称 转换 ,若一个嘌呤换成一个嘧啶或一个嘧啶换成一个嘌呤者称 颠换 。4、基因表达的四大表达系统分别为大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞、昆虫细胞 。5、基因与载体的平末端连接方法有哪些T4连接酶连接法。末端核苷酸转移酶加同聚物尾巴后,再用DNA连接酶进行连接;化学合成衔接物后连接DNA分子。5、目的基因与载体连接方式有哪些1) 粘性末端连接;2) 平头末端连接; 3) 人工接头法; 4) 同源多聚尾连接法6、如何利用抗性标记基因筛选阳性克隆?抗性标记筛选;抗性基因插入失活筛选;LacZ基因失活筛选。7、核酸操作的基本技术有哪些核酸提取与纯化核酸的检测与保存核酸的凝胶电泳核酸分子杂交8、基因工程所需的基本条件1、用于核酸操作的工具酶;2、用于基因克隆的载体;3、用于基因转移的受体菌或细胞。9、Klenow酶在 有 dNTP 情况下,呈现DNA聚合酶活性,在 没有dNTP 情况下呈现外切酶活性。 10、利用PCR技术扩增目的基因 概念:PCR全称为_聚合酶链式反应_,是一项 在生物_体外_复制_特定DNA片段_的核酸合成技术 原理:_ DNA复制_条件:_已知基因的核苷酸序列、四种脱氧核苷酸、一对引物_、 DNA聚合酶前提条件:方式:以_指数_方式扩增,即_ 2n_(n为扩增循 环的次数)结果使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增11PCR技术扩增过程a、DNA变性(90-95):双链DNA模板 在热作用下,氢键 断裂,形成_单链DNA b、复性(55-60):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部_双链_。 c、延伸(70-75):在Taq酶的作用下,从 引物的5端3端延伸,合成与模板互补的_ DNA链_。 第三章:1.决定植物细胞脱分化、再分化的关键因素是什么?影响脱分化的一个重要因素是植物激素。当细胞分裂素与生长素共同使用时,能强烈促进愈伤组织的形成,而两者不同的浓度配比在再分化过程中,分别对诱导根或芽的产生起关键作用。当细胞分裂素与生长素浓度比高时,有利于芽的发生;浓度比低时,有利于根的发生。2.胚状体是怎样形成的?培养胚状体有何意义?愈伤组织的形态发生主要有不定芽方式和胚状体方式两种。而后者需要在愈伤组织形成后,对其进行处理,形成分散的单个细胞,再诱导其分化出具有胚芽、胚轴、胚根的胚状体,进而发育成完整植株。诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构,包裹上人造种皮制成人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。 3.植物组织培养与有性生殖相比,有什么优势: 繁殖速度快; 保持亲本的优良性状(因为是无性生殖); 培育无病毒的植株 不受自然生长季节的限制(因为在具有一定人工设施的室内生产)。4.为什么对动物细胞进行培养时要添加血清?血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。有些氨基酸是必需氨基酸,必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子;血清还含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此,细胞培养时,要保证细胞能够顺利生长和增殖,一般需添加10%20%的血清。 细胞工程复习题一、选择题:1在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()A结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同2. 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( C )淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞 A B C D 3动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的有 ( D ) A诱导融合的方法完全相同B所用的技术手段完全相同C所采用的原理完全相同D都能形成杂种细胞 4.单克隆抗体是指 ( C )A单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体B单个B淋巴细胞增殖产生的抗体C单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体D单个抗体通过克隆化,产生大量抗体5.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合,可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体,其依据是(多选)(AC )AB淋巴细胞可以产生抗体,但不能无限增殖BB淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体C骨髓瘤细胞可以无限增殖,但不能产生抗体D骨髓瘤细胞可以产生抗体,但不能无限增殖6.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖,形成细胞群。其原因是 ( D )A在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖B在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体C每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应D每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体7.关于单克隆抗体,下列叙述不正确的是(D )A、可以制成诊断盒用于疾病的珍断 B、可以与药物结合,用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产,不能体外生产8. 以下不属于生长素的是(D)A IAA B NAA C 2,4-D D 6-BA9.植物细胞有而动物细胞没有的结构是(D)A细胞质 B线粒体 C内质网 D叶绿体10.拥有接触抑制的是(B)A原核细胞 B动物细胞 C植物细胞 D真核细胞11.产生自胸腺的淋巴细胞是(A)A T淋巴细胞 B B淋巴细胞 C C淋巴细胞 D G淋巴细胞12.细胞直接摄取外源DNA的过程叫(B)A转导 B转化 C转移 D转入13.世界上第一种克隆成功的生物是(C)A牛 B人 C羊 D鸡14.培养基中可能含有血清的是(A)A动物细胞培养基 B植物细胞培养基 C愈伤组织培养基 D微生物培养基15.以下不是动物细胞生物制药的是(D)A干扰素 B单克隆抗体 C病毒疫苗 D人工胚乳16.下列不是干细胞特征的是(B)A对称分裂 B无限增殖 C缓慢性 D自稳性17.离体培养的动物细胞分为以下类型,除了(B)A贴壁依赖型 B瓶底依赖型 C兼性贴壁细胞 D悬浮型18.植物体细胞融合完成的标记是(A )A 产生新的细胞壁B 细胞质发生融合C 细胞膜发生融合D 细胞核发生融合19.人工获得一个杂种植株,需要下列哪项步骤( A )A 分离原生质体 诱导原生质体融合 组织培养 得到杂种植株B 分离原生质体 原生质体融合 杂种植株C 获取细胞 原生质融合 组织培养 杂种植株D 获取细胞 原生质直接融合 组织培养20.植物体细胞杂交尚未解决的问题是 C )A 去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体 B 将杂种细胞培育成植株C 让杂种细胞按照人们的需求表现出亲代的优良性状 D 尚未培育出属间杂种植物21.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于:( A )A培养基不同;B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行;C动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能;D动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株。 22单克隆抗体与血清抗体相比,优越之处在于:( C )A单克隆抗体能够制成“生物导弹”; B单克隆抗体可以在体外制备;C单克隆抗体的特异性强,灵敏度高,产量也大大高于血清抗体;D单克隆抗体的制备过程简单。 23.诱导试管苗生根时,培养基的调整应( D )。A、加大盐的浓度 B、加活性炭 C、加大分裂素的浓度 D、加大生长素的浓度24.植物体细胞杂交可以解决不同生物之间的( B )问题。A、亲缘关系远 B、生殖隔离C、地理隔离 D、组织分化25.植物体细胞杂交尚未解决的问题有:( C )A、去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体 B、将杂种细胞培育成植株C、让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性D、尚未培育出属间杂种植物26.不能人工诱导原生质体融合的方法是:( D )A、振动 B、电刺激、 C、PEG试剂、 D、重压27.植物组织培养形成的愈伤组织进行培养, 又可以分化形成根、芽等器官,这一过程称为:( C ) A、脱分化 B、去分化 C、再分化 D、脱分化或去分化28.当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时,下列有可能使其表现出全能性,发育成完整的植株的是( D ) A、细胞分裂素 B、生长素 C、一定的营养物质 D、以上三者均是 29.细胞工程是一门综合科学技术。下列哪项技术不属于细胞工程( A ) A、有性杂交 B、体细胞杂交 C、组织培养 D、细胞核移植30.在生物体的所有细胞中,全能性最高的是( D ) A、卵细胞 B、植物花粉 C、体细胞 D、受精卵31.在生物体内 ,细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官,是因为( B ) A.细胞丧失了全能性 B.基因的表达有选择性 C、不同的细胞内基因不完全相同 D、在个体发育的不同时期,细胞内的基因发生了变化32.植物体细胞杂交尚未解决的问题是( B ) A、去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体 B、让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状 C. 杂种细胞培育成植株 D、尚未培育出属间杂种植物33. 通过细胞杂交,获得一个杂种植株,需要的步骤是( A )A.分离原生质 诱导原生质融合 生出细胞壁 组织培养法 得到杂种植株B.分离原生质 原生质自然融合 组织培养 杂种植株C.获取细胞 原生质融合 组织培养 杂种植株D. 获取细胞 原生质直接融合 组织培养 杂种植株34.在一个生物体内,细胞没有表现出全能性,原因是( C ) 细胞失去了全能性细胞中的基因部分丢失 细胞中的基因选择性表达细胞中的基因变异不同35.植物细胞融合完成的标志的是( A ) A、产生新的细胞壁 B、细胞膜发生融合 C、细胞质发生融合 D、细胞核发生融合36.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上能存活增殖的细胞是( D )A淋巴细胞B小鼠骨髓瘤细胞 C B淋巴细胞自身融合细胞 D杂交瘤细胞37.动物细胞培养的特点 ( A )细胞贴壁 有丝分裂 细胞分化 接触抑制 减数分裂 原代培养一般传110代A、 B、 C、 D、38.一般说来,动物细胞体外培养需要满足以下条件( D )无毒的环境 无菌的环境 培养基需要加入血清 温度与动物体温相似 需要O2,不需要CO2 CO2能调节培养液PHA、 B、 C、 D、 39.在动物细胞培养的有关叙述中正确的是:( B )A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡过程中D、培养至50代后传代细胞遗传物质没有发生改变40.动物细胞工程技术的基础是 ( D) A.动物细胞融合 B.单克隆抗体C.胚胎移植 D.动物细胞培养二、是非题1. 植物体细胞杂交能够在一定程度上克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。 ()2.秋海棠的叶、马铃薯的块茎成熟的花粉 、木质部中的导管细胞都能作为植物组织培养的材料()3.细胞的全能性是指生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。但是不是生物体的每一个细胞都要包含有该物种所特有的全套遗传物质。()4.愈伤组织的形成是离体植物细胞分裂的结果()5. 组织的形成是离体植物细胞愈伤脱分化的结果()三、填空题:1.由A、B两种细胞人工融合成C细胞的过程中,常用PEG(聚乙二醇)(或灭活的病毒) 作为诱导剂。融合过程包括膜融合和核融合两方面,D细胞称为杂种细胞。2.若由D细胞培育成植株,可用植物细胞培养技术,这一培养过程要经过脱分化和再分化两个阶段。目前,植物体细胞杂交还有许多理论和技术问题没有解决,如杂种植物还不能按照人们的需要表现出亲代的优良性状,从遗传学角度分析,其内在因素很可能是控制优良性状的基因还不能表达 。3.如需制备单克隆抗体,骨髓瘤细胞还应满足两个独特的性质:为了避免杂交瘤细胞分泌的抗体不纯,骨髓瘤细胞系自身不能具有产生抗体的能力;用于融合的骨髓瘤细胞体内嘌呤核苷酸合成的补救途径必须丧失,即磷酸核糖转移酶或嘧啶核苷酸激酶的活力丧失。4.细胞融合的方法有化学法,如(PEG诱导融合),物理法,如(电脉冲),生物法,如(仙台病毒诱导细胞融合法)5.人工种子的结构包括人工种皮外层、人工胚乳、胚状体或芽6.干细胞的来源分为胚胎干细胞)和成体干细胞两大类7. 糖在植物组织培养中是不可缺少的,作用体现在碳源、能源、维持渗透压 8.常用的生长素有_ NAA、IAA、2,4-D、_ 等,常用的细胞分裂素_ 6-BA、KT、ZT_9.植物细胞表现出全能性的必要条件是细胞离体、一定的营养物质、激素和其他外界条件10.植物单细胞培养的方法有:平板培养;看护培养;微室培养;双层滤纸培养11.动物细胞的融合方法主要有以下几种 1.病毒诱导融合; 2.化学融合剂诱导融合 ; 3.电场诱导融合12. 植物体内的细胞为什么没有表现出全能性,而是分化成不同的组织器官,原因是基因在特定时间和空间条件下选择性表达的结果。第四章:1.作为生产用菌种和科研的材料,常选哪个时期的细菌( a )2.微生物产生次级代谢产物抗毒素、抗生素、色素等的最佳时期是( b )3.细菌芽孢形成的时期通常在( b )4.细菌群体在生长过程出现形态变化甚至畸形是在( c )5.在微生物群体生长规律的测定中,种内斗争最显著最激烈的时期是( b )A.对数期 B.稳定期 C.衰亡期 D.调整期6.通过发酵罐发酵可大规模生产谷氨酸,生产中常用的菌种是好氧的谷氨酸棒状杆菌。下面有关谷氨酸发酵过程的叙述,正确的是 (c )A溶氧充足时,发酵液中有乳酸的积累-溶氧不足时,发酵液中有乳酸的积累B发酵液中碳源和氮源比例的变化不影响谷氨酸的产量-中碳源和氮源比例为4:1的谷氨酸的产量少C菌体中谷氨酸的排出,有利于谷氨酸的合成和产量提高D发酵液PH值呈碱性时,有利于谷氨酸棒状杆菌生成乙酰谷氨酰胺-发酵液PH值呈酸性时,有利于谷氨酸棒状杆菌生成乙酰谷氨酰胺7.通过发酵罐发酵可大规模生产谷氨酸,生产中常用的菌种是好氧的谷氨酸棒状杆菌。下面有关谷氨酸发酵过程的叙述,正确的是 (c )A溶氧充足时,发酵液中有乳酸的积累-溶氧不足时,发酵液中有乳酸的积累B发酵液中碳源和氮源比例的变化不影响谷氨酸的产量-中碳源和氮源比例为4:1的谷氨酸的产量少C菌体中谷氨酸的排出,有利于谷氨酸的合成和产量提高D发酵液PH值呈碱性时,有利于谷氨酸棒状杆菌生成乙酰谷氨酰胺-发酵液PH值呈酸性时,有利于谷氨酸棒状杆菌生成乙酰谷氨酰胺8.谷氨酸发酵过程中,如果环境条件控制不当,则可能使代谢产物成为乳酸,那么乳酸是下列哪种条件下的产物( d ) APH值过小 BPH值过大 C溶氧过多 D溶氧不足9.能影响发酵过程中温度变化的因素是( d )A微生物分解有机物释放的能量 B机械搅拌 C发酵罐散热及水分蒸发 DA、B、C都对10.应用发酵工程生产的产品不包括( d ) A初级代谢产物 B次级代谢产物 C单细胞蛋白质 D目的基因发酵工程复习题一、选择题:1.厂用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸,结果代谢产物没有谷氨酸而产生乙酰谷氨酰胺,其原因是 ( )A温度控制不适 B通气量过多 C. pH呈酸性 D.溶氧不足2.青霉素生产的叙述,正确的是( B)A青霉素是青霉菌生长代谢中重要的初级代谢产物B用紫外线、激光、化学诱变剂处理青霉菌再经筛选的方法可以选育高产菌种C发酵罐接种后必须进行灭菌处理D在青霉菌生长的稳定期,活菌数不再增加,青霉素产量也不再增加3.有关谷氨酸棒状杆菌的生长和谷氨酸发酵的叙述错误的是( B)A组成酶是维持菌体基本生活的必要条件B菌体能合成各种生长因子,不需要从外界补充C发酵液pH呈酸性时,就会生成乙酰谷氨酰胺D细胞膜透性的改变,可解除代谢产物对有关酶活性的抑制4.属于生长因子的是( D )A 葡萄糖 B 蛋白胨 C NaCl D 维生素5.菌培养液中常含有一定浓度的葡萄糖,但当葡萄糖浓度过高时,反而会抑制微生物的生长,原因是(A ) A碳源供应太充足 B细胞会发生质壁分离 C改变了酵母菌的pH值 D葡萄糖不是酵母菌的原料6.作为生产菌种和科研材料的细菌群体,应该是代谢旺盛、个体形态和生理特性比较稳定的。所以应选择在它的(B )A 迟滞期 B 对数期 C 稳定期 D 衰亡期7.与调整期缩短有关的因素中,最全面的一组是(C ) 用与菌种相同的培养基 营养丰富的培养基稳定期获得的菌种 对数期获得的菌种 接种时间提前 接种量加大 接种量减少 接种种类增多 A B C D8.谷氨酸发酵过程中,如果环境条件控制不当,则可能使代谢产物成为乳酸,那么乳酸是下列哪种条件下的产物( D ) APH值过小 BPH值过大 C溶氧过多 D溶氧不足9. 能影响发酵过程中温度变化的因素是( D)A微生物分解有机物释放的能量 B机械搅拌 C发酵罐散热及水分蒸发 DA、B、C都对10.应用发酵工程生产的产品不包括( D) A初级代谢产物 B次级代谢产物 C单细胞蛋白质 D目的基因三、填空题:1.发酵类型微生物菌体发酵;.微生物酶发酵;微生物代谢产物发酵;微生物转化发酵;生物工程细胞发酵2.厌氧发酵:发酵是在厌氧条件下进行,如酒类发酵、酒精发酵、丙酮丁醇发酵、乳酸发酵;通风发酵:发酵是在通风条件下进行,如酵母菌生产、抗生素发酵、有机酸发酵、氨基酸发酵和酶制剂生产等。3.常用工业微生物有 细菌,放线菌、酵母、霉菌 四大类。 4.微生物生长所需要五大要素:碳源、氮源、无机盐、生长因子、水搅拌则能使新鲜氧气更好地与培养液混合,保证氧的最大限度溶解,并且搅拌有利于热交换,使培养液的温度一致,还有利于营养物质和代谢物的分散。此外,挡板则有助于搅拌,使其效果更好第五章:酶工程复习题一、选择题:1.下面关于酶的描述,哪一项不正确( )(A)(答案)所有的蛋白质都是酶(B)酶是在细胞内合成的,但也可以在细胞外发挥催化功能 (C)酶具有专一性 (D)酶是生物催化剂2.下列哪一项不是辅酶的功能( )(A)转移基团 (B)传递氢 (C)传递电子(D)(答案)决定酶的专一性 3. 下列对酶活力的测定的描述哪项是错误的( )(A)酶的反应速度可通过测定产物的生成量或测定底物的减少量来完成 (B)需在最适pH条件下进行 (C)(答案)按国际酶学会统一标准温度都采用25 (D)要求S远远小于E 4.下列关于酶活性部位的描述,哪一项是错误的 (A)活性部位是酶分子中直接与底物结合,并发挥催化功能的部位 (B)活性部位的基因按功能可分为两大类:一类是结合基团,一类是催化基团 (C)酶活性部位的集团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的集团 (D)(答案)不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位 5.酶的高效率在于 (A)增加活化能 (B)降低反应物的能量水平 (C)增加反应物的能量水平 (D)(答案)降低活化能6.作为催化剂的酶分子,具有下列哪一种能量效应 (A)增高反应活化能 (B)(答案)降低反应活化能 (C)增高产物能量水平 (D)降低产物能量水平二、填空题1.酶和菌体固定化的方法很多。主要可分为吸附法、结合法、交联法和热处理法2.系统命名法根据酶所催化的反应类型,将酶分为6大类。即 1、氧化还原酶;2、转移酶;3、水解酶;4、裂合酶;5、异构酶;6、合成酶(或称连接酶) 。3.酶分子修饰中,经过修饰的酶的特性会改变,即

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