《细胞生物学》PPT课件.ppt

细胞生物学细胞生物学 讲授人：王兰萍 第十章第十章 细胞增殖及其调控细胞增殖及其调控 本章目录 第一节 细胞周期与细胞分裂 第二节 细胞周期的调控 第一节第一节 细胞周期与细胞分裂细胞周期与细胞分裂 本节目录 一、细胞周期 二、有丝分裂 三、减数分裂 一、细胞周期一、细胞周期 （一）细胞周期概述 （二）细胞周期中各个不同时期及主要事件 （三）细胞周期长短的测定 （四）细胞周期同步化 （五）特异的细胞周期 （一）细胞周期（一）细胞周期概述概述 概念 阶段 细胞周期的时间 术语 术语：术语： 连续分裂细胞，在细胞周期中连续运转 因而又称为周期细胞，如表皮生发层细 胞、部分骨髓细胞。 休眠细胞暂不分裂，但在适当的刺激下 可重新进入细胞周期，称G0期细胞，如 淋巴细胞、肝、肾细胞等。 不分裂细胞，指不可逆地脱离细胞周期 ，不再分裂的细胞，又称终端细胞，如 神经、肌肉、多形核细胞等等。 （二）细胞周期中各个不同时期的事件 （三）细胞周期长短的测定（三）细胞周期长短的测定 脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 流式细胞分选仪测定法 有关名词有关名词 TG1：G1期的持续时间 TG2：G2期的持续时间 TS：S期的持续时间 TM：M期的持续时间 TC：一个细胞周期的持续时间 PLM：标记的有丝分裂细胞所占的比例 TDR：胸腺嘧啶核苷，是DNA的特异前体，能被S 期细胞摄入，而掺进DNA中。通常使用的是3H 或者14C标记的TDR。 测定原理 （四）细胞周期同步化 概念：细胞同步化是指在自然过程中发生或经 人为处理造成的细胞周期同步化 分类：自然同步化与人工同步化。 选择同步化 （1）有丝分裂选择法 （2）细胞沉降分离法 诱导同步化 （1）DNA合成阻断法 （2）分裂中期阻断法 （五）特异的细胞周期 爪蟾早期胚胎细胞爪蟾早期胚胎细胞 芽殖酵母 裂殖酵母 植物的细胞周期 细菌的细胞周期 二、有丝分裂二、有丝分裂 三、减数分裂三、减数分裂 问题问题： 有丝分裂与减数分裂区别有哪些？ 回章节目录 第二节第二节 细胞周期的调控细胞周期的调控 本节目录 一、MPF的发现及其作用 二、p34cdc2激酶的发现发现 及其与MPF的关系 三、细胞周期运转调控 细胞周期 一、一、MPFMPF的发现及其作用的发现及其作用 研究一：Rao和Johnson（1970）将Hela细细 胞同步于不同阶阶段，然后将M期细细胞与其他 间间期细细胞混合。 G G1 1 与与M M融合融合 S S与与M M融合融合 G G2 2 与与M M融合融合 一、一、MPFMPF的发现及其作用的发现及其作用 研究二：Masui和Markert（1971） 一、一、MPFMPF的发现及其作用的发现及其作用 一、一、MPFMPF的发现及其作用的发现及其作用 研究三：Maller实验实验 室(1988，纯纯化工作 ) MPF组组成：p32+p45 MPF概念：又称细细胞促分裂因子或M期促 进进因子，是由细细胞周期蛋白与周期蛋白 依赖赖性蛋白激酶组组成的复合物，能启动动 细细胞进进入M期。 结果 二、二、p34cdc2p34cdc2激激酶酶的的发现发现发现发现 及其与及其与MPFMPF的关系的关系 研究一：Hartwell (1960)以芽殖酵母 为实验为实验 材料，分离cdc基因。 二、二、p34cdc2p34cdc2激激酶酶的的发现发现发现发现 及其与及其与MPFMPF的关的关 系系 研究二：Nurse (1970)以裂殖酵母为实为实 验验材料，发现发现 了许许多细细胞周期调调控基 因。 二、二、p34cdc2p34cdc2激激酶酶的的发现发现发现发现 及其与及其与MPFMPF的关系的关系 cdc2基因表达产产物：p34cdc2激酶 cdc28基因表达产产物：p34cdc28激酶 研究三： Maller实验实验 室和Nurse实验实验 室合作 ：p34cdc2与MPF中p32两者为为同源物。 研究结果 二、二、p34cdc2p34cdc2激激酶酶的的发现发现发现发现 及其与及其与MPFMPF的关系的关系 研究四：Hunt (1983)以海胆卵为为材料 周期蛋白 Maller实验实验 室和Nurse实验实验 室合作 MPF另一种主要成分为为周期蛋白B， 周期蛋白B与p56cdc13为为同源物。 MPFMPF 三、三、细细细细胞周期运胞周期运转调转调转调转调 控控 三、三、细细细细胞周期运胞周期运转调转调转调转调 控控 （一）G2-M期转化与CDK1激酶的关键性调控作用 （二）M期周期蛋白与分裂中期向分裂后期转化 APC （三）G1-S期转化与G1期周期蛋白依赖性CDK激酶 CDK2、CDK4、CDK6激酶 （四）DNA复制延搁点参与调控S/G2/M期转化 （一）（一）G G 2 2 -M-M期转化与期转化与CDK1CDK1激酶的关键性调控作用激酶的关键性调控作用 CDK1激酶活性综合调控示意图 （二）（二）M M期周期蛋白与分裂中期向分裂后期转化期周期蛋白与分裂中期向分裂后期转化 周期蛋白降解盒与降解途 径 泛素介导的周期蛋白降解 图解 （三）（三）G G 1 1 -S-S期转化与期转化与G G 1 1 期周期蛋白依赖性期周期蛋白依赖性CDKCDK激酶激酶 （四）（四）DNADNA复制延搁点参与调控复制延搁点参与调控S/GS/G 2 2 /M/M期转化期转化 归纳 ： 归纳 ： 1.细胞周期各时期主要变化是什