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如何检测食品中残留的双氧水及2-乙基蒽醌how to detect residues in food of hydrogen peroxide and 2-ethyl anthraquinone摘 要：对当前一些生产企业违规向食品中添加工业级双氧水，危及食品安全的做法，提出采用扣除背景的高锰酸钾氧化法检测方法，对残留的2-乙基蒽醌采用有机溶剂萃取的高效液相色谱法检测，取得良好效果。关键词：食品；双氧水；检测abstract：facing a number of current non-compliance food producers add industrial-grade hydrogen peroxide to the food, threatening food safety practices, the paper proposed with less background potassium permanganate oxidation detection method. to the residues 2-ethyl anthraquinone，by using organic solvent extraction of high-performance liquid chromatography to obtain good results.key words：food，peroxide，detection1 前言双氧水（学名过氧化氢）属于强烈的氧化剂，作为生产加工助剂，具有消毒、杀菌、漂白等功能。双氧水有食品级双氧水和工业级双氧水之分。食品级双氧水为电解法制造，具有纯度高、杂质少、稳定性好、无有毒有害杂质。但加入过量的双氧水（无论是哪个级别的）都将导致食品营养成分损失，同时较大量的双氧水残留对人体也极为不利。食品中双氧水的检测是确保食品安全所需要的。工业级双氧水主要采用2-乙基蒽醌+钯催化生产，其中含有大量2-乙基蒽醌以及铅、砷等金属离子、机械杂质等。这些有毒有害杂质中，2-乙基蒽醌、铅、砷是致癌物质1，因此，工业级双氧水不能用于食品行业。近年来，食品级双氧水在食品加工过程中被广泛使用。如用双氧水对鱼翅、开心果等进行漂白，对牛奶和奶制品杀菌，对饮用水进行灭菌消毒等。由于食品级双氧水的生产具有一定的技术难度，价格比工业级双氧水高得多，一些企业在食品的生产加工过程中违规使用工业级双氧水。我国现有相关标准中，至今尚无关于食品中双氧水、2-乙基蒽醌的检验方法。gb2760食品添加剂使用卫生标准及其系列修订版本也没有给出普通食品中残留双氧水的规范限定。尽管纯净双氧水、药品中高含量蒽醌已经有了检测方法。但是，食品中有许多成分（如钙离子、维生素、还原糖甚至不饱和脂肪酸等）对食品中双氧水的检测结果有不可忽略的影响。工业废水和药品中的高含量蒽醌的检测方法对食品中微量的2-乙基蒽醌残留量的检测不太适用2。因此，食品中的双氧水、2-乙基蒽醌残留量的检测方法不能完全照搬现有非食品的方法，所以研究出提纯或防止干扰的检测方法很有必要。2 食品中双氧水残留量的检测2.1 主要试剂高锰酸钾标准溶液：使用分析纯高锰酸钾配制成0.1mol/l标准溶液，用草酸钠标准溶液标定。草酸钠标准溶液：使用基准草酸钠配制成0.1mol/l标准溶液。过氧化氢标准溶液：吸取35ml30%过氧化氢（分析纯）溶液用蒸馏水稀释至1l。用草酸标准溶液标定。2.2 主要仪器电子分析天平、真空泵、离心机（3000转/分）、酸式滴定管、电炉。2.3 方法原理取3份样品，第1份不经加热处理，第2份加热除去双氧水，第3份加热蒸馏取馏出液测定，前两份样品消耗高锰酸钾标准溶液（或草酸标准溶液）量的差再减去第3份试样所消耗的高锰酸钾标准溶液的体积，计算出双氧水的含量。化学方程式：h2o2+kmno4+4h+=mno2+2koh+2h2o32.4 分析步骤2.4.1 样品处理2.4.1.1 对于澄清透明的液态样品，分别吸取样品25ml样品用于检测。2.4.1.2 对于非澄清的液态样品，吸50ml样品于100ml容量瓶中，加10.6%亚铁氰化钾溶液和20% 乙酸锌溶液各4ml，摇匀，静置，过滤。吸取25ml滤液用于检测。2.4.1.3 对于脂肪含量高的样品，称取25克样品，于烧杯中加水搅拌萃取，然后用滤纸过滤，并用水反复冲洗滤纸上的残留物，收集水相定容至100ml, 吸取25ml(或50ml)用于检测。2.4.2 测定将第1份样品预处理后，在室温下加50ml水和10ml 1+1硫酸溶液，用0.2mol/l的高锰酸钾标准溶液滴定至微红色出现，30秒不退色为止。第2份样品预处理后，加热煮沸10分钟，冷却后从上一步的“加50ml水”开始操作。第3份样品处理后的试液置于全玻璃蒸馏装置中，加150ml水，加热蒸馏，收集约100ml馏出液，从第1份样品中操作方法的“10ml 1+1 硫酸溶液”开始操作。2.4.3 计算公式食品中双氧水含量式中：v 0 检测时所吸取的原始样品的体积（ml）；v 1 滴定冷试液所消耗的高锰酸钾标准溶液的体积（ml）；v2滴定加热煮沸后的试液所消耗的高锰酸钾标准溶液的体积（ml）；v3滴定收集的挥发酸馏出液所消耗的高锰酸钾标准溶液的体积（ml）；c 高锰酸钾标准溶液的浓度（mol/l）；34.0 1 摩尔过氧化氢的质量（g/mol）。2.5 回收率试验以清水板栗罐头的汤汁为背景，做加标回收率试验，结果如表1所示。表1 食品中双氧水检测的加标回收率试验结果tab.1 the test result which is the sign returns-ratio of double oxygen waters examination in food组别123456加标量0.100.200.300.501.002.00实测结果0.020.070.130.260.591.36重复性标准偏差/sr0.0020.0220.0810.130.190.24重复性变异系数/%0.100.310.620.500.330.15重复性限/r(2.8sr)0.060.200.160.360.530.67加标回收率%2035425159683 食品中2-乙基蒽醌的检测3.1 主要试剂甲醇（色谱纯）；氯仿（分析纯）；丙酮（分析纯）；乙醚（分析纯）；石油醚（分析纯，6090）；亚铁氰化钾沉淀剂：用蒸馏水溶解亚铁氰化钾（分析纯）配成10.6% 的水溶液，贮存于综色试剂瓶中；乙酸锌20% 水溶液：用蒸馏水溶解乙酸锌（分析纯）配成20%的水溶液；2-乙基蒽醌标准溶液：用2-乙基蒽醌对照品配成4。3.2 主要仪器电子分析天平、高效液相色谱仪（带紫外检测器，c -1 8 反相色谱柱）、真空泵、离心机（3000转/分）3.3 方法原理样品经处理后，用有机溶剂萃取。进高效液相色谱仪，利用保留时间定性，峰面积定量。3.4 分析步骤3.4.1 样品处理3.4.1.1 对于澄清透明的液态样品，吸取样品5ml，用三氯甲烷萃取3次，每次5ml，剧烈振摇1min。合并收集的三氯甲烷，放于刻度试管中，水浴挥干，加25ml三氯甲烷超声波溶解。3.4.1.2 对于固态样品，准确称取2.0克样品，加15ml三氯甲烷（或丙酮），盖紧瓶塞，振荡30min。以下操作同2.4.1.1“放于刻度试管中”之后的操作。3.4.1.3 对于非澄清的液态样品，吸取50ml样品于100ml容量瓶中，加10.6%亚铁氰化钾溶液和20%乙酸锌溶液各4ml，摇匀，静置，过滤。吸取10ml滤液，按2.4.1.1操作。3.4.1.4 对于脂肪含量高的样品，称取25克样品，于烧杯中加甲醇搅拌，过滤，用甲醇反复冲洗滤纸，收集甲醇滤液减压浓缩至合适的体积。然后视试液的澄清情况，按2.4.1.1 或3.4.1.3处理。3.4.2 高效液相色谱条件柱：反相c-18流动相：甲醇流速：1ml/min检测器：紫外检测器，波长254nm3.4.3 测定取相同体积的试液和2-乙基蒽醌标准溶液分别注入高效液相色谱仪，根据保留时间定性，外标峰面积法定量。3.5 回收率试验准确吸取清水板栗罐头的汤汁10ml，置于50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，各吸取5.0ml 于5个10ml容量瓶中，分别加入浓度为0.2000mg/ml的2-乙基蒽醌对照溶液0.0ml，1.0ml，2.0ml，3.0ml，4.0ml，5.0ml，稀释至刻度，进20ul样品。利用色谱工作站计算检测结果，并人工计算回收率5。结果见表2。表2 食品中2-乙基蒽醌检测的加标回收率试验结果tab.2 the test result which is the sign returns-ratio of 2- ethyl anthraquinones examination in food检测编号12345加标量，0.20000.40000.60000.80001.0000实测结果0.19940.39920.63360.82081.0310加标回收率，%99.799.8105.6102.6103.1平均回收率，%102.3%平均相对标准偏差，sr0.246重复性变异系数，%0.355%重复性限，r(2.8sr)0.7104 结论由于双氧水具有很强的氧化性，可以氧化食品中的一些有机物，且双氧水本身不稳定，因此，对于双氧水检测的加标回收率不尽人意。但是，此方法可判断食品中是否含有双氧水。2- 乙基蒽醌检测的加标回收率是理想的。后一检测方法能方便地判断食品中是否添加了工业级双氧水。参考文献1 王增荣. 气相色谱法测定精制2-乙基蒽醌纯度j.大氮肥.2003, 26(4).2