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生物实验的四步分析法 高中生物教材已将学生实验数量增加到二十多个,实验教学越来越受到重视。但是,我们经常可以发现,不少学生在上实验课时,只重视实验结果,不重视分析结果;只满足于实验的成功,而不愿对实验失败的原因进行分析。造成这种现象的原因,除了是学生对实验的根本目的缺乏深刻的认识以外,不懂得如何分析实验、没有掌握实验分析的一般方法是非常重要的因素。生物学是一门实验性很强的学科,在实验过程中,会有多种因素影响、干扰实验结果,致使实验失败。此时,实验分析就显得很重要:一方面,可以找出并排除影响因素,使实验重做时能获得成功;另一方面,还可以总结出经验教训,甚至可能还有意外的收获、新的发现,这在科学史上是不乏其例的。因此,尽管现行高中生物教学大纲没有明确实验分析这一要求,而且实验大多也比较简单,但是,笔者以为,在高中生物实验教学中,除了使学生达到提高动手能力、了解实验原理和方法、验证所学知识这些目的以外,教育学生辩证地看待实验的成功与失败、教给学生进行实验分析的一般方法、初步培养学生实验分析的能力还是必要的! 笔者在实验教学过程中,注重培养学生实验分析的能力,并就实验分析的方法进行了初步探索,总结归纳成了“四步分析法”,即从取材、药品与试剂、步骤及操作、显微镜的使用四个方面对实验进行分析的方法。一、 取材分析 正确取材是实验成功的第一步。有的学生实验失败的原因,往往是取材不正确而引起的,因而在实验分析时,要首先考虑取材是否正确。例如,实验三“观察植物细胞的有丝分裂”中,准确切取洋葱根尖生长点部位,是实验成功的前提。一些学生制成的装片中往往看不到或看到很少的分裂相细胞,就是因为切取部位不够准确导致的,即没有选准根尖的生长点部位。实验七“观察植物细胞的质壁分离和复原”中,取材部位应该是在新鲜的洋葱鳞片叶外表皮的紫色较深处。而在内表皮或紫色很浅的部位取材,往往观察不到或仅有很少紫色液泡。实验二“观察叶绿体和细胞质的流动”中,选择幼嫩的黑藻叶,放在光下或温水中一段时间,使细胞的流动加快,这是实验取得好的效果的前提。实验六“叶绿体中色素的提取和分离”中,选取的叶片要肥厚、色浓,而老叶、发黄的叶子则不能选用。二、药品与试剂分析 药品与试剂的量、浓度、纯度等都是影响实验正确结果的重要因素,要逐一检查,不能忽视。1关于量的问题。 有些实验对药品和试剂的量有一定的要求,如实验六中,丙酮、层析液的量就要按规定使用:提取叶片中的色素,用5ml丙酮是适中的,若丙酮过多,会使色素浓度降低,减少滤纸条上色素的量,使分离效果不明显;若丙酮少了,色素提取又不充分。色素分离时,向烧杯中倒入层析液时,其量的标准是液面不能超过1cm(距烧杯底),否则将没及滤纸条上的滤液细线,色素就迅速溶解到层析液中去了,结果在滤纸条上得不到相应的色素分离图谱。2关于浓度问题。 实验中,规定的浓度,都是人们经过多次试验后,认为最适合的。实验员在实验前配制药品与试剂时,浓度要配准,否则将会影响学生实验。如蔗糖溶液浓度较高时(高于),会使细胞因发生强烈质壁分离而失水过多,造成细胞死亡而不能复原。实验四“比较过氧化氢酶和fe3+的催化效率”中,过氧化氢的浓度太低,则会因为产生的氧气少而不能使卫生香复燃。3关于纯度问题。 有的实验如实验九“dna的粗提取与鉴定”对试剂的纯度有很高的要求,如果所用蒸馏水中混入杂质,或用自来水代替,提取鸡血的核物质时,就会使细胞破裂不充分,得到的核物质很少,影响实验的效果。三、 步骤及操作分析 步骤及操作是否正确是影响实验结果的主要因素,应重点分析,主要有以下三种情况。1漏做某个实验步骤。 实验步骤不能少,如实验三中,根尖用15%盐酸和95%酒精解离后,若不经漂洗直接染色,则染色效果极差,因为根尖上附着的盐酸将和碱性染料起中和反应,从而影响着色;制片时,用镊子尖把根尖弄碎,这一步也易漏掉,会使装片中的细胞重叠,影响观察效果。2操作方法错误。 在具体操作某个步骤时,没有按规定的操作方法做,肯定会影响实验结果。如临时装片制作时,有的学生将盖玻片直接放在清水滴上,这样制成的装片中,气泡较多,严重影响观察。实验七中,应用镊子撕取洋葱表皮,而不少学生是用刀片削或挖,以至取出的表皮较厚,这样在显微镜下也就看不到单层细胞了。3操作不严格。 如制作洋葱根尖临时装片时解离、染色时间不够,漂洗的时间或次数不足;制作洋葱表皮临时装片时,未将清水滴中折叠的表皮平展开来;做质壁分离与复原实验时,滴蔗糖溶液时流到显微镜上,等等。四、显微镜的使用分析 需用显微镜的实验,有时会因为显微镜的操作,镜头污染等问题而影响观察,看不到已经出现的现象或结果。显微镜的操作要按一定的程序进行,如对光程序、高倍镜观察程序等。有的学生不按程序操作,结果既耽误了时间,又观察不到相应的结果,而且易损坏显微镜。例如,常有学生在用高倍镜观察时,把盖玻片压碎了,弄脏了镜头,就是由于这些学生在下降镜筒时,眼睛看的是目镜而不是物镜,这样,镜筒下降到什么位置就不知道了。正确的程序应该眼睛看着物镜,同时下降镜筒,让物镜接近装片,然后眼看目镜,调节准焦螺旋使镜筒缓缓向上,直至观察到清晰物像。此外,目镜或物镜头被严重污染、焦距没有调好、放大倍数不够、视野较暗、标本不在通光孔的中心位置等诸多因素,都会直接影响观
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