球菌（）ppt课件

球 菌 华中科技大学同济医学院附属协和医院 熊 艳 革兰阳性球菌 触酶（-） 触酶（+ ） 链球菌科 微球菌科 链球菌 肠球菌 微球菌 葡萄球菌 微球菌科内各属的主要鉴别要 点 触酶 试验 葡萄糖发酵 试验 动力 对杆菌肽耐药（ 0.04U纸片） 葡萄球菌属 + + - + 微球菌属 + - - - 口腔球菌属 V + - - 游动球菌属 + - + V +：多数（90%）阳性； -：多数（90%）阴性； V ：不定 第一节 葡萄球菌属 一生物学特性 （一）形态与结构 革兰染色阳性，呈圆球形，葡萄状排列 。 无鞭毛和芽胞。 （二）培养特性 需氧或兼性厌氧，营养要求不高。多数 菌株耐盐性强，能在1015NaCl琼脂 中生长。 菌落：圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘 整齐并且不透明，可产生不同的脂溶性色 素。 血琼脂：多数致病性菌株可产生透明 溶血环，且菌落较大。 高盐卵磷脂平板：菌落周围形成白色 沉淀环，可用于筛选。 亚磷酸钾甘氨酸琼脂：黑色扁平的小 菌落。 2018/12/15 （三）生化反应 q 触酶试验阳性。 q 葡萄糖氧化发酵试验：发酵+，对糖的发 酵反应不规则。 多数致病性葡萄球菌能分解甘露醇产酸 、液化明胶和产生血浆凝固酶。 2018/12/15 （四）抗原构造 1蛋白抗原：葡萄球菌A蛋白（SPA） l 存在于金黄色葡萄球菌细胞壁。 l SPA可与人类IgG的Fc段非特异性结合而不影响 Fab段，应用于协同凝集试验。 l 抵抗吞噬细胞的吞噬。 2多糖抗原：型特异性 A型多糖抗原：带有N乙酰葡萄糖胺的核 糖醇，存在于绝大多数金葡菌中。 B型多糖抗原：甘油磷壁酸，来自非致病性葡 萄球菌。 C型多糖抗原： 2018/12/15 （五）分类及分型 葡萄球菌包括35个种及17个亚种 根据产生色素的不同分类 根据产生凝固酶与否进行分类 按噬菌体分型法分类 葡萄球菌传统分类 金黄色 葡萄球菌 表皮 葡萄球菌 腐生 葡萄球菌 产产生溶血毒素+ 产产生凝固酶+ 产产生耐热热DNA酶+ 产产生SPA+ 新生霉素敏感性SSR 致病性强弱无 （六）抵抗力 l是抵抗力最强的无芽胞细菌之一。 l耐干燥可达数月。 l对龙胆紫敏感。 l易形成耐药性：耐甲氧西林金黄色葡萄 球菌（MRSA）已成为医院感染最常见 的致病菌。 二致病性和免疫性 （一） 致病物质 金葡菌的致病性主要与其所产生的各种 侵袭性酶，如：血浆凝固酶、耐热核酸酶、 透明质酸酶、溶纤维蛋白酶等，以及各种外 毒素，如溶血毒素、杀白细胞毒素等有关。 凝固酶 游离凝固酶：采用试管法检测 结合凝固酶：采用玻片法检测 金葡菌凝固酶试验均为阳性 凝固酶试验是鉴定金葡菌的重要标志 游离凝固酶 协同因子 凝血酶 纤维蛋白原纤维蛋白血浆凝固 结合凝固酶（位于菌体表面） 纤维蛋白原纤维蛋白细菌凝集 注意事项： 不要用枸橼酸盐血浆，以防止能利用枸橼酸盐 的细菌出现假阳性。 玻片法必须用大量的细菌和少量的血浆。 试管法检查凝块形成时，不要摇动试管。 凝 固 酶 结结合凝固酶（凝聚因子）：纤维纤维 蛋白原受体 玻片法阳性 游离凝固酶：类类似凝血酶原物质质，可被协协同 因子激活试试管法阳性 2018/12/15 （二）所致疾病 葡萄球菌感染的特点是：感染部位组织的化 脓、坏死和脓肿形成。 金葡、表皮和腐生是引起临床感染最常见的 葡萄球菌。 金葡引起的常见感染有：疖、痈、外科切口 、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓性关节 炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎等全身性感染。 表皮葡萄球菌引起人工瓣膜性心内膜炎、静 脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感 染和人工关节感染等。 腐生葡萄球菌是女性尿路感染的重要病原菌 。 n（三）免疫性 有一定天然免疫力。 病后获得的免疫力作用不强、不持久。 三微生物学检验 细菌鉴定的基本程序 标本 直接涂片 革兰染色镜检 分离培养 取可疑菌落 鉴定试验和药敏试验 结果报告 （一）标本采集 l 根据病种不同，采集不同标本 脓液、创伤分泌液、穿刺液、血液、 尿液、痰液、脑脊液、粪便等。 （二）检验程序 脓、穿刺液、尿液、痰脑脊液血液粪便、呕吐物 增菌培养 分离培养分离培养分离培养直接涂片染色 鉴定试验和药敏试验 菌落涂片染色血浆凝固酶耐热核酸酶药敏试验其它试验 报告 （三）检验方法 1直接镜检 2分离培养 3鉴定试验 触酶试验 血浆凝固酶试验 甘露醇发酵试验 耐热核酸酶试验：此酶与血浆凝固酶具有同 等诊断意义。 SPA的检测：SPA能与兔抗羊红细胞血清中的 IgG的Fc段结合，使致敏羊红细胞发生凝集。 2018/12/15 检验方法直接镜检 方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜检 初步报告: “查见革兰阳性葡萄串状排列球菌，疑 似葡萄球菌” “查见革兰阳性球菌” 检验方法分离培养 脓、痰、脑脊液标本接种血平板 菌落特征：光滑型、中等大小、脂溶性 色素、透明溶血环（-溶血环） 检验方法分离培养 粪便标本高盐甘露醇平板 菌落特征：光滑型、中等大小、淡黄色 菌落 检验方法分离培养 血标本增菌（葡萄糖肉汤）分 离培养（血平板） 生长现象：混浊、胶胨状凝固、溶血 金葡菌的鉴定依据 血平板上金黄色色素、-溶血环 血浆凝固酶 + 发酵甘露醇 + 耐热核酸酶 + 凝固酶阴性葡萄球菌（CNS ） 条件致病菌 医院内感染的重要病原菌 对多种抗生素耐药 凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别 结合 型血 浆凝 固酶 游离 型血 浆凝 固酶 PYR 试验 耐热 核酸 酶试 验 V-P 试 验 鸟氨 酸脱 羧酶 试验 金黄色葡萄球菌 + + - +- 中间型葡萄球菌 - +罕见 + +- - 希氏葡萄球菌 + - + +- 里昂葡萄球菌+-+-+ +：多数（90%）阳性；-：多数（90%）阴性； （四）结果评价和报告 n金葡菌系毒力很强的致病菌，无论从任 何标本中分离出均应及时鉴定、进行药 敏试验和尽快报告临床。 n从输液导管、人工植入组织中分离出的 表皮葡萄球菌和从尿液标本中分离出的 腐生葡萄球菌应视为病原菌。 n由于葡萄球菌在尿液中生长缓慢，故尿 液培养菌落计数应考虑为103104/ml为 阳性菌尿标准。 （四）结果评价和报告 n其它凝固酶阴性葡萄球菌引起感染流行 或临床治疗失败时应考虑将其鉴定到种 。 n当MRSA对头孢菌素类的体外药敏试验表 现为“敏感”时，不能将这种假象向临 床报告，以免造成错误导向。 葡萄球菌最严重的耐药问题 ： MRS（耐甲氧西林的葡萄球菌） MRSA（耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌） MRCNS（耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌） VRSA（耐万古霉素的金黄色葡萄球菌） MRS耐药机理和特征： MRS具有一外来基因mecA，它负责编码青 霉素结合蛋白2a (PBP2a)。当抗生素作用于 MRS时，PBP2a替代了其他PBP合成细胞壁的功 能。 但PBP2a与内酰胺类抗生素的亲和力极 低，故对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类 等抗生素广谱耐药。同时由于基因的连锁性， 往往对内酰胺类以外的氨基糖苷类、大环内 酯类、喹诺酮类、四环素类、林可霉素类等多 种抗菌药物也耐药。 第二节 链球菌属 一链球菌 （一）生物学特性 形态染色 培养特点 生化反应 抗原构造 分类 抵抗力 1.形态与染色 革兰阳性球菌，呈链状排列，无鞭毛， 无芽胞，可形成荚膜。 在液体培养基中易形成长链 致病性强的菌株多为长链 在脓汁标本中多为短链 2.培养特点生长条件 营养要求高，在含血液、血清培养基上 生长良好。 需氧或兼性厌氧，少数为专性厌氧，在5 CO2环境下生长更好。 培养特点生长现象 液体培养基：呈沉淀生长现象。 血平板：灰白色、细小、圆形、光滑的 、有不同溶血现象的菌落。 分类类菌落特征 甲型（）溶血性链链 球菌 灰色、针针尖状菌落、周围围有草 绿绿色溶血环环（ 溶血） 乙型（）溶血性链链 球菌 灰白色、细细小菌落、周围围有宽宽 大透明溶血环环（ 溶血 ） 丙型（）链链球菌灰白色小菌落、无溶血环环 3.生化反应 触酶试验（） A群链球菌：杆菌肽敏感试验（+） B群链球菌：CAMP试验（+）、马尿 酸钠水解试验（+） D群链球菌：胆汁七叶苷试验（+） 4.抗原构造 n蛋白质抗原：型特异性抗原（M、R、S 、T蛋白抗原） n多糖抗原：群特异性抗原（“C”抗原 ） n核蛋白抗原：无特异性（“P”抗原） 5.分类 根据溶血现象分类： 根据抗原结构分类：按链球菌细胞壁中 多糖抗原不同分群 根据链球菌生化特点、培养特点及溶血 现象等特征分类 分类根据溶血现象分类 甲型溶血性链球菌：属条件致病菌 乙型溶血性链球菌：致病力强 丙型链球菌：无致病力 分类根据抗原构造分类 群特异性抗原（C抗原）：细胞壁多糖 抗原，可将链球菌分为20群（A、B、C 、D、F等），引起人类感染的链球菌 90为A群。 型特异性抗原（表面抗原）：细胞壁蛋 白抗原，有M、T、R、S四种，根据M 抗原不同，可将A群分为100型。 常见链球菌生物种的鉴别 生物种 多糖 抗原 溶血 65g/L NaCl 精氨酸 马尿酸 盐 胆汁七 叶甘 化脓性链球菌A-+- 无乳链球菌Bd+- 类马链球菌C-+- 兽疫链球菌C-+- 马肠链球菌D-+ 粪链球菌D + 血链球菌H -+- 唾液链球菌K -+- 肺炎链球菌 -+- 乙型溶血性链球菌的进一步鉴定 分 群 菌 落 菌种 PYR 试验 VP 试验 CAMP 试验 海藻糖山梨醇 A 大 化脓性链球菌+ - A 小米勒链球菌 -+- B 无乳链球菌-+ C 大马链球菌 - C 大类马链球菌 -+- C 大兽疫链球菌 -+ C 小米勒链球菌 -+- F 小米勒链球菌 -+- G 大类马链球菌 - G 小米勒链球菌 -+- 6.抵抗力 抵抗力不强，对临床常用抗菌药物 都很敏感。 （二）致病性和免疫性 致病物质 所致疾病 免疫性 临床意义A群链球菌 致病物质: 致热外毒素：致热、细胞毒作用、使皮 肤产生红疹、抗原性强。 溶血素：溶解红细胞、破坏血小板和白 细胞，分为溶血素O和溶血素S两种。 侵袭性酶：透明质酸酶、链激酶、链道 酶，有利于细菌在体内扩散。 M蛋白：具有抗吞噬作用；与肾小球基 底膜有共同抗原成分，与超敏反应有关 。 链球菌溶素O 对氧敏感。 抗原性强，刺激机体产生抗O抗体。 抗O试验可用于风湿热等链球菌感染所 致超敏反应性疾病的辅助诊断。 临床意义A群链球菌 所致疾病 化脓性感染：扁桃体炎、丹毒、蜂窝织 炎、淋巴管炎、败血症等 猩红热 风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎 临床意义其他链球菌 B群链球菌：条件致病菌，是新生儿败 血症和脑膜炎主要致病菌。 肺炎链球菌：引起大叶性肺炎等疾病。 甲型链球菌：条件致病菌，在一定条件 下引起亚急性细菌性心内膜炎。 变异链球菌：与龋齿有密切关系。 （三）微生物学检验 标本采集 检验程序 检验方法 1.标本采集 根据不同疾病，采集不同标本。如创伤 感染的脓液，咽部、鼻腔等病灶的棉拭 、败血症者的血液等。 2.细菌鉴定的基本程序 标本 直接涂片 革兰染色镜检 分离培养 取可疑菌落 鉴定试验和药敏试验 结果报告 脓、痰、咽拭脑脊液血液 增菌培养分离培养直接涂片染色 观察菌落及溶血现象 触酶试验（） Optochin 敏感试验 肺炎 链球菌 A群链 球菌 杆菌肽 胆汁 七叶苷 草绿色 链球菌 D群 链球菌肠球菌 6.5 NaCl 血清学 分类 3检验方法 q直接镜检 q分离培养 q鉴定试验 2018/12/15 检验方法直接镜检 方法:取标本直接涂片，革兰染色后镜 检 初步报告: “查见革兰阳性球菌” “查见革兰阳性矛尖状双球菌，有荚膜 ，疑似肺炎链球菌” 荚膜肿胀试验可确诊， “找到肺炎链球 菌” 检验方法分离培养 脓、痰、咽拭标本接种血平板，进行 分离培养。 菌落特征： 甲型链球菌：针尖样菌落、周围有草绿色 溶血环； 乙型链球菌：灰白色小菌落、周围有透明 溶血环； 丙型链球菌：灰白色菌落、无溶血环； 肺炎链球菌：灰白色扁平小菌落、周围有 草绿色溶血环，培养较久形成脐窝样菌落 。 检验方法增菌培养 增菌培养基：葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤 血液与培养基比例：1:10，即5ml标本， 50ml增菌液。 拮抗剂：硫酸镁（拮抗多种抗生素）、对氨 基苯甲酸（拮抗磺胺）等 培养时间： 常规培养：1824小时至1周； 亚急性细菌性心内膜炎：血液标本若72h仍 无菌生长，则需延长培养时间至第四周。 鉴定试验 杆菌肽敏感试验：A群链球菌 CAMP试验：B群链球菌 马尿酸盐水解试验：B群链球菌 胆汁七叶苷试验：D群链球菌、肠球菌 盐耐受试验：肠球菌 Optochin敏感试验：肺炎链球菌 胆盐溶菌试验：肺炎链球菌 血清分群快速胶乳凝集试验：用亚硝酸抽提待 鉴定链球菌群特异性抗原，然后与包被在乳胶 颗粒的各群特异性抗体反应，出现凝集者为阳 性。 二肺炎链球菌 （一）生物学特性 q形态与染色： 革兰染色阳性，呈矛头状，成双排列，底面相 对，尖端向外，在人和动物体内形成荚膜。 q培养特性： 需氧或兼性厌氧，营养要求较高。在5% 10%CO2的环境中培养产生典型菌落。 菌落：细小灰色扁平、透明或半透明、中心凹陷， 周围有草绿色溶血环。有些菌株可表现为粘液样 。48小时后，由于菌落自溶，呈现“脐窝状” 。 2018/12/15 3.生化反应 Optochin敏感试验（+） 胆汁溶菌试验（+） 菊糖分解试验（+） 肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的区别 菌落菌形 血清 肉汤 中 盐 水 中 胆汁 溶菌 菊糖 发酵 Opto chin 小白 鼠毒 力 肺炎链 球菌 稍大、湿 润扁平、 脐窝状 矛头状 成双， 有荚膜 均匀 混浊 均 匀 +/-+ 甲型溶 血性链 球菌 较小、稍 平圆形、 凸起 圆形成 链、无 荚膜 沉淀 自 凝 -/+- n抗原构造 v荚膜多糖抗原：型特异性抗原 v菌体多糖抗原：属特异性抗原 v菌体核蛋白抗原：无特异性 5.抵抗力 抵抗力弱，对临床常用抗菌药物都很敏感。 2018/12/15 n变异性 荚膜变异：有荚膜 无荚膜 S-R变异：光滑型 粗糙型 型的转化变异：型别互相转化 耐药性变异：敏感 耐药 （二）致病性和免疫性 肺炎链球菌主要寄居于人类上呼吸道， 一般不致病，仅在人体抵抗力下降时才 引起疾病。 主要的致病因素是细菌的荚膜、杀白细 胞素等。 相关疾病主要有大叶性肺炎、支气管炎 。可继发胸膜炎、脓胸，也可引起中耳 炎、副鼻窦炎、脑膜炎及败血症。 （三）微生物学检查法 q标本采集 ： q检验程序 ： 3.检验方法 （1）直接镜检：除血液标本外均可作。 （2）分离培养 （3）鉴定试验 v胆汁溶菌试验 v菊糖发酵试验 vOptochin敏感试验 v动物试验 v荚膜肿胀试验 2018/12/15 鉴定依据 A群链球菌杆菌肽敏感试验（+） B 群链球菌CAMP试验（+）、马尿酸 钠水解试验（+） D群链球菌胆汁七叶苷（+）、6.5氯 化钠生长（） 肺炎链球菌Optochin敏感试验（+）、 胆汁溶菌试验（+）、形态和菌落特征典型 甲型链球菌 Optochin敏感试验（） 、胆汁溶菌试验（） （四）结果评价和报告 n溶血性链球菌和肺炎链球菌系毒力强 的致病菌，无论从何种临床标本中分离 均应及时报告临床。 n咽部标本中分离出化脓性链球菌迅速报 告临床并及时使用抗生素以减少并发症 的发生。 nC、G群大菌落的溶血性链球菌是咽喉 炎病原体，而米勒链球菌群尽管是正常 菌群之一，但只要是在脓肿或伤口中分 离的都应视为致病菌。 第三节 肠球菌 一生物学特性 （一）形态与染色 革兰染色阳性球菌，单个、成双或短 链状排列。 （二）培养特性 需氧或兼性厌氧，营养要求较高。 菌落：灰白色、不透明、表面光滑、直 径为0.5-1mm大小的圆形菌落，不同的菌 株可表现为不同的溶血现象。 v 与链球菌的区别：肠球菌能在高盐、 高碱、高胆汁培养基及1045条件下 生长。 2018/12/15 （三）生化反应 触酶阴性，胆汁七叶苷试验（+）， 6.5%NaCl生长试验（+），多数具有吡咯 烷酮芳基酰胺酶，能水解吡咯烷酮-萘 基酰胺（PYR）。 （四）分型 （五）抵抗力 对大多数常用的抗菌药物呈天然 耐药。 二致病性 n肠球菌所致的感染中最常见者为尿路感 染。 n其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科 术后感染。 n肠球菌也是引起老年病人和严重基础疾 病患者败血症的常见病原菌。 三微生物学检验 （一）标本采集 （二）检验程序 （三）检验方法 1直接镜检 2分离培养 ：叠氮胆汁七叶苷琼脂 3鉴定 PYR试验 胆汁七叶苷试验 盐耐受试验 2018/12/15 （四）结果评价和报告 对重症感染患者分离的肠球菌应鉴 定到种，由于医院内感染肠球菌呈上升 趋势，故对肠球菌分型的流行病学调查 显得越来越重要。 G+C空气生长 + - 触酶 厌氧球菌 + - 葡O/F optochin试验 或O F - + 微球菌 血浆凝固酶 胆汁七叶苷 肺炎链球菌 - + + - 其它葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 65g/L NaCl 溶血 - + D群链球菌 肠球菌 草绿色链球菌 杆菌肽试验 - + CAMP试验 A群链球 菌 + - B群链球菌 其它群链球菌 第四节 奈瑟菌属 奈瑟菌属 共同点： 革兰阴性球菌、单个或成对，或成堆。 无芽胞、无鞭毛、有菌毛。 专性需氧 触酶试验（+） 氧化酶试验（+） 种类：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9 种 致病菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌 一脑膜炎奈瑟菌 （一）生物学特性 形态染色 培养特点 生化反应 抗原构造 抵抗力 1.形态染色 革兰阴性双球菌，菌体呈肾形或豆形， 成对排列，凹面相对。 新分离菌株有菌毛和荚膜。 在患者脑脊液中位于中性粒细胞内。 2.培养特性生长条件 营养要求高，在普通营养琼脂上不生长 ，在血液、血清培养基中才能生长。 专性需氧，在厌氧条件下不生长或生长 不佳，初次分离需5CO2。 最适温度35，40不生长。 可产生自溶酶。 常用培养基及生长现象 巧克力色血平板：属营养培养基，菌落 无色、光滑湿润、边缘整齐、有光泽， 似露滴状，易乳化。 卵黄双抗平板（EPV）：属选择平板， 用于含杂菌的鼻咽拭标本的分离培养， 菌落无色、光滑湿润、较大、扁平。 3.生化反应 l氧化酶（+） l能分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气。 l不分解蔗糖。 4.抗原构造与分型 v荚膜多糖抗原：群特异性，可将本菌分成13 个血清群，我国以A群为主，占95。 v外膜蛋白抗原：型特异性。 v脂多糖抗原：无特异性，与大肠埃希菌有共 同抗原。 v核蛋白抗原：无特异性，与细菌毒力有关。 5.抵抗力 抵抗力弱 对寒冷、湿热、干燥、消毒剂、紫外线 均敏感 能产生自溶酶 （二）致病性和免疫性 传染源：病人、带菌者 传染途径：呼吸道飞沫传染 致病物质：内毒素（损伤小血管）、荚膜（抗 吞噬）、菌毛（粘附）。 所致疾病：流行性脑脊髓膜炎 临床表现：上呼吸道感染期：鼻咽炎等；菌血 症期：高热、出血点或瘀血点；脑脊髓膜炎期 ：头痛、呕吐、颈项强直。 免疫性：可产生群特异性抗体，但不持久。 特异性预防：接种脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖疫苗 。 （三）微生物学检查法 标本采集 检验程序 检验方法 1.标本采集 流脑病人：血液、脑脊液、瘀血点 带菌者检查：鼻咽拭 脑脊液、瘀血点 血液 分离培养 （卵黄双抗平板） 增菌培养直接涂片染色 分离培养 （巧克力色平板） 可疑菌落、盐水自凝 无自凝 报告阴性 涂片染色生化反应 自凝、色素 初步报告 鼻咽拭子 生长特性血清学分群 3.检验方法 直接镜检 分离培养 鉴定 快速诊断法 直接涂片镜检 脑脊液沉淀物、瘀血点涂片革兰染色镜 检： 若发现中性粒细胞内、外有革兰阴性双 球菌、呈肾形，可作初步诊断。 培养检查 增菌培养：血液、脑脊液接种增菌液，5 CO2培养。 分离培养：将增菌培养物转种巧克力色平 板，置5CO2环境，35培养1824小 时。 可疑菌落：观察菌落特征，取可疑菌落涂 片染色镜检，作盐水自凝试验，盐水中无 自凝。 鉴定试验 形态染色：革兰阴性、肾形、成双排列 氧化酶（+） 触酶（+） 糖代谢试验：发酵葡萄糖、麦芽糖。注意： 此菌分解糖类只产生少量的酸，应随时记录 结果。 生长特性试验：生长温度、营养需求 血清学鉴定与分群：检测脑膜炎奈瑟菌荚膜 多糖抗原，可与相应诊断血清发生凝集 快速鉴定试验 荧光抗体法 荧光素-流脑抗体 +待检物荧光 （直接法） 流脑抗体 +待检物 +羊抗兔荧光抗体荧 光 （间接法） 间接血凝试验 流脑多糖抗原致敏红细胞 +待检血清 反向血凝试验 流脑抗体致敏红细胞 +标本中可溶性流脑抗 原 鉴定依据 形态染色：革兰阴性球菌成双排列 菌落典型：光滑型，易乳化，盐水中无 自凝 生化反应：氧化酶、触酶，发酵葡 萄糖、麦芽糖 生长条件：普通培养基不生长 血清学：与相应分群血清凝集 二淋病奈瑟菌 （一）生物学特性 形态染色 生长条件 菌落特征 生化反应 抵抗力 1.形态染色 革兰阴性，菌体呈肾形或球形，成对排列， 两球菌接触面平坦，形似咖啡豆。 有荚膜、菌毛 淋球菌多侵犯尿道粘膜，急性期多位于中性 粒细胞内，慢性期则多在细胞外 根据菌毛分型：T1T5 T1、T2有菌毛 T3、T4、T5无菌毛 2.生长条件 营养要求更高 专性需氧 初次分离需供给510 CO2 ，过高的 CO2浓度反而抑制其生长。 30或36.5 不生长 3.常用培养基和菌落特征 巧克力色培养基 TM培养基（含万古霉素、多粘菌素、 制霉菌素） MTM培养基（改良的TM） 菌落特征：圆形、光滑、湿润、灰白色 、易乳化 4.生化反应 氧化酶，触酶 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖：，产 酸不产气 30 H2O2试验： 5.抵抗力 抵抗力极弱 对温度变化敏感 对干燥敏感 对化学消毒剂敏感 易形成耐药性 （二）致病性和免疫性 1致病物质：菌毛、外膜蛋白、IgA1蛋白水解酶、 脂多糖和铁调节蛋白。 2所致疾病： 3免疫性 淋病的临床类型可分为： 单纯淋病； 盆腔炎性疾病； 口咽部和肛门直肠淋病； 结膜炎； 播散性淋病。 2018/12/15 （三）微生物学检查法 标本采集 检验程序 检验方法 结果评价 1.标本采集 l正确取材 女性病人标本：取宫颈内膜分泌物 男性病人标本：取尿道口脓性分泌物 l注意事项： n 最好在治疗前采集标本。 n 取材前不论有无症状一律禁用消毒药。 n 对女性患者取宫颈口标本时不要接触阴道粘膜 。 n 由于本菌抵抗力甚弱，标本采集必须迅速并立 即送检，最好床边接种，立即培养。 分泌物 直接涂片染色 分离培养 可疑菌落 涂片染色生化反应 初步报告 生长特性 3.检验方法 直接镜检 分离培养 生化反应 直接涂片 分泌物涂片，做革兰染色 急性炎症期中性粒细胞内可见革兰阴性双球菌 。 灵敏度男性可达9095% 、女性可达5070 。 无症状淋病或轻症患者，尤其是女性，检出率 低，只做涂片可漏诊40以上。 培养检查 取材部位准确 培养基预温 立即接种 最好床边接种 合适的培养基 CO2培养 取氧化酶阳性菌落做下一步鉴定 鉴定试验 氧化酶试验，触酶试验 糖分解试验（葡萄糖、麦芽糖、蔗糖 ） 30过氧化氢试验 4.结果评价 男性患者：尿道口分泌物涂片染色灵敏度可 达9095%，特异性95100%，显微镜检见中 性粒细胞内和细胞间革兰阴性双球菌时，可 以确诊，培养与否视情况作出选择（如需药 敏实验和观察疗效时）。对于无症状或治疗 过程中复查患者，涂片镜检敏感度仅5070% ，应考虑做培养。 4.结果评价 女性患者：涂片镜检结果误判的主要原因是取材 方法的掌握，宫颈口分泌物清除彻底与否对结果 影响较大，如能正确收集样本，涂片检查敏感性 可达5070%，特异性也可达95%。 用阴道涂片检查是目前许多实验室检查常用的方 法，也是造成假阳性误诊的最主要原因，无论操 作技术如何,假阳性结果可高达3070%，故女性 阴道分泌物涂片染色见到中性粒细胞内和细胞间 革兰阴性双球菌时，不能确诊，必须作培养鉴定 。 4.结果评价 鉴于淋病的早期和正确诊断具有重要的社会 意义和影响，故对本病诊断具有重要确证依 据的实验室检查一定要认真慎重。 免疫学等非培养方法只能作为初步诊断方法 ，本病的最后确证还是需要培养和分离出淋 病奈瑟菌，并进