中国胃癌her2检测-指南解读

中国胃癌HER2检测指南解读 （2011版） 概述 本指南推荐IHC与FISH和（或）DSISH相结合的检测策略 o胃癌有必要进行准确的HER2检测 oHER2状态检测首先选用免疫组织化学法（IHC） oIHC 3+的病例视为HER2阳性 oIHC 2+的病例建议进一步行原位杂交（ISH：FISH和或DSISH） 检测，IHC 2+/ISH+的病例视为HER2阳性 oIHC 1+和IHC 0 病例，IHC 2+/ISH - 病例视为HER2阴性 o胃癌HER2检测应在有能力的实验室进行 o检测质量取决于标本的采集、处理过程、IHC/ISH 检测方法和评 判标准的执行 问题一 1. 请问您所在的医院胃癌HER2检测是否属于常规检测项目 ？ A.是 B.否 C.不清楚 问题二 请问您所在的医院，由谁决定是否做胃癌HER2免疫组化检 测？ A. 病理科 B. 外科 C. 肿瘤内科 D. 消化内镜室 问题三 请您对多学科合作对胃癌HER2检测的重要性打分（0-5重要 性逐渐递增），请按投票器选择 A. 0 B. 1 C. 2 D. 3 E. 4 F. 5 胃癌HER2检测 切片 脱水 包埋 固定 HER2检测的相关流程 切片 检测判读 标本 收取 问题四 贵单位胃癌手术标本送到病理科处理的时间？ A 30分钟内 B 1小时内 C 2小时内 D 2小时 E 不清楚 问题五 贵单位手术标本固定时间？ A.不固定直接取材 B.固定时间在8小时内 C.固定时间在12小时左右（过夜） D.固定时间12-24小时 E.不清楚 标本类型 o 原发病灶的手术切除标本 o 原发病灶的胃镜活检标本 l建议取6-8块，以获得足够的样本组织，多点活检对 准确的检测有必要 o 切除标本离体后2030分钟内进行标记、切开、固定等 初步处理后，及时送病理科 o 活检标本的大小2x2x2mm3 o 原发灶活检组织、手术切除组织皆有的病例，建议使用 手术切除组织进行检测 标本采集 问题六 贵单位送检标本采用何种固定液？ A.不用固定液，直接送病理科 B.10%福尔马林固定液（蒸馏水配） C.10%福尔马林固定液（中性缓冲液配） D.10%甲醛固定液 E.不清楚 标本固定 o 采用新鲜配制10%中性缓冲福尔马林作为固定液 o 固定液的量应为组织的10倍 o 手术切除标本的固定时间为848h (至少1h/mm组织) o 活检标本的固定时间不超过24h (至少1h/mm组织) o 不宜使用其它固定液，非10%中性缓冲福尔马林制剂 可能会妨碍IHC和ISH检测的可靠性 o 不宜用微波快速固定组织 规范的标本固定是HER2检测质量的保障；保存良好的组织 形态，防止细胞内蛋白和核酸的丢失 标本准备 固定1小时固定52小时 固定4小时固定2周 固定时间影响HER2染色结果 固定22小时 图片由 of A Morey, St Vincents Hospital, NSW, Australia提供 固定较差示例：乳腺癌HER2 IHC检测 o 固定较差会导致染色结果 的异质性 o 胞质染色可能是由固定较 差导致 图片由 W Hanna提供 固定较差示例：胃癌HER2 IHC检测 o 固定不完全会导致假阳性检 查结果 o 胞质染色可能由于使用了不 恰当的固定方式 图片由Targos Molecular Pathology.提供 固定较差示例：HER2 ISH检测 图片由 Abbott/Vysis.提供 p固定不完全 - SISH，“空核” p固定不完全导致探针信号较弱或缺失 p过度染色会导致持续性自发荧光 探针信号可能较弱或缺失 HER2检测 HER2过表达的检测HER2扩增的检测 n 免疫组织化学染色方法 （IHC） l 自动化 n 原位杂交方法 （ISH） l FISH l Dual SISH 实验室总体要求 o 应当在有条件的实验室进行，拥有试验所需的仪器 和设备及空间条件 o 实验室掌握包括标本的制备、抗体的选择、抗原修 复方法及其它相关技术；探针的选择、检测预处理 方法及其它相关技术 o 实验室经过严格的内部和外部质量控制程序验证， 建立完善的实验室标准操作流程（SOP） o 实验室技术员具备相关资质及经过合格培训 HER2检测-IHC p IHC方法 l 试验方法根据实验室条件可以选择手工染 色、半自动染色和全自动免疫组化染色 l 建议使用全自动染色方法 p 建议使用我国相关部门（SFDA）批准的试剂盒 p 自行组配和分装的抗体必须经过严格的内部和外部质 量控制程序验证，并与权威机构批准的检测试剂盒进 行比对，以保证检测结果的可靠性 IHC抗体 结果判读和分析 普通光学显微镜荧光显微镜 p 病理医生需要经过培训 p IHC评分标准和乳腺癌有所不同 p 样本：活检组织和切除组织有所不同 p 观察：高异质性需要全面观察所有肿瘤组织 p 沟通：结果不确定时需要与肿瘤科医生沟通 IHC判读标准 （参照ToGA经验，所有图片来自SCC） 0 无反应或肿瘤细胞膜染色10% 1+ 10%肿瘤细胞微弱或隐约膜染色， 细胞膜仅部分区域着色 2+ 10%肿瘤细胞弱到中度的完全或 细胞基底部和两侧边膜染色 3+ 10%肿瘤细胞完全性或基底部和 两侧边膜强染色（对3+的病例同时 表明百分率，注明是否有异质性） IHC结果判读时应注意：细胞质着色应忽略不计，正常胃黏膜上皮细胞不应着色 HER2检测-IHC o 原位杂交检测方法（ISH） 荧光原位杂交（FISH ） 双色银染原位杂交（Dual SISH， DSISH） o 探针 建议使用我国相关部门（SFDA）批准的试剂盒 FISH，HER2红色信号增多，局部呈 簇状，CEP17信号1-2个， 比值7.2，有扩增（100） FISH，HER2和CEP17信号各1-2 个，比值1.65，无扩增（100） FISH：严格按照试剂盒标准程序执行 HER2检测-FISH 图片来自SCC DSISH HER2黑色信号扩增，呈簇状 ；CEP17红色信号1-2个；比值15， 有扩增(100) DSISH HER2和CEP17信号各1-2个 ，比值0.8，无扩增(100) DSISH：实验室应先进行严格的对比试验和程序优化 严格按照所用全自动染色仪器的优化程序和SOP执行 HER2检测-DSISH 图片来自SCC 请问贵院是否有统一的HER2检测病理报告格式？ A. 是 B. 否 问题七 检测报告内容 胃癌HER2 IHC/ISH检测报告 临床信息： 姓名 性别 年龄 门诊住院号 送检医师联系方式 检测日期 年 月 日 标本信息： 病理号/蜡块号 标本类型： 手术切除 活检 肿瘤部位： 胃食道交界处 胃底 胃体 胃窦 幽门管 转移灶 标本固定液种类（10中性缓冲福尔马林）是否 标本离体至固定时间(如有记录) 分钟 标本固定的时间(如有记录) 分钟 组织学类型/分级 Laurn分型 临床分期 T N M HER2 IHC 检测报告 检测信息： 抗体信息(克隆号生产商) 检测方法 手工/半自动 全自动 对照设置情况 3+ 0 样本量是否足够用于评估是否 具有膜着色的肿瘤细胞的百分比 % 着色的异质性有无 肿瘤细胞膜染色模式 完整 基底和侧膜（U-shaped) 两者皆有 判读结果：0 l+ 2+ 3+ 无法判读 结论：阳性；不确定；阴性；无法判读 检测人员：技术员 病理医师 HER2 ISH 检测报告 检测信息： 探针信息(生产商/商品号) 检测方法 对照设置情况 阳性对照 阴性对照 样本量是否足够用于评估是否 IHC检测结果0 l+ 2+ 3+ 无法判读 判读结果： 用于评估的肿瘤细胞数量 HER2信号总数CEPl7信号总数 HER2信号数平均值细胞核 CEPl7信号数平均值细胞核 17号染色体是否为多体是否 结论： 阳性(扩增) 阴性(无扩增) 无法判读 检测人员：技术员 病理医生 实验室质量控制 （1） n HER2蛋白和基因扩增的检测均应在内、外部质量控制 良好的病理实验室进行 n 检测必须严格按照指南要求执行，以保证结果可靠 n 不具备HER2检测条件的单位应按照指南要求，妥善处 理和准备好标本，提供给有质量保证的病理实验室进 行检测 实验室质量控制 （2） 实验室内、外部质量控制和SOP的主要要求如下 n 准备开展GC HER2检测的实验室应选择12家已较好开 展该项检测的实验进行25100例标本的对比验证 n 或通过参加有关外部质量控制活动来实现，外部质控阳 性和阴性结果的一致性应达到90以上，每年应进行1 2次 n 从事GC HER2检测的实验室技术人员和病理医师应进行 必要的培训和资格考核 实验室质量控制 （3） n 实验室应建立完善的SOP，并做好每次检测情况的 记录和存档工作 n 任何改变操作程序和试剂的行为均应重新进行严格 的验证 n 内部质控应包括同一组织不同批次染色结果的重复 性分析，每次染色阳性、阴性对照的设置，如有可 能还应没置包括低表达低扩增对照 n 检测相关的仪器和设备需定期维护、校验 p 类类似乳腺癌 p 亮视视野检测检测方法有优势优势 Her2检测检测 流程 样样本收集镜镜下观观察 p 异质质性高 p 需要观观察整张张切片 检测检测 所需时间时间 p 胃癌进进展快，宜及时获时获得结结果 p 多学科参与 结结果判读读 p 与乳腺癌有所不同 胃癌HER2检测： 基本过程和特殊性 p 数量、质质量合适的含有肿肿 瘤组织组织的活检检标标本 p 具有代表性的手术术切除标标 本 o 多学科协作共同努力 医生和技术员 o 知识更新和观念改变 患者和医生 多学科协作检测HER2：临床医生之角色 采样 手术和胃镜活检（6-8块组织） 固定 10%中性缓冲福尔马林 样本送检（离体时间）30分钟 结果解读 HER2 + IHC 0 1+ 2+ 3+ HER2 阳性 多学科协作检测HER2：病理医生之角色 Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007;25:118145. 检测结果分析 检查备检标本是否可用 正确设立内部对照组 依照国际评分系统进行评分 检测结果报告 使用标准化HER2检测结果报告表 报告内容应包括标本取样，固定，检测方法及评分系统 多学科检测治疗小组(MDT)会议 学科协作检测HER2：技术员之角色 l处理: 避免影响检测结果之因素 - 最佳固定时间及固定方法 - 石蜡包埋 - 组织切片的合理时间 (最好于HER2检测前切片) - 标本脱蜡 l方法: 使用标准化/经验证之检测步骤 - IHC - ISH FISH Dual SISH Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007;25:118