147株住院患者呼吸道念珠菌感染的鉴定及耐药性分析(1)

147147 株住院患者呼吸道念珠菌感染的鉴株住院患者呼吸道念珠菌感染的鉴 定及耐药性分析定及耐药性分析(1)(1) 作者：周小明严子禾胡锡池 【关键词】念珠菌；,真菌鉴定；,耐药性分析, 摘要：目的对呼吸道分离的念珠菌进行鉴定并做耐药 性分析。方法采用科玛嘉显色培养基对分离的 147 株念珠 菌进行菌种鉴定，并用 Rosco 商品化纸片进行耐药性分析。 结果呼吸道念珠菌感染中以白念珠菌为主，非白念珠菌感 染呈上升趋势。两性霉素、制霉菌素耐药率最低，分别为 61%，34%，其次为伊曲康唑，氟康唑耐药率最高，克柔念 珠菌是耐药性较强的念珠菌，依次是光滑念珠菌、热带念 珠菌；非白念珠菌与白念珠菌相比耐药率有显著差异。有 387%的念珠菌对 2 种或 2 种以上抗真菌药物耐药。结论呼 吸道念珠菌感染呈上升趋势，应加强念珠菌的检测和耐药 性分析。 关键词：念珠菌；真菌鉴定；耐药性分析 近年来随着广谱抗生素的广泛应用，肿瘤化疗、器官 移植的开展以及免疫力低下患者的增多，由深部真菌引起 的机会性感染日益增加，尤其多见于呼吸道标本中。患者 往往有严重的基础疾病，并长期使用抗生素，由于条件致 病性念珠菌感染病例不断增多，又使得真菌治疗后的耐药 问题日渐突出。我们对 XX 年 6 月XX 年 11 月呼吸道分离 的 147 株念珠菌菌种及药敏结果进行回顾分析，现报道如 下。 1 材料与方法 试验菌株收集 XX 年 6 月XX 年 11 月我院住院患者痰 标本中分离的 147 株念珠菌。 质控菌株白念珠菌 ATCC64548。 药敏纸片及真菌药敏琼脂酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、 两性霉素 B、制霉菌素、咪康唑和特比奈芬等 7 种药敏纸片 及改良 Shadomy 琼脂平板均购自丹麦 Rosco 公司。 培养与鉴定菌落分离于沙保弱琼脂培养基，用科玛嘉 显色培养基及 VITEK2 真菌鉴定板鉴定到种。 药敏试验接种液的配制挑取单个菌落于无菌盐水，调 制成为 15108CFU/ml 的菌悬液，再用生理盐水 11 稀释。 克柔念珠菌先配成 15108CFU/ml 的菌悬液，再用生理盐 水 110 稀释。按资料所提供的方法和标准进行操作 Shadomy 琼脂培养先置 35干燥 2025min，吸取 05ml 接 种液倾注于斜面，均匀涂抹，吸走多余的液体，35干燥 10min，贴药敏纸片，培养 1824h 后判读结果。判读标准 参考 Rosco 公司提供的药敏试验标准。 统计学方法用软件包分析结果，耐药率的比较用 2 检验。 2 结果 147 株念珠菌鉴定白念珠菌占 755%，光滑念珠菌占 17%，热带念珠菌占 54%，克柔念珠菌占 20%，白念珠菌的 检出率明显高于光滑念珠菌。 147 株念珠菌对真菌药物的耐药率结果见表 1。 白念珠菌与非白念珠菌的耐药性比较结果见表 2。 3 讨论 近年来，我们发现真菌感染以呼吸道感染最严重，表 1147 株念珠菌对真菌药物的耐药率表 2 白念珠菌与非白念 珠菌的耐药性比较可能是患者的呼吸道防御屏障受损，呼 吸功能不全，免疫功能低下，真菌在呼吸道粘膜易于定植 所致，在真菌感染中白念珠菌是人类最常见的条件致病菌 1 。近年来，人类念珠菌感染有由白念珠菌转向其他非 白念珠菌感染的趋势3 。本研究非白念珠菌感染占 245%，这也与国内、外的报道一致4 。以往热带念珠菌 在真菌感染中居第 2 位，本研究中已排列第 3 位，说明各 真菌构成比也在发生一定的改变，非白念珠菌的感染呈上 升趋势，有文献报道，氟康唑对克柔念珠菌引起的感染无 效，与我实验相符，酮康唑对热带念珠菌疗效不佳5 。 随着氟康唑应用的日益广泛，白念珠菌较其他念珠菌对氟 康唑敏感而被杀死，导致念珠菌症向非白念珠菌症变迁， 且那些感染菌对抗真菌药物的耐药率明显高于白念珠菌， 非白念珠菌与白念珠菌对抗真菌药物的耐药率相比有显著 差异。我们还发现，多重感染的患者长期接受抗真菌药物 治疗，使其对常用抗真菌药物敏感性降低，出现念珠菌的 多重耐药现象，导致少见的致病性真菌寄生和感染现象增 加。本研究有 387%的念珠菌对 2 种或 2 种以上抗真菌药物 耐药，只有 32%的念珠菌对所有测试的抗真菌药物均敏感。 痰标本中 147 株念珠菌对 7 种常用抗真菌药物的耐药率显 示，两性霉素 B 和制霉菌素的耐药率最低，伊曲康唑其次， 氟康唑的耐药率最高。氟康唑不良反应小，较安全，能广 泛渗透体液组织器官，对念珠菌属、隐球菌属感染疗效较 好，目前临床广泛使用，部分念珠菌已出现耐药，我们共 检出 84 株耐氟康唑的念珠菌，以光滑念珠菌和热带念珠菌 的比例稍高；耐伊曲康唑念珠菌 25 株，以克柔念珠菌和光 滑念珠菌比例高；耐酮康唑的念珠菌 70 株，以光滑念珠菌 和热带念珠菌为主；耐咪康唑、特比奈芬的念珠菌为 49 株， 均以克柔念珠菌和热带念珠菌比例高。综上所述，克柔念 珠菌对酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、咪康唑和特比奈芬的 耐药株均占半数以上，故认为是耐药性较强的念珠菌，依 次为光滑念珠菌、热带念珠菌。白念珠菌尽管有 1/2 菌株 对氟康唑耐药，但对其他抗真菌药物的敏感性仍然较好， 因此，将临床分离的念珠菌鉴定至种水平，对临床抗真菌 感染治疗有着重要的指导意义。建议有严重免疫功能低下 的患者，应避免长期使用唑类药物。此外，微生物科应与 临床密切配合，加强真菌的检测和耐药性监测工作，合理 选择用药，使患者得到及时、准确的医治，以免贻误治疗 影响预后。 参考文献 1李影林.临床微生物学及检验M.第 2 版.北京： 人民卫生出版社，1995：619 2 BeckSagueCM,JarvisTR.Seculartrendsintheepidemiology ofnosocomialfungalinfectionsintheUnitedStatesJ. JInfectDis,1993,167:1247 3王文莉，王端礼.念珠菌对咪唑类药物耐药现象 的研究