病原微生物实验室的消毒与灭菌

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 病原微生物实验室的消毒与灭菌 消毒和灭菌是保护人员和环境不 被病原微生物感染和污染的重要环节。 含有病原微生物的废物必须经过灭菌才 能作为普通废物处理；对操作中可能产 生的迸溅或泄漏，必须通过消毒达到对 病原微生物的杀灭，对操作人员进行保 护，对环境保护。消毒和灭菌的基本常 识对于实验室生物安全是至关重要的。 中国论文网 /1/view-12858258.htm 消毒是通过物理或化学手段杀灭 或清除病原微生物，但不一定能杀死所 有细菌芽孢的方法。灭菌是杀灭物体上 的所有微生物，包括病原性和非病原性 微生物、细菌繁殖体和芽孢的一切方法 1。消毒与灭菌的方法可分为物理方法 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 和化学方法两大类：物理消毒灭菌法： 包括热力法、射线法和过滤法三种。超 声波、干燥、冷冻也能杀菌抑菌。热力 灭菌法是利用热能去变性蛋白质或核酸、 破坏细胞膜或胞膜来实现杀死微生物。 分干热灭菌和湿热灭菌两大类。化学 消毒灭菌法：消毒剂在常用的浓度下， 只对细胞的繁殖体有效，对其芽孢则需 要提高消毒剂的浓度和延长作用时间2。 1 物理消毒灭菌法 1.1 热力灭菌法 1.1.1 干热灭菌法 常用的干热灭 菌法有：干烤、烧灼、焚烧。焚烧常用 于可废弃的污染物及人或动物的尸体的 灭菌；烧灼用于微生物实验室内接种微 生物所用器材的灭菌，也可用于外科手 术器材的应急处理。干烤灭菌可用于耐 高温的玻璃制品、金属制品、糖瓷制品、 油鹊拿鹁 。干烤灭菌是在干烤箱 内进行的。使用烤箱灭菌时，要求器械 和用品应洗净、凉干或擦干，物品包装 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 不易过大，粉剂和油剂厚度不宜超过 1.3cm，箱内装载物品不宜超过烤箱高 度的 2/3，物品间应留有空隙。灭菌时 间应从温度升高到要求时算起，一般 170时需 60 min，160时需 120 min。 1.1.2 常用的湿热灭菌方法 煮沸、 流通蒸汽、低热消毒（巴氏消毒） 、间 歇灭菌（廷德氏灭菌） 、高压蒸汽灭菌 等方法。高压蒸汽灭菌法可杀灭包括芽 孢在内的所有微生物，是灭菌效果最好、 应用最广的灭菌方法。本实验室使用的 是全自动立式高压灭菌器，在 103.4KPa 蒸汽压下，温度达到 121.3，维持 1520 min。适用于普通培养基、生理 盐水、手术器戒、玻璃容器及注射器、 敷料等物品的灭菌。 1.2 射线灭菌法 实验室常用的射 线是紫外线，杀菌作用最强的波段是 250260 nm。当微生物被紫外线照射 可引起细胞内成分，特别是核酸、原浆 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 蛋白与酶的化学变化，从而使之死亡。 紫外线可以杀灭各种微生物。紫外线灯 的实际应用是对空气的消毒，用紫外线 消毒空气是一种简单、方便、廉价、效 果可靠的方法，可用于病房、手术室、 微生物实验室、无菌车间等场所的空气 消毒。本实验室每次微生物实验课后都 要用紫外线灯照射 30 min，杀菌效果非 常好。紫外线可损伤皮肤和角膜，应注 意防护。 2 化学消毒灭菌法 正确使用化学消毒剂可以确保实 验场所的安全，减少来自感染性物质的 危险。化学消毒剂的作用时间因品种和 厂商而异，应按产品说明书配制和使用。 2.1 醛类消毒剂 常用有甲醛和戊 二醛两种。这两种消毒剂对微生物的作 用主要依靠醛基使菌体蛋白质及核酸烷 基化，引起蛋白质变性、凝固，造成微 生物死亡。 甲醛、戊二醛的水溶液与气体都 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 有广谱杀菌作用，对细菌繁殖体、芽胞、 分枝杆菌、真菌、病毒都有较强的杀灭 作用。2% 戊二醛碱性水溶液，作用 2 min 可杀灭细菌繁殖体，但对细菌芽胞， 则需作用 3 h 才能杀灭。甲醛气体浓度 15 mg/L，作用 2 h 可杀灭细菌繁殖体， 作用 12 h 才能杀灭细菌芽胞。甲醛可用 于大多数物品的消毒或灭菌，特别适于 忌湿物品如毛、皮制品的熏蒸消毒，生 物制品的防腐，医疗用品的灭菌，但不 适于食品的消毒。戊二醛常用于灭菌或 消毒医疗器械，特别适用于金属器械和 忌热的精密仪器，如内窥镜、麻醉装置、 人工呼吸器等。也可用于卫生防疫消毒。 戊二醛多用于液体浸泡和擦拭消毒。用 2%戊二醛溶液（碱性、酸性强化或中 性均可） ，浸泡医疗器械，一般细菌繁 殖体消毒浸泡 10 min，肝炎病毒消毒浸 泡 30 min，要完全灭芽胞应浸泡 410 h。用 2%戊二醛溶液拭门、窗、桌、椅、 床、墙或地面等，戊二醛一般腐蚀性弱， 戊二醛对人和动物的皮肤粘膜有刺激性， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 特别接触浓溶液时应戴橡皮手套，防止 溅入眼内或吸入，万一接触眼睛或皮肤 立即用大量水冲洗。戊二醛可引起皮肤 过敏反应，但对人的全身性毒性反应轻 微。甲醛和戊二醛必须在通风橱或通风 良好的地方使用。 2.2 含氯消毒剂 杀菌谱广，高效、 低毒，对细菌繁殖体、病毒、真菌孢子 及细菌芽胞都有杀灭作用，广泛应用于 实验废弃物、试验器械、环境、地面、 空气等。浸泡法：将待消毒的物品放 入装有含氯消毒剂的容器内，加盖。对 细菌繁殖体污染的物品的消毒，用含有 效氯 200 mg/L 的消毒剂浸泡 10 min， 对结核杆菌、肝炎病毒和细菌芽胞污染 物品的消毒，用含有效氯 2000 mg/L 消 毒液浸泡 30 min。擦拭法：对不能用 浸泡消毒的物品可用擦拭法。消毒所用 药物浓度和作用时间参见浸泡法。喷 洒法：对一般污染的物品表面，用 1000 mg/L 的消毒液均匀喷洒（墙面：200 ml/m2；水泥地面，350 ml/m2，土质地 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 面，1000 ml/m2） ，作用 30 min 以上； 对肝炎病毒和结核杆菌污染的表面的消 毒，用含有效氯 2000 mg/L 的消毒液均 匀喷洒（喷洒量同前） ，作用 60 min 以 上。本实验室经常用 1000 mg/L 的含氯 消毒液对实验室的地面、实验台面和空 气进行喷洒消毒。 2.3 碘伏及其他含碘消毒剂 含碘 消毒剂是一类用途广泛的广谱消毒剂， 目前，医学上常用的碘消毒剂有碘酊和 碘伏，碘酊及碘伏是中效消毒剂，可以 杀灭细菌芽胞以外的各种致病性微生物， 常用于手及皮肤表面的消毒。皮肤、伤 口消毒时，用 2%碘酊涂搽，作用 1 min，需要时可用 70%乙醇将残余碘擦 净。碘伏一般稀释成一定浓度的水溶液 使用，卫生洗手消毒用 500 mg/L 有效 碘溶液浸泡 2 min；对外科洗手用含有 效碘 30005000 mg/L 擦拭 3 min。 2.4 季铵盐类消毒剂 季铵盐类消 毒剂是一种阳离子表面活性剂。此类消 毒剂是低效消毒剂，其杀菌机制主要是 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 损伤细胞膜，灭活氧化酶，同时可使蛋 白质变性凝固而使细菌死亡。这类消毒 剂中最常用的是新洁尔灭（十二烷基二 甲基苯甲基溴化铵） 。新洁尔灭耐光、 耐热，性质较稳定，可长期贮存。新洁 尔灭对化脓性病原菌、肠道菌与部分病 毒有一定的杀灭能力；对结核杆菌与真 菌的杀灭效果不好；对细菌芽胞仅有抑 菌作用。对污染物品表面消毒，可用 0.10.5% 浓度溶液喷洒、浸泡或擦抹， 作用 1060 min，水质过硬，浓度应提 高 12 倍。消毒皮肤可用 0.1%0.5% 浓度溶液涂抹、浸泡。消毒粘膜可用 0.02%。本实验室常用 0.1%0.5%的新