血液采集与检测

血液采集与检测北京市红十字会血液中心 邱艳一、献血类型1. 个人自愿无偿献血献血者献血前咨询和体检合格后，做血型、血色素、快速 HBsAg 检测，合格后采血，采集的血液到中心后做两次血液筛查。2. 团体无偿献血献血者献血前咨询和体检合格后，做血型、血色素、快速 HBsAg 检测，合格后采血，采集的血液到中心后做两次血液筛查。3. 指标无偿献血献血者献血前体检合格后，做血型、血色素、 ALT 、 HBsAg 、抗 -HIV 、抗 -HCV 和梅毒的全项检测，合格后采血，血液到中心后做两次血液筛查。4. 家庭替代自愿无偿献血献血者献血前咨询和体检合格后，做血型、血色素、 ALT 、 HBsAg 、抗 -HIV 、抗 -HCV 和梅毒的全项检测，合格后采血，采集的血液复检合格后应用于指定的病人。二、献血方式1. 全血2. 成分献血3. 特殊血型献血（ HLA 、稀有血型）特殊血型献 血 ，这个 HLV 稀有血型，比如在我们中心就有一个 Rh 阴性的稀有血型爱心之家，在中国人群里稀有血型只有千分之一到四。但是一旦有一个人发生了大出血，稀有血型他就会用到很多。比如说外伤，一下子用好几千毫升。这个时候我们打电话，他们就会来。稀少血型的定义，基本上是千分之一以下就叫稀有血型。4. 骨髓捐献5. 干细胞献血6. 自体献血自体献血有一定的局限性，比如说癌症的患者在手术视野里收集血，有人会担心是不是有癌细胞混到里面，再给他回输，做完手术，会不会造成一些这个影响。还有一些人本身有代谢方面的疾病，本身就不具备于储存血和自体血采出来以后预存的。所以也有一定的局限性。三、献血者资格筛选献血者资格筛查有三个部分：献血者的登记要求、献血者的健康咨询和献血者的初筛化验。这个在全国基本上都是这一样的，因为这都是按照法律法规来的。每个血液中心都是有自己的质量管理体系，血站质量管理规范里边都要求有体检表。1. 献血者登记要求（ 1 ） 献血间隔期：献血法规定 全血，献全血之间要间隔 6 个月，全血到血小板要间隔 3 个月，血小板和血小板之间要间隔 2 周。（ 2 ） 饮食： 过油过腻的乳糜血，采出来的血也是不能用的。（ 3 ）体重： 登记之前都会先询问。2. 献血者健康征询第一部分献血前的健康征询，第一保护献血者的健康，第二保护受血者的健康。如果有传染病，输了血以后，对这个受血者也是有影响的。比如从现在 24 小时、3 天、5 天，包括后边心血管、呼吸各个系统的疾病都有一个自我排除。所谓的征询不是献血者自己看，自己里排查，如果说有医学术语和医学的知识不够的话，有体检大夫给做解释。健康征询完了以后会得出三个结论，是不是可以献血，是不是不能献血，还有暂缓献血。不能献血，就是你现在不能献血了。不能献血，意思说永远都不能献血了。比如乙肝表面抗原阳性，那你就永远终身都不能献血了。暂缓献血，有各种情况，如感冒了，发烧了，或者说在一个特殊的生理期，那你就暂缓献血。3. 献血者初筛化验（1） 乙肝、梅毒、艾滋（2） 血常规（机采）、血红蛋白（全血）（3） 转氨酶（4） 中重度乳糜血四、 血液采集1. 全血的采集采用特定的方法将符合要求的献血者体内一定量外周静脉血采集至塑料血袋内，与一定量的保养液混合而成的血液制剂。（ 1 ）采血： 采血前的准备、采血过程、采血后的处理及献血不良反应的处理。（ 2 ）对采血时间要求： 200 ml 全血采集时间 5 min ，或 400 ml 全血采集时间 10 min ，应给予特殊标识，所采集的全血不可用于制备血小板。200ml 全血采集时间 7 min ，或 400 ml 全血采集时间 13 min ，所采集的全血不可用于制备新鲜冰冻血浆。2. 血液采集（ 1 ）自动摇摆仪，避免血液凝集。（ 2 ） 细菌污染：常规消毒方法；全血和机采献血静脉穿刺后前 20 30ml 血液放弃（被检出的细菌几乎都是皮肤常在菌）。3. 全血的保存（ 1 ）在保存期期末输入人体 24 小时后的红细胞存活率在 70% 以上。（ 2 ） 保养液：以抗凝剂、葡萄糖等为主要成分的用于防止血液凝固、维持血液内各种组分活性和生理功能的一类药剂。（ 3 ） 保存运输温度： 2 6 ， -80 。4. 血液保养液配方及保存时间幻灯 11 显示的是全血保养液的配方。国内有 ACDA，国外还有 CPD。国内可能是 35 天，在国外现在基本上都是 40 多天。5. 全血保存过程中生化指标的变化幻灯 12 显示的是 全血保存过程中生化指标的变化。 在储存过程中，不管哪一种，pH 值都会下降。21 天的话不能低于 6.7。五、输血传播传染病的检测国内主要是乙肝表面抗原、C 肝抗体、艾滋病抗体，现在有核酸、梅毒、转氨酶。国外不同的国家检测项目很多，比如说丙肝 BCD、逆转录病毒，大部分的西方国家都检查人类 T 淋巴细胞病毒，因为它跟白血病有关系。美国做新罗病毒。巨细胞病毒，他们也筛，因为移植的病人必须是阴性的。这个输血传染病会有好多策略，如献血者的招募，就是低危人群筛查等。美国从 1983 年到 2001 年用核酸检测，不同措施的感染率都很低，甚至到五十万分之一。比如艾滋，输 50 万单位可能有一个。现在艾滋的残余风险度在百万分之一，就是有一百万的单位红细胞输给病人，有可能发生一例。六、红细胞血型抗原系统及检测Landsteiner1868 年 6 月 14 日出生于维也纳， 1943 年 6 月 25 日在纽约去世。在他的一生中，发现了 ABO 、 MN 、 P 、 Rh 等许多血型，赢得了 “ 血型之父 ” 的誉称。 1930 年， Landsteiner 被授予诺贝尔医学生理学奖。 Landsteiner 生日 6 月 14 日，被确定为国际无偿献血日。1. 血型分类命名（ 1 ）分类：血型系统 (30 个 ) 、血型集合（ 5 个）、低频 700 系列和高频 901 系列。（ 2 ） 命名： ISBT 数字方式， 001.001 为 A 抗原，前三个数代表系统，后三个数代表抗原特异性。 ISBT 字母 + 数字方式：字母代表系统，数字代表抗原在系统内编号，如 ABO 1 代表 A 抗原 。2. 血型抗体（ 1 ） 血型抗体产生一般规律：抗体免疫应答；天然抗体与免疫抗体；规则抗体与不规则抗体。规则抗体： ABO 系统的抗体具有规律性，即红细胞上缺乏某抗原则血清中存在所缺乏抗原对应的抗体。不规则抗体（额外抗体）： ABO 系统以外的其他血型系统的抗体，其产生没有规律性。（ 2 ） 血型抗体种类：主要是 IgM 和 IgG 抗体。3. ABO 血型系统幻灯 19 显示的是 ABO 血型系统。 ABO 血型包括 A 型、B 型、AB 型、O 型。A 型就有抗 B， B 型就有抗 A，AB 型就是没有抗体，O 型的就是两种抗体都有。O 型是万能血型，也不能拿来 O 型的全血就输，里边有好多抗 A、抗 B，输进去一样会聚集作用。所以找到难配合的，一般都要把它做洗涤，都要小心，输血不光是红细胞，还有血浆抗体的问题。ABO 血型，A 型的红细胞上有 A 抗原，血清中有抗 B。如果做血型，就是抗 B、抗 A 同时和这个来作用，如果抗 B 凝了，那你就是有 B 抗原就是 B 型，抗 A 凝了就是有 A 抗原，都凝了就是 AB，都不凝就是 O 型血。而且法规上要求， ABO 定型必须包括 正定型 和 反定型 ， 正反定型一致才能确定 ABO 血型。 正定型： 用抗 -A 、抗 -B 血清检查红细胞上的 A 、 B 抗原。 反定型： 用 A 、 B 型试剂细胞检测血清中的抗 -A 、抗 -B 抗体。4 Rh 血型系统简介Rh 血型 系统 有 5 个抗原，即大 C、大 D、大 E、小 c、小 e。熊猫血是 RhD 阴性的。 Rh 血型系统是最复杂的红细胞血型系统，在临床输血中的重要性仅次于 ABO 血型系统。 因为抗原的免疫原性比较强，特别是对新生儿溶血，如果母亲是 Rh 阴性的，父亲是阳性，她怀孕的第一胎孩子有可能是阳性。如果是阳性，母亲是阴性，就容易产生抗体。母亲要再生一个小孩是阳性的话，母亲体内有抗体，通过脐带这个抗体就到了胎儿，所以这个抗体就和婴儿的红细胞结合了，一些产生抗原抗体。孩子还没出生，在妈妈肚子里就开始新生儿溶血。Rh 名称来源于恒河猴（ rh esus monkey ） Rh 系统有三种命名方法，有 Fisher-Race 的 CDE 命名法（如 CDE ， cDE 等）、 Wiener 。的 Rh-Hr 命名法（如 R1:Cde,R2:DcE ）和 Rosenfeld 的数字命名法。 ISBT 命名：系统符号 RH ，数字编号 004 。Rh 系统的抗体有抗 D 、抗 C 、抗 c 、抗 E 和抗 e ，以及复合抗体如抗 CD 、抗 cE 、抗 Ce 等。 抗体性质：大多数是 IgG 性质的抗体，少数是 IgM 性质的抗体。结合补体活性： Rh 系统抗体不结合补体，因此与 ABO 系统抗体引起血管内溶血不同， Rh 抗体主要引起血管外溶血。 抗体的产生： 绝大多数 Rh 系统抗体是通过免疫（输血或妊娠）产生的，且能维持多年。 抗体的临床意义： 大多数能导致严重的新生儿溶血病和严重的输血反应，且再次免疫反应产生的抗体速度快且量大。抗原抗体反应主要是凝集和溶血，凝集了说明有抗原抗体，如果说上面有补体激活了的话，看不到凝集，直接就看到溶血了。HLV 系统，HLV 除了移植有关系，现在与输血也有关系。七、 HLA 抗原系统及检测白细胞抗原在红细胞、白细胞和粒细胞上都有。HLV，最早是法国的 Dausset 发现的，因此也获得了 1980 年的诺贝尔奖。HLA 系统是人体免疫系统的一个重要部分。 具有特殊的遗传特点。位于人第六对染色体短臂 6p21.31 ，全长 3600kb ，共有 224 个基因座位，其中 128 个为功能性基因（有产物表达）， 96 个为假基因。其中约有 40% 的功能基因与免疫功能相关的。幻灯 29 显示的 是 HLV 的命名，也是国际相容性抗原组织来，比如说 HLV 02、01 都是什么意思。HLV 在医学上的应用，一个是与药物反应有关系，与疾病相关。强直性脊柱炎，就是B27 阳性的人 70%相关。与输血有关系，输血反应的非溶血性发热反应都是与白细胞有关系的。器官移植、法医鉴定，比如亲子鉴定都是与 HLA 系统 有关系。HLA 的检测技术 有血清学、细胞学、DNA，现在金标准是 DNA 的方法， 但血清学检测方法有其特别的意义。八、血小板血型抗原及其检测化疗、骨髓移植等，特别是大量输血，已经是成分输血，但是某一种成分输的多的话也不可能。比如大出血的病人，缺氧就给他输红细胞，肯定不行。输进去没有血浆、没有血