C-反应蛋白的临床应用ppt课件

C-反应蛋白及临床应用1Protein Structure CRP结构2C反应蛋白的生理和生化 在细胞因子 IL-6家族诱导下， CRP在肝中合成迅速。 正常合成率为 l 10 mg d， 急性炎症时每 天合成超过 lg/d。 在急性相反应高峰时肝大量合成蛋白，其中20是合成 CRP。 当 IL-6刺激物缺乏时，在 2 4 h内合成率降 至正常。 循环中 CRP半衰期约 19h， 但一旦它与配体结 合，可快速的被清除。 肝外合成对血清水平影响作用很小。3CRP的生物学功能4CRP的生物学功能 -机理结合坏死的内源性物质 在钙离子存在的情况下， CRP能结合坏死的内源性物质和效应细胞 , 当正常的脂质双层结构被破坏致使内部磷脂暴露时， CRP可发生与宿主细胞的结合。在系统性红斑狼疮的鼠模型中，注射 CRP可改善 SLE的状况。 人 CRP基因的多态性导致的低基础水平表达增加了发生系统性狼疮的风险。 CRP量的减少可能与 SLE发病机理有关。 CRP量的减少使结合的细胞碎片减少。5CRP的生物学功能 -机理 结合外源性物质 细菌、真菌、寄生虫中的细胞壁磷酸胆碱。 CRP具有保护机体抗细菌感染的能力。 CRP 保护机体抵抗致命性的细菌脂多糖和各种炎症介子的能力。 6CRP的生物学功能 -机理结合配体的 CRP激活下列生物系统，导致配体的消除： CRP对补体系统的激活 . CRP结合 IgGFcR，增强自然杀伤细胞的活性。 CRP的调理性质，调理即刺激细胞吞噬作用。 CRP和血小板激活因子 (PAF)结合 抑制 PAF刺激的血小板聚集。7CRP的生物学功能 -机理CRP具有多效性的作用。 当抑制干扰素的合成时 ， CRP可诱导 IL-1受体拮抗剂而增加抗炎细胞因子 IL-10的释放 . CRP也可诱导炎症反应。 CRP向上 -调节内皮细胞粘附分子的表达，刺激许多细胞释放 IL-8， 增加血浆纤维蛋白酶原催化剂抑制剂 -1的表达和活性、增加 IL-1, IL-6, IL-18, 和肿瘤坏死因子的释放 . CRP诱导或抑制炎症反应依赖于环境。 8CRP功能 识别和启动靶效应细胞及其产物并将其从组织中清除。 吞噬溶解入侵微生物。9急性相蛋白 CRP合成的生物调控CRP基因位于 1号染色体短臂，只有一个内含子，其分离编码信号肽的区域。肝脏 CRP合成的调节主要发生在转录阶段。 由 IL-6诱导， IL-1可增加此作用。 CRP启动子最近区为 STAT3 和 Rel 蛋白的结合部位。这些因子的相互作用增加 DNA 结合 C/EBP家属成员的稳定性，从而有效地诱导了 CRP基因的表达。神经元细胞、动脉硬化斑块、单核细胞和淋巴细胞也可以合成 CRP。 在这些部位的调节机制还不清楚。10修饰的 CRP(m-CRP) -“Modified“ CRP目前认为 m-CRP是原 CRP的单体。与天然 CRP不同 ,表现在分子大小 ,溶解度 ,抗原性 ,带电荷数等方面的差别 .m-CRP具抗菌作用。m-CRP具有强大地诱发炎症的作用。11方 法 灵敏度 参考献试管内沉淀试验 - JExpMed1930;52561毛细管内沉淀试验 10 20mg/L AmJMed1950;8445改良平板双扩散法 10 20mg/L IntArchAllergy1962改良琼脂柱扩散法 3.0mg/L ProcSocExpBiol1955改良单扩散法 1.0mg/L ActaPatholMicrobiolScand琼脂糖凝胶电泳法 1.0mg/L ClinChimActa1969放射电免疫扩散法 10g/L JClinLabInvest1973补体结合试验 0.6mg/L ProcSocExpBiol1954胶乳凝集试验 1.0mg/L Nature(London)1961高敏乳胶增强浊度 0.35mg/ml Dade Germany2000荧光抗体法 Nature(London)1961放射免疫测定法 3g/L JLabClinMed1976检测方法 12CRP检测方法 - 免疫沉淀试验 检测 CRP原始方法 . 将兔抗 CRP血清吸入毛细管内。 把它浸入被测血浆或血清内 ,因毛细管虹吸作用被吸入 ,与抗 CRP血清形成接触界面。 这种方法较粗糙 ,取得结果时间较长 ,也不太正确可靠 .13CRP检测方法 - 免疫浊度法 可溶性 CRP-Ag与可溶性抗 CRP-Ab反应 ,形成可见的网络状沉淀性 IC复合物点 . IC复合物对光具有散射作用 ,使溶液具有肉眼尚不可见的浊度。 在被测样品中加抗血清后一定时间 ,测定反应系统散射光强度或浊度变化 ,可对被检物及其浊度加以检测。 根据仪器的光学系统 ,浊度法分为散射浊度法和透射浊度法两类。 许多自动化生化分析仪和自动化免疫测定仪都可 CRP测定项目。14CRP检测方法 - 胶乳凝集试验 (LAT) 将强化的兔抗 CRP抗体固定于胶乳微粒上。 加入被测样品后与 CRP在 3分钟内形成肉眼可见的凝集物。 胶乳强化浊度法的灵敏度优于传统浊度法 ,试剂稳定性佳。15检测方法 - 标记免疫测定 ELISA和免疫发光法和化学发光法等都可用于 CRP的测定。 化学发光法的灵敏度和定量精确度可与 RIA媲美 ,而无同位素污染 ,试剂稳定 ,分析速度快。 CRP-POCT(床边试验 )法 ELISA干片法 。 把磷脂酰胆碱 (PC)化学交联固定于载体。 被测 CRP与载体的 PC结合。 被酶标记的抗 CRP单抗结合。 可灵敏、特异性检测 CRP,约 5分钟可得结果 .。16检测方法 - 胶乳增 强 试验 （ shCRP） ： 常 规 CRP检验 方法可在感染或 组织损伤时检测 出 CRP10mg/L。 该检测 方法具有 较 高的灵敏度。 这 个水平（ 0.1 10mg/L） 的 C反 应 蛋白又被称为 超敏 C反 应 蛋白（ hsCRP）。 17CRP检测的评估 1、半定量：胶乳凝集试验等已弃用。 2、定量： 散射免疫比浊法、透射免疫比浊法：是目前常用方法。检测限度为 5 150 mg L ， CV 5% 。 胶乳增强试验 -shCRP检测：很大程度提高了敏感度。酶免疫分析和荧光免疫分析：有潜在的灵敏度优势。 胶乳增强试验 -shCRP检测方法很大程度提高了敏感度。 CRP检测对标本的采集也无特殊要求。 高浓度的类风湿因子可产生 CRP假性升高。 CRP筛查的费用远小于其他心血管检查的费用。18临床应用 _参考范围CRP 参考范围 中值成人和儿童 0.068 8.2 mg/L 0.58 mg/L新生儿，脐血 0.6 mg/L出生后第 4天至 1个月的婴儿 1.6 mg/L分娩母亲 47 mg/L19临床意义 器质性疾病的筛选 急性或慢性炎症如伴有细菌感染。 自身免疫或免疫复合物病。 组织坏死和恶性肿瘤。20临床意义 感染的诊断与鉴别 CRP在细菌感染发生后 6 8h即开始升高， 24 48h达到高峰，在感染消除后其含量急骤下降，一周内可恢复正常。 CRP在病毒感染时无显著升高。 革兰阴性感染：可发生最高水平的 CRP， 有时高达 500 mg L。 革兰阳性菌感染和寄生虫感染：通常引起中等程度的反应，典型的是在 100 mg L 左右。 病毒感染：引起的反应最轻，通常不超过 50 mg L，极少超过 100 mg L。 在细菌感染的急性期， CRP显著升高，寡聚腺苷合成酶正常； 在病毒感染时 CRP水平正常或轻微升高，寡聚腺苷合酶水平升高。21临床意义 C反应蛋白是心血管疾病最强的危险指标， C反应蛋白水平可预测将来心肌梗塞及中风的危险性。 C反应蛋白含量 2.1mg/L的人与 100 mg L表示严重的疾病过程并常表示细菌感染的存在。25临床意义 -抗生素的治疗监测 系列血浆 CRP的测定，可用来作为下列情况的治疗监测： 在许多感染时最有效使用抗生素治疗。 根据 CRP水平的变化来决定抗炎药物的剂量。 在 CRP下降至正常时，中 断抗菌素治疗。 在高危人群缺少微生物学诊断时，为抗生素治疗的指引。26临床意义 -抗生素的治疗监测 27临床意义 -外科患者施行手术后 24 72h,血中 CRP水平明显升高 ,约在第 5 7天恢复正常。 凡骤升后持续高水平多预示合并感染。 对中、大手术患者 ,在术前和术后 3 7天各作 常规检测一次。 凡术后 5 7天 CRP仍持续高水平者 ,理应怀疑 合并感染 ,并配合治疗作随访监测。28临床意义 -内科 肺炎 : CRP 100mg/L， 强烈提示细菌感染，如化脓性支气管炎或肺炎 ;典型的病毒性肺炎不会超过 50mg/L。 心血管病， 在痛疼开始后数小时内， CRP升高， 3-4d达高峰，在 CK-MB回到正常后 7-10d也降至正常。 代谢综合征代谢综合征分组，根据 CRP水平可将为 低危险