马铃薯中龙葵素含量的测定 液相色谱质谱联用法-编制说明

1、马铃薯中龙葵素含量的测定 液相色谱质谱联用法编制说明一、工作简况，包括任务来源与项目编号、标准主要起草单位、协作单位、主要起草人、简要起草过程1、任务来源本标准是受农业农村部委托制订的农业行业标准，标准编号为LX20549，编制组承担了马铃薯中龙葵素含量的测定 液相色谱质谱联用法农业行业标准的制定工作。2、起草单位本标准的起草单位为农业农村部食物与营养发展研究所。3、协作单位本标准的协作单位为北京市营养源研究所，内蒙古蒙牛乳业集团有限公司，中国合格评定认可委员会，食品行业生产力促进中心，北京市理化分析测试中心，中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京市农林科学院蔬菜研究中心。4、主要起草人朱大洲，崔

2、亚娟，梁敏慧，孔凡华，孙君茂，屠振华，熊兴耀，郭燕枝，仇菊，杨春雪，李东，马文丽，宋晓东，杨志刚，李宏，马杰，贾丽，王万兴，刘光敏。5、简要起草过程编制组根据农业行业标准制修订工作要求，依据GB_T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则和GB/T 20001.4-2001标准编写与规则 第四部分：化学分析方法，参照GB/T 5009.1食品卫生检验方法 理化部分 总则。2019年4月份底完成资料收集、整理工作，并公开征求多方对标准修订的意见，以确定研究方法与技术路线，在参考国内外标准的基础上，对马铃薯中龙葵素含量的测定液相色谱质谱联用法进行优化。开展方法重现性、

3、灵敏度、检出限、分离度、准确度、线性关系等技术内容的确定研究。2019年9月底完成检验方法的实验摸索研究，起草出标准文本和编制说明初稿。2020年8月完成检验方法标准验证工作，形成验证报告。2020年8月，召开专家研讨会，根据专家意见进行修改完善。2020年9月，形成征求意见稿，公开征求各方对标准（草案）意见。二、国内外相关法规、标准的关系及文献的研究目前，马铃薯中龙葵素常用的检测方法有紫外分光光度法 、薄层色谱法、高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法。相关标准只有DB23/T 1337-2009 马铃薯中龙葵素的测定和DB51/T 1881-2014 马铃薯中龙葵素的测定 液相色谱-串联质谱

4、法，都属于地方性标准。关于龙葵素的测定相关国外标准有AOAC Official Method 997.13Glycoalkaloids (-Solanine and -Chaconine) in Potato Tubers Liquid Chromatographic Method First Action 1997，AOAC法是利用高效液相色谱对马铃薯中的-茄碱和-卡茄碱进行定量分析。三、标准修订的目的、意义我国马铃薯中龙葵素测定一直没有正式的国家标准，只有DB23/T 1337-2009 马铃薯中龙葵素的测定和DB51/T 1881-2014 马铃薯中龙葵素的测定 液相色谱-串联质谱法两份

5、地方标准，覆盖面窄，不能满足各地在马铃薯龙葵素检测方面的需求，因此需要扩大标准的使用限制范围以满足检测的需要。马铃薯的主要有毒成分是生物碱龙葵素，它不易溶于水，性质较稳定，烹调时不易去除或破坏。龙葵素在马铃薯中的正常含量为213 mg/100g鲜重；发绿部分的含量为80100mg/100g鲜重；马铃薯芽的含量可达500 mg/100g鲜重。一般以每100 g鲜马铃薯20 mg龙葵素作为食用的安全界限。马铃薯及其制品中龙葵素的检测方法主要有紫外分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法及基质辅助激光解析电离质谱分子成像技术等。紫外分光光度法及薄层色谱法不能对马铃薯中的龙葵素进行

6、准确的定性定量分析且灵敏度较低。液相色谱法在马铃薯及其制品中龙葵素的检测中应用较为广泛，通过对马铃薯或马铃薯制品进行一定的前处理，再进行检测，但液相色谱法不能有效的分离干扰物质，会造成检测结果的偏差，而液相色谱-串联质谱法重复性好、精密度好、检测效率高，不但可以避免了杂质干扰的影响，还可以完成-茄碱和-卡茄碱的同时检测，可为低含量龙葵素的检测提供准确可靠的实用方法。四、标准的制（修）订与起草原则本标准遵循以下原则：测定方法的准确性：严格控制测定方法的准确性和精密度，确保测定结果准确无误。测定方法的检出限：能够满足马铃薯中龙葵素含量的检测。测定方法的可操作性：便于标准的使用者操作，有良好的重现性

7、。标准的先进性：标准文本的技术水平达到国内同类标准的先进水平，并具有国际水平。五、方法的研制和实验条件的确定1、提取条件的选择1.1 提取试剂的选择提取试剂是影响目标化合物提取效率的一个重要因素。龙葵素属于生物碱，可利用醇类物质进行提取。目前，常用的龙葵素提取方法包括单溶剂法、双溶剂法和混合溶剂法。单溶剂法就是用一种溶剂来提取龙葵素，采用的溶剂有甲醇或是乙酸。双溶剂提取法就是利用两种溶剂来提取龙葵素，采用的溶剂有甲醇和氯仿等。混合溶剂法是利用三种以上溶剂来提取龙葵素，采用的溶剂系统有乙酸-乙腈-水等。为确定最佳提取试剂，参考DB51/T 1881-2014 马铃薯中龙葵素的测定 液相色谱-串联

8、质谱法和相关文献，比较了以下样品提取方式对同一份土豆样品的提取结果：（1） 乙腈超声提取：称取马铃薯样品1 g，加入5 mL水涡旋混匀1 min，加入25 mL乙腈，涡旋混匀3 min，之后，向离心管中加入2 g无水硫酸镁，1 g无水醋酸钠，剧烈摇动30 s后涡旋混匀1 min，8000r/min离心10min，取1 mL上清液于10 mL离心管中，40 氮气吹干，用10 mL50%的甲醇水溶液溶解，过0.22m滤膜后，上机测定。（2） 酸化乙腈提取：称取1 g样品，置于50 mL离心管中，加入5 mL水涡旋混匀1 min，再准确加入25 mL的0.1%甲酸乙腈，涡旋混匀3 min。之后，向离

9、心管中加入2 g无水硫酸镁，1 g无水醋酸钠。手动剧烈摇动30 s后涡旋混匀1 min。再将离心管置于离心机中，以8000r/min离心10 min。取1 mL上清液于10 mL离心管中，40 氮气吹干，用10 mL50%的甲醇水溶液溶解，过0.22m滤膜后，上机测定。（3） 甲酸水提取：称取1 g样品，置于50 mL离心管中，加入10%甲酸水溶液30mL，涡旋混匀3 min，8000 r/min离心10 min，取清液过0.22m滤膜上机。表1 不同提取方式测定结果（n=6）提取方式-茄碱（mg/kg）-卡茄碱（mg/kg）乙腈超声提取5.023.40.1%甲酸乙腈提取14.134.9乙酸水

10、提取12.532.0实验结果见表1，可以看出0.1%甲酸乙腈提取效率最高，因此选择0.1%甲酸乙腈溶液作为提取试剂。1.2 甲酸浓度的选择分别加入浓度为0%、0.05%、0.1%、1%、5%、10%的甲酸乙腈溶液，其他操作步骤同1.1。实验结果见表2，可以看出甲酸浓度高于0.1%之后测定结果变化不大，因此选择0.1%甲酸乙腈溶液作为提取试剂。表2 不同甲酸浓度测定结果（n=6）甲酸浓度-茄碱（mg/kg）-卡茄碱（mg/kg）0%甲酸乙腈14.333.70.05%甲酸乙腈18.940.30.1%甲酸乙腈20.742.91%甲酸乙腈21.343.05%甲酸乙腈20.843.210%甲酸乙腈21.

11、942.72、流动相选择乙腈、甲醇以及甲酸、乙酸及其铵盐是LC-MS中常用的流动相，这些溶剂利于离子在流动相中的形成，并且易挥发。实验比较了0.1%甲酸水/乙腈和10 mmol/L乙酸铵/乙腈作为流动相进行色谱分离，结果发现，采用乙酸铵作为流动相，龙葵素的离子化效果更好。因此，选用含10 mmol/L乙酸铵/乙腈作为流动相，结果见图1-2。图1 0.1%甲酸水/乙腈色谱图图2 10 mmol/L乙酸铵/乙腈色谱图3、色谱柱选择 实验比较了市面常见的用于超高效液相串联质谱的色谱柱，包括C18柱与 T3柱，这几种柱子对龙葵素都有较好的分离，因此选择C18（100 mm2.1 mm, 1.7 m）色

12、谱柱或相当者即可满足方法检测要求。而 T3的色谱柱相对保留效果更好，仪器响应值较高，所以本研究中选择了 T3（100 mm2.1 mm, 1.8 m）色谱柱。4、质谱条件选择在电喷雾源正离子检测(ESI+)方式下，利用Masslynx软件中的MS Tune下以MS Scan对200 ng/mL的-茄碱标准溶液进行一级全扫描，通过全扫描得到母离子为868.2，属于M+H+峰。确定母离子峰后，在1080 V范围内逐渐增大锥孔电压，选择可使母离子峰响应强度达到最大的数值作为最优锥孔电压。确定母离子峰后，对目标化合物进行Daughter Scan扫描，确定定性定量离子以及最佳碰撞电压，一般选择调谐得到

13、的两个离子中响应高的作为定量离子，另一个作为辅助定性离子。通过子离子扫描发现子离子m/z 98.1和子离子m/z 398.1具有较高的相对丰度，当碰撞能量为73 ev，锥孔电压为95 v时，m/z 98.1丰度达到最大值；当碰撞能量为81 ev，锥孔电压为95 v时，m/z 398.1丰度达到最大值，而m/z 98.3最大丰度值大于m/z 398.6的最大丰度值，因此选择m/z 98.3作为定量离子，m/z 398.6作为辅助定性离子。同理，调谐出-卡茄碱的定量离子、定性离子及最佳碰撞能量。表3 质谱参数化合物母离子（m/z）锥孔电压（V）子离子（m/z）碰撞电压（eV）-茄碱868.2959

14、8.1*73398.181-卡茄碱852.4100706.4*87398.373*定量离子对5、方法的科学性、可操作性的验证5.1 线性范围 -茄碱和-卡茄碱标准储备液：分别准确称取1 mg标准品于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为100 g/mL的混合标准储备液，于-18 冰箱中保存，有效期3个月。选取-茄碱和-卡茄碱含量极低的样品，分别称取1 g（精确至0.0001 g）样品于6个50 mL离心管中，再分别准确吸取100 g/mL的混合标准储备液25、75、125、200、250、500L到离心管中并混匀。再向离心管中加入5 mL水涡旋混匀1 min，再准确加入25 m

15、L酸化乙腈涡旋混匀3 min。之后，向离心管中加入2 g无水硫酸镁，1 g无水醋酸钠。剧烈摇动30 s后涡旋混匀1 min。再将离心管置于离心机中，以8000r/min离心10 min。分别取1 mL上清液于10 mL离心管中，40 氮气吹干，加入10 mL的50%甲醇水溶液，配置成浓度为10、30、50、80、100、200 ng/mL的标准工作溶液，过0.22m滤膜后上机测定。以标准溶液中分析物的浓度为横坐标，以分析物的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。线性回归方程为：-茄碱Y=10731X-15297；R2=0.9994。-卡茄碱Y=4858.1X-17597；r=0.9987，线性良好，可

16、以满足检测要求。5.2 方法检出限和定量限选取-茄碱和-卡茄碱含量极低的样品，加入一定量的的-茄碱和-卡茄碱混标储备溶液（100 g/mL）到1 g样品中，按标准方法进行处理，上机观察信噪比，检出限（LOD）以3倍的信噪比计算，定量限（LOQ）以10倍的信噪比计算。-茄碱和-卡茄碱的检出浓度为3 ng/mL，得出方法检出限为0.75 mg/kg，定量限为1 mg/kg。最终确定方法的检出限和定量限见表4。表4 -茄碱和-卡茄碱的检出限与定量限目标物测定检出限（mg/kg）测定定量限（mg/kg）设定检出限（mg/kg）设定定量限（mg/kg）-茄碱0.752.251.03.0-卡茄碱0.752

17、.251.03.05.3 方法的特异性选取-茄碱和-卡茄碱含量极低的2份样品，一份做加标处理，一份无任何处理，同时按照前处理处理样品分析上机。结果见图3-4。可以看出，-茄碱和-卡茄碱的出峰时间分别为2.54 min和2.59 min，而空白样品在这两个时间并无峰出现，说明本方法不受样品本底的干扰，证明方法特异性良好。图3 某马铃薯样品空白分离谱图图4 空白马铃薯样品加标分离谱图5.4 检测方法的精密度5.4.1 日内精密度选取白色、黄色、紫色三个品种的马铃薯，通过平行多次测定样品，考察检测方法的精密度，结果见表5和表6，可知6次平行实验相对标准偏差均小于10%，表明该方法的精密度良好，适合定

18、量分析。表5 -茄碱的日内精密度试验结果样品名称测定值（mg/kg）平均值（mg/kg）RSD(%)白马铃薯19.820.418.520.720.422.020.35.70黄马铃薯9.610.69.910.710.410.410.34.07紫马铃薯10.710.810.111.510.411.310.84.94表6 -卡茄碱日内精密度试验结果样品名称测定值（mg/kg）平均值（mg/kg）RSD(%)白马铃薯42.142.242.445.246.850.944.97.74黄马铃薯17.518.316.518.917.719.818.16.49紫马铃薯25.326.425.327.826.126

19、.826.33.605.4.2 日间精密度选取白色、黄色、紫色三个品种的马铃薯，连续6天测定分析，考察检测方法的日间精密度，结果见表7和表8。表7 -茄碱的日间精密度试验结果样品名称测定值（mg/kg）平均值（mg/kg）RSD(%)白马铃薯20.421.219.820.820.321.720.73.29 黄马铃薯10.110.19.910.210.610.810.33.34 紫马铃薯10.710.810.111.510.411.310.84.90 表8 -卡茄碱日间精密度试验结果样品名称测定值（mg/kg）平均值（mg/kg）RSD(%)白马铃薯45.344.744.64546.84745.

20、62.33 黄马铃薯18.118.617.918.2181918.32.29 紫马铃薯23.723.92525.123.724.824.42.74 5.5 检测方法回收率回收率公式如下：式中，P-加入的标准物质的回收率；m-加入的标准物质的量；X1-加标试样的测定值；X0-本底的测定值。分别准确称取9份白马铃薯、黄马铃薯、紫马铃薯样品，选取3个加标水平，每个加标水平测定4平行。按照前处理步骤进行提取并连续测定，计算回收率。结果显示各样品基质三水平加标回收率均在90%110%之间。加标回收率的相对标准偏差均小于10%。能够满足检测实际样品的需要。验证结果见表9-10。表9 -茄碱回收率试验结果名

21、称水平1水平2水平3加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%白马铃薯50.247.6194.994.6100.393.8793.693.9200.6193.4996.597.246.7793.390.9690.7190.5095.047.9295.696.6696.4198.2798.847.4794.795.0494.8197.7498.6黄马铃薯50.245.6291.094.2100.3106.77106.5105.1200.6210.27104.894.846.3492.4105.95105.6182.1990.850

22、.63101.0107.38107.1180.9490.246.4192.6101.65101.3186.9193.2紫马铃薯50.249.8599.4100.7100.3108.56108.2107.6200.6205.92102.799.754.00107.7105.71105.4202.58101.049.9999.7110.08109.8194.0996.848.1195.9107.5094.8197.2198.3表10 -卡茄碱回收率试验结果名称水平1水平2水平3加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%白马铃薯504

23、6.7393.595.2100109.18109.2102.0200204.82102.4106.745.2990.695.7895.8210.82105.448.4296.8104.94104.9203.07101.549.9799.998.3998.4207.15103.6黄马铃薯5054.20108.4106.7100108.27108.3101.4200207.63103.8101.253.61107.2101.96102.0199.2899.653.44106.991.8191.8202.20101.152.10104.2103.60103.6200.35100.2紫马铃薯5051.

24、74103.5101.010098.0298.099.6200209.90104.9104.150.79101.697.8497.8191.7495.947.2294.4103.24103.2217.83108.952.20104.499.1799.2213.06106.56、实验室间方法验证在实验室间比对验证过程中，比对样品由北京市营养源研究所统一制备后分发于各验证实验室，包括中国疾病预防控制中心营养与健康所（以下简称疾控中心）、中国海关科学技术研究中心（以下简称海关中心）、国家蔬菜工程技术研究中心（以下简称蔬菜中心）、北京市营养源研究所（以下简称营养源）。按照方法研制和优化条件进行试验验证

25、，样品包括白马铃薯、黄马铃薯、紫马铃薯，验证参数包括标准曲线和浓度范围、三个水平的加标回收率、测定精密度、样品测定结果等参数。6.1 不同实验室间标准曲线结果 在各实验室分别准确称取-茄碱、-卡茄碱标准品1 mg，用甲醇溶液溶解并定容至10 mL即为100 g/mL的混合标准储备液，于-18以下贮存，保存有效期为3个月。将不同体积的标准储备液加入-茄碱和-卡茄碱含量极低的样品中进行前处理来绘制标准曲线，以标准溶液中分析物的浓度为横坐标，以分析物的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。通过回归计算求得回归方程和决定系数，结果如下所示，决定系数均大于0.995。表11 四家验证机构标准曲线和范围验证单位化

26、合物名称标准曲线决定系数浓度范围ng/mL疾控中心-茄碱y =23691xR=0.990210.2870205.7400-卡茄碱y =8431.2x R=0.999010.0902201.8400海关中心-茄碱y = 8765.3xR=0.991212.1090242.1800-卡茄碱y =4731.7x R=0.990510.9230218.4600蔬菜中心-茄碱y =184.03x R=0.99559.8766197.5320-卡茄碱y = 1420x R=0.993510.1780203.5600营养源-茄碱y = 10731x -15297R=0.999410.0030200.0600

27、-卡茄碱y = 4858.1x -17597R=0.998710.0000200.00006.2 不同实验室精密度测定结果选取白色、黄色、紫色三个品种的马铃薯，通过平行多次测定样品，考察检测方法的精密度，结果见表12-13，可知6次平行实验相对标准偏差均小于10%，表明该方法的精密度良好，适合定量分析。表12 不同实验室-茄碱的精密度实验结果样品名称测定值（mg/kg）平均值（mg/kg）RSD(%)白马铃薯18.620.418.420.617.118.819.06.93疾控中心黄马铃薯6.446.845.936.255.876.056.235.82紫马铃薯6.256.405.566.355.

28、926.136.105.17白马铃薯22.725.021.825.123.823.724.27.35海关中心黄马铃薯11.611.510.911.811.712.3 11.64.14紫马铃薯12.313.212.213.912.713.613.05.31白马铃薯21.622.520.622.521.822.321.93.36蔬菜中心黄马铃薯7.998.978.157.908.358.368.294.60紫马铃薯8.218.787.628.128.108.438.214.70白马铃薯19.820.418.520.720.422.020.35.70营养源黄马铃薯9.610.69.910.710.4

29、10.410.34.07紫马铃薯10.710.810.111.510.411.310.84.94表13 不同实验室-卡茄碱的精密度实验结果样品名称测定值（mg/kg）平均值（mg/kg）RSD(%)白马铃薯42.142.242.445.246.850.944.97.74疾控中心黄马铃薯17.518.316.518.917.719.818.16.49紫马铃薯25.326.425.327.826.126.826.33.60白马铃薯46.146.146.349.451.155.649.17.74海关中心黄马铃薯19.120.018.020.719.321.719.86.49紫马铃薯27.628.82

30、7.730.328.529.328.73.60白马铃薯56.246.852.946.955.446.250.79.09蔬菜中心黄马铃薯14.317.714.815.415.116.215.67.77紫马铃薯21.522.019.620.121.020.420.84.32白马铃薯42.142.242.445.246.850.944.97.74营养源黄马铃薯17.518.316.518.917.719.818.16.49紫马铃薯25.326.425.327.826.126.826.33.606.3 不同实验室间加标回收率结果分别准确称取9份白马铃薯、黄马铃薯、紫马铃薯样品，选取3个加标水平，每个加

31、标水平测定4平行。按照前处理步骤进行提取并连续测定，计算回收率。结果显示各样品基质三水平加标回收率均在90%110%之间。加标回收率的相对标准偏差均小于10%。能够满足检测实际样品的需要。验证结果见表14-19。表14 疾控中心-茄碱回收率试验结果名称水平1水平2水平3加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%白马铃薯20.57 19.72 95.9 92.541.15 42.77 103.9 101.282.30 89.57 108.8 107.718.68 90.8 41.52 100.9 87.59 106.4 18.66

32、 90.7 41.84 101.7 88.11 107.1 19.09 92.8 40.40 98.2 89.26 108.5 黄马铃薯20.57 20.97 102.0 103.141.15 41.32 100.4 101.082.30 88.96 108.1 107.522.52 109.5 42.64 103.6 87.25 106.0 18.75 91.2 40.96 99.5 90.30 109.7 22.56 109.7 41.24 100.2 87.46 106.3 紫马铃薯20.5719.96 97.0 97.541.15 41.01 99.7 98.882.30 85.16

33、103.5 102.419.86 96.6 38.91 94.6 84.19 102.3 19.92 96.8 40.51 98.5 83.68 101.7 20.50 99.7 42.15 102.4 84.15 102.3 表15 疾控中心-卡茄碱回收率试验结果名称水平1水平2水平3加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%白马铃薯30.28 32.86 108.5 104.760.55 64.90 107.2 104.8121.10 128.81 106.4 105.430.41 100.4 63.52 104.9 127

34、.58 105.3 31.70 104.7 64.35 106.3 126.36 104.3 31.81 105.1 60.99 100.7 128.05 105.7 黄马铃薯30.28 31.67 104.6 105.060.55 65.89 108.8 108.2121.10 130.91 108.1 108.032.50 107.4 64.92 107.2 131.46 108.5 30.99 102.4 65.54 108.2 130.42 107.7 32.03 105.8 65.84 108.7 130.27 107.6 紫马铃薯30.28 31.39 103.7 104.760.

35、55 61.68 101.9 101.3121.10 132.17 109.1 108.931.70 104.7 60.89 100.6 132.00 109.0 31.19 103.0 60.52 99.9 130.88 108.1 32.49 107.3 62.18 102.7 132.48 109.4 表16 海关中心-茄碱回收率试验结果名称水平1水平2水平3加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%白马铃薯60.55 60.07 99.2 98.0121.09 111.74 92.3 92.7242.18 239.92

36、99.1 99.859.30 97.9 112.98 93.3 237.80 98.2 57.92 95.7 112.43 92.8 244.00 100.8 60.00 99.1 112.09 92.6 244.95 101.1 黄马铃薯60.55 56.46 93.3 93.1121.09 114.29 94.4 97.2242.18 245.91 101.5 100.056.85 93.9 117.93 97.4 244.28 100.9 57.52 95.0 118.65 98.0 241.08 99.5 54.56 90.1 119.92 99.0 237.23 98.0 紫马铃薯6

37、0.55 101.5 91.7 93.0121.09 121.54 100.4 97.6242.18 246.59 101.8 102.6100.9 91.9 116.54 96.2 251.43 103.8 99.5 94.1 115.96 95.8 247.00 102.0 98.0 94.2 118.62 98.0 248.65 102.7 表17 海关中心-卡茄碱回收率试验结果名称水平1水平2水平3加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%白马铃薯54.62 57.89 106.0 105.3109.23 118.62

38、108.6 102.9218.46 219.55 100.5 100.757.90 106.0 112.48 103.0 224.62 102.8 54.86 100.4 111.07 101.7 220.19 100.8 59.49 108.9 107.63 98.5 215.38 98.6 黄马铃薯54.62 57.76 105.8 104.3109.23 116.64 106.8 103.3218.46 235.38 107.7 105.156.83 104.1 109.66 100.4 227.85 104.3 58.58 107.3 111.05 101.7 226.41 103.6

39、 54.60 100.0 113.94 104.3 229.15 104.9 紫马铃薯54.62 55.92 102.4 104.3109.23 118.63 108.6 108.3218.46 228.12 104.4 106.757.11 104.6 118.23 108.2 235.22 107.7 57.21 104.7 116.98 107.1 232.19 106.3 57.70 105.6 119.55 109.4 236.58 108.3 表18 蔬菜中心-茄碱回收率试验结果名称水平1水平2水平3加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%加标量g测定量g回收率%平均回收率%白马铃薯10.18 10.73 105.4 103.630.53 28.55 93.5 95.961.07 64.88 106.2 105.710.34 101.6 29.68 97.2 65.41 107.1 10.63 104.5 29.59 96.9 64.29 105.3 10.47 102.9 29.30 96.0 63.72 104.3 黄马铃薯10.18 9.72 95.5 94.130.53 31.62 103.6 100.061.07 65.94 108.0 104.29.93 97.6 31.18 102.1 60.36 98.8 9