孕酮检测标准操作流程

1、.概述孕酮是一种分子量为314.5道尔顿的甾体类激素。主要形成于黄体细胞以及怀孕期胎盘中。孕酮水平与黄体的发育和萎缩有关。但是在女性周期的卵泡期几乎检测不到孕酮，在排卵前一天可观察到孕酮水平升高。黄体期孕酮合成增加。在后半周期孕二醇作为孕酮主要的降解产物随尿排出体外。孕酮造成子宫内膜腺体组织（分泌阶段）增加，为受精卵着床做准备。怀孕期间孕酮抑制子宫肌层收缩。乳腺中，在雌激素作用的基础上，孕酮促进乳腺腺泡增殖和分泌物的分泌。检测孕酮可用于检测排卵以及黄体期的评估,有助于生育诊断1 目的规范孕酮检测测试，确保检测结果准确性和重复性2 检测方法和原理2.1检测方法：竞争法2.2检测原理：孕酮检测是一

2、种竞争性的免疫测定方法，使用直接化学发光技术。在标记试剂中，病人样品中的孕酮结合到吖啶酯标记的小鼠单克隆抗孕酮抗体上。在固相试剂中，游离的抗体与孕酮衍生物结合在一起，并通过共价键结合到顺磁性颗粒上3 标本采集与保护新鲜无溶血血清遵守以下推荐的血清标本处理，运行和储存步骤3.1用真空采样管采集血液标本时须遵守常规注意事项3.2离心前使标本完全自然形成凝块3.3全程保证样品管的密闭状态3.4尽快分离血清，并及时测定3.5如果标本不能在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在4或更低温度的环境中：3.6冷藏标本室温放置20分钟后再测定；3.7冷冻标本室温解溶后放置20分钟后再测定3.8不符合标本处理

3、3.8.1溶血和乳糜血标本在报告单的备注栏注明3.8.2标本量过少的标本，严重溶血和乳糜血标本与临床沟通并将标本退回，填写不合格标本拒接登记。4 试剂和设备4.1试剂siemens原装配套试剂4.1.1试剂组成标记试剂：5.0ml盒，在缓冲盐水中用吖啶酯标记的单克隆小鼠抗人孕酮抗体(20ng/ml)，含叠氮化钠（0.1%)和防腐剂。固相试剂：10.0ml/盒，在磷酸盐缓冲液中结合到顺磁性颗粒的孕酮衍生物（60ng/ml)，含叠氮化钠（0.11%)和防腐剂。释放剂：类固醇释放剂(2.2mg/ml)，置于含叠氮化钠（0.1%)和防腐剂的缓冲液中。4.1.2试剂准备：手工混合所有试剂包。肉眼检查试剂

4、底部以确保所有颗粒分散均匀并处悬浮状态，然后将混合物载入系统直接使用 4.1.3试剂保存试剂28避光保存，并保持竖直向上4.2质控品精品.siemens原装配套质控品4.3校准品siemens原装配套标准品。4. 4警告和注意事项4.4.1只可用于体外诊断；4.4.2试剂中含有叠氮钠，请小心处理，请勿吞服或与皮肤粘膜接触！叠氮钠在与铜或铅等重金属接触后会产生有毒的叠氮化物；4.4.3试剂盒的测定结果仅作为临床各种疾病的辅助诊断依据4.5仪器advia centaur cp 全自动化学发光免疫分析仪5 操作程序5.1检测过程流程签收样品离心上机检测审核报告签发报告标本保存5.2样本签收严格按标本

5、接收程序签收标本5.3标本处理以3000r/min，离心610min，分离血清上机测定，若标本不能及时检测，将分离血清冷藏于28的冰箱内5.4标本检测5.4.1手工编排测试项目：在主界面选中样本区域 选择样本架 选择样本 点击samples区域中的样本类型选择按钮切换至样本类型选择样本id编排区没有通过扫描样本管条形码输入id号的样本，在此处手工输入样本id 然后在assay selection 区域选择测试项目5.4.2样本运行 确认样本装载，必要的样本信息输入完毕确认所有耗品及试剂已装载 按start键 开始运行样本。5.5检验后标本保存保存在标本冰箱内，保存期为7d6 校准程序6.1校准

6、品的准备和储存将校准品从冰箱中取出，加5ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min，待充分混匀后分装。-20冰冻保存可保存20d，复融后28可稳定24h。6.2校准条件在室内质控失控，或使用新批号试剂，或更换仪器主要配件，或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为28d6.3校准程序参见生化组的校准操作程序7 质量控制程序7.1控制品的准备和储存每瓶准确加入5.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min待充分溶解后分装，保存于-30冰箱，启用前取出，室温放置30min待充分融化后使用，28可稳定24h。7.2控制品水平和分析批长度每24h至少进行1批。7.3质控操作程序参见生化

7、组的质量控制操作程序。精品.8 性能参数8.1不准确度 12.5%8.2精密度 8.33%8.3线性范围 0.21ng/ml60ng/ml9 生物参考区间黄体期3.34-28.03ng/ml 卵泡期0.15-1.4ng/ml 绝经期0-1.73ng/ml妊娠早期11.2-90ng/ml 妊娠中期25.55-89.4ng/ml 妊娠晚期48.4-422.510异常结果的处理结果与诊断不符或两次结果差异较大时，应及时与临床沟通。11 临床意义孕酮（progesterone）属于类固醇激素，分子量314.5d，主要在黄体的细胞以及妊娠期的胎盘中形成，孕酮的浓度与黄体的生长与退化密切相关。在月经周期的

8、卵泡期几乎测不出，在排卵前一天，孕酮浓度升高。在黄体期，孕酮的合成增加，在月经周期的后半期，孕酮的主要降解产物，孕烯二醇，从尿中排出。孕酮可以使子宫粘膜转变成腺体丰富的组织（分泌期）。孕酮测定用于生殖诊断：排卵期的检出和黄体期的估计。12 干扰因素人类血浆中的异嗜性抗体能够与试剂免疫球蛋白发生反应，从而妨碍了体外的免疫测定。经常接触动物或者动物血浆产品的病人易于产生这种妨碍，并可能测出反常的结果。从而对于诊断可能需要额外的信息。血清样品在达到以下浓度情况下，对结果的影响15%高脂血症甘油三酯：500mg/dl溶血 血红蛋白：250mg/dl黄疸 胆红素：20mg/dl13 安全防护措施13.1

9、血液标本运输必须保证运输过程的生物安全，防止溢出。血液标本溢出后，应立即对污染环境和设备进行消毒处理；13.2对标明有污染性疾病的血液标本应特别的防护，以不污染环境和保证工作安全为前提；13.3在进行血液分析的一切操作过程中应按照检验科生物安全管理程序进行；13.4与血液标本接触的一切器皿。仪器组装/拆卸组合零件都应视为污染源，因此操作人员不小心接触到了这种污染源时，应立即用清水清洗被污染区域并进行消毒；13.5如果操作人员皮肤或衣服上污染（沾到）了血液或废液应立即冲洗并进行消毒处理。如果眼睛被溅入了血液或废液应立即用大量清水冲洗并进行必要的医疗措施。13.6血液标本离心的过程中所有标本都应该加盖，离心后，开启试管时应注意防止气溶（雾）胶污染环境；13.7所有检测过的血液标本及有关废物，都会给您带来潜在的危险及生物污染。所有废弃样本及废物的处理方法同血液标本的处理程序。14 参考文献14.1siemens试剂盒说明书14.2临床实验室操作规程编写要求14.3生化组仪器设备操作程序14.4全国临床检验操作规程第4版15 支持文件15.1