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1、第一章 概论一、名词解释:1.灵敏度: 检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力,它反映仪器能够检测的最小被测量。2.误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(即真值)之间的差异称为误差,误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(即输入为零)时,仪器输出信号的波动或变化范围即为噪音。4.最小检测量:检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以用含量所转换的物理量来表示。如含量转换成电阻的变化,此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。
2、5.精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。6.可靠性: 仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行其功能的能力它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。7.重复性: 在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固 有误差的精密度。8.分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输出量)的最小值。9.测量范围:在允许误差极限内仪器所能
3、测出的被检测值的范围。10.线性范围:输入与输出成正比例的范围。也就是反应曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围11.响应时间:表示从被检测量发生变化 到仪器给出正确示值所经历的时间。12.频率响应范围:为了获得足够精度的输出响应,仪器所允许的输入信号的频率范围。第4章 紫外可见分光光度计1.分光光度计:能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光 光度计。它具有分析精密度高、测量范围广、分析速度快和样品用量少等优点。根据所使用的波长范围 不同可分为紫外光区、可见区、红外光区以及万用(全波段)分光光度计等。2.吸收光谱:光照射到物质时,一部分光会被物质吸收。在连续光
4、谱中某些波长的光被物质吸收后 产生的光谱被称作吸收光谱。每一种物质都有其特定的吸收光谱,因此可根据物质的吸收光谱来分析物 质的结构和含量。3.朗伯-比尔定律:是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度 A 与液层厚度 b 及溶液浓度的乘积 c 成正 比,此即朗伯-比尔定律。数学表达式为: Akbc。它适用于分子吸收和原子吸收。4.摩尔吸光系数():摩尔吸光系数表示在一定波长下测得的液层厚度为 1cm, 溶液浓度 c 为1mol/L 时的稀溶液吸光度值。吸光系数与入射光波长、溶液温度、溶剂性质及吸收物质的性质等多种因
5、 素有关。当其它因素固定不变时,吸光系数只与吸收物质的性质有关,可作为该物质吸光能力大小的特 征数据。6.单色器:将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置,是分光光度计的关 键部件。主要由入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜组成。7.吸收池:又称为比色皿、比色杯、样品池或液槽等,是用来盛放被测溶液的器件,同时也决定着透光液层厚度,可用塑料、玻璃、石英或熔凝石英制成。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料 制作;在紫外区,需用能透紫外线的石英或熔凝石英制作。8.光电管:利用碱金属的外光电效应制成的光电转换元件。按电极结构不同可分为中心阳极式、 中心阴极式和平行平板式几种,按管内充
6、气与否又可分为真空光电管与充气光电管两种。光电管的质量 取决于阴极灵敏度、线性范围、最大、最小可测能量等几个重要技术指标。9.光电倍增管:利用外光电效应与多级二次发射体相结合而制成的光电元件,由一个表面涂有光 敏材料的阴极和若干个(通常为 9 个13 个)二级电子发射极(打拿极)组成,其灵敏度比光电管高 200 多倍。有三个重要指标:波长效应、灵敏度和噪声水平。10.波长准确度:指仪器波长指示器上所示波长值与仪器此时实际输出的波长值之间的符合程度。 可用二者之差来衡量分光光度计的准确性。11.波长重复性:是指在对同一个吸收带或发射线进行多次测量时,峰值波长测量结果的一致程度。 通常取测量结果的
7、最大值与最小值之差来作为衡量分光光度计的准确性指标之一。12.光度准确度:指仪器在吸收峰上读出的透射率或吸光度与已知真实透射率或吸光度之间的偏差。 该偏差越小,光度准确度越高。1.紫外-可见分光光度计的基本结构及各部分功能是什么?答:紫外-可见分光光度计基本结构由光源、单色器、样品池、检测器和放大显示系统等五部分组成。 光源提供入射光,单色器的作用是将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束。吸收池用 来盛放被测溶液,检测器作用是把光信号转换为电信号,信号显示系统是把放大的信号以适当的方式显 示或记录下来。2.朗伯-比尔定律的适用条件为:入射光为单色光。波长范围越大,单色光纯度越低,对
8、朗伯-比耳 定律的偏离越大;溶液中邻近分子的存在并不改变每一给定分子的特性,即分子间互不干扰。当溶液 浓度很大时,由于溶液分子的相互干扰,该定律不再成立。3.紫外-可见分光光度计的有哪些基本类型?答:紫外-可见分光光度计按其光学系统可分为单波长分光光度计(包括单光束和双光束)和双波长 分光光度计。4.单波长单光束分光光度计的特点是什么? 答:单波长单光束分光光度计结构简单,使用、维护比较方便,应用广泛。其设计原理和结构具有以下特点:单光束光路,从光源到试样至接收器只有一个光通道,使用中依次对参考样品和待测试样 进行测定,然后将二次测定数据进行比较、计算,获得最终结果;仪器只有一个色散元件,工作
9、波长 范围较窄;通常采用直接接收放大显示的简单电子系统,用电表或数字显示;结构简单、附件少、 功能范围小,不能做特殊试样如浑浊样品、不透明样品等的测定。5.单波长双光束分光光度计的结构特点是什么?答:单波长双光束分光光度计的光路设计在出射狭缝和样品吸收池之间增加了一个光束分裂器或斩 波器,作用是以一定的频率将一个光束交替分成两路,使一路经过参比溶液,另一路经过样品溶液,然 后由一个检测器交替接收或由两个匹配器分别接收两路信号;从光源到检测器有试样光路和参考光路两 条通路,可同时对检测样品和参考样品进行测定,直接获得检测数据,还可自动补偿检测时因条件的随 机变化或样品中非测定组分的干扰所引起的影
10、响;一般采用两个光栅或棱镜加光栅的双单色器,能有效 地提高分辨率和降低杂散光;可以自动进行波长扫描、自动记录光谱曲线,也可以外接计算机,实现自 动化运行;可装备各种附件,光、电、机紧密结合,功能范围宽。6.简述紫外-可见分光光度计的性能评价指标。答:紫外-可见分光光度计分析结果的可靠性取决于仪器的性能是否达标。评价紫外-可见分光光度 计的性能指标如下:波长准确度和波长重复性;光度准确度;光度线性范围;分辨率;光谱 带宽;杂散光;基线稳定度;基线平直度。第五章 临床血液常规检验仪器1血细胞分析仪:指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床常规检验仪器。2. VCS 技术中 V、C、S 各代
11、表什么意思:V 代表体积,采用电阻抗进行血细胞计数和体积测量;C 代表电导,依据细胞可影响高频电流传导的特性,采用高频电磁探针测量细胞内部结构,细胞内核浆比 例,质粒的大小和密度,从而区别体积完全相同而性质不同的两个细胞;S 代表光散射,对细胞颗粒的 构型和颗粒质量有较强的鉴别能力,通过测定单个细胞的散射光强度把粒细胞分开。3复合通道丢失:在血细胞的实际测定中,常有两个或更多的细胞重叠同时进入微孔感应区内,此时,产生一个单一的高或宽振幅脉冲信号,由此引起一个或更多的脉冲丢失,使计数较实际结果偏低, 这种脉冲减少称为复合通道丢失。4携带污染率:指不同浓度样品间连续测定的相互影响,主要是指含量高的
12、样本对含量低的样本 所产生的影响。5血液凝固分析仪:采用一定的分析技术,对血栓与止血有关成分进行自动检测的临床常规检验 仪器。6血凝仪凝固法原理:是通过检测血浆在凝血激活剂作用下一系列物理量(光、电、超声、机械运动等)的变化,再由计算机分析所得数据并将之换算成最终结果的方法,故也称生物物理法。7底物显色法原理:是通过测定产色底物的吸光度变化来推测相关止血/凝血因子含量或活性的方法,又称为生物化学法。8免疫比浊法原理:是将被检物质与相应抗体或抗原混合形成抗原抗体复合物,从而产生足够大 的沉淀颗粒,通过透射比浊或散射比浊进行测定,浊度的深浅与被检物质浓度呈比例关系的方法。9超声分析法原理:是利用超
13、声波随血浆在体外发生凝固的变化而变化的半定量方法。10血凝仪光学法(比浊法)原理:根据血浆凝固过程中浊度的变化,导致光强度变化来测定相关 因子的方法。三、简答题1BCA 的概念及功能是什么? 答:血细胞分析仪是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床常规检验仪器。其主要功能是:血细胞计数;白细胞分类;血红蛋白测定;相关参数计算。2简述电阻抗(库尔特)血细胞检测原理。 答:血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体,其电阻值大于稀释溶液的电阻值;当血细胞通过检测器的孔径感受区时,检测器内外电极之间的恒流源电路的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信 号;脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度
14、大小与细胞大小成正比。3简述电阻抗血细胞分析技术的应用及其缺点。 答:应用电阻抗原理可进行白细胞计数和分群、血小板计数、红细胞计数、红细胞平均体积和血小板平均体积测定及获得其他相关参数等。电阻抗法的缺点:1 白细胞分类计数不特异;2 技术所限,影响红细胞有关参数的准确性;3 血小 板计数的干扰因素多;不易发现异常细胞。4简述联合检测型 BCA 白细胞分类计数的实质和共有特点。 答:实质是选用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出,发现异常细胞。共有特点是:均使用了鞘流技术,将细胞重叠限制到最低限度。5联合检测型 BCA 在白细胞分类上主要有哪些技术?答:联合检测型 BCA 在白细胞
15、分类技术上主要有:1 容量、电导、光散射联合检测技术;2 电阻抗、 射频与细胞化学联合检测技术;3 多角度激光散射、电阻抗联合检测技术;4 光散射与细胞化学检测技术。6.简述 BCA 网织红细胞检测原理。 答:利用网织红细胞中残存的嗜碱性物质RNA,在活 体状态下与特殊的荧光染料结合;激光激发产生荧光,荧光强度与 RNA 含量成正比;用流式细胞技术检测单个的网织红细胞的大小和细胞内 RNA 的 含量及血红蛋白的含量;由计算机数据处理系统综合分析检测数据,得出网织红细胞数及其他众多参数。7如何对 BCA 进行分类? 答:按自动化程度分半自动血细胞分析仪、全自动血细胞分析仪、血细胞分析工作站、血细
16、胞分析流水线;按检测原理分电容型、光电型、激光型、电阻抗型、联合检测型、干式离心分层型、无创型; 按对白细胞的分类水平分二分群、三分群、五分群、五分群网织红 BCA。8.对 BCA 进行评价的指标有哪些?答:在细胞计数、血红蛋白测定方面,主要评价仪测试样本的总变异、携带污染率、线性范围、可比性和准确性等,这对保证检验质量将起重要用。9简述电阻抗型 BCA 和联合检测型 BCA 的基本结构。答:电阻抗型 BCA 和联合检测型 BCA 的基本结构:主要由机械系统、电学系统、血细胞检测系统、 血红蛋白测定系统、计算机和键盘控制系统以不同形式的组合而构成。10BCA 保证血小板准确计数的技术有哪些?
17、答:主要有:鞘流技术、扫流技术、隔板技术、浮动界标和拟合曲线技术等,保证血小板计数的精确性。11BCA 的进展表现在哪几个方面? 答:主要表现在:仪器测试原理的不断创新;新血细胞分析参数的出现;各种特殊技术的应用;仪器自动化水平的提高;无创型全血细胞分析仪的研究等几个方面。12简述 BCA 堵孔情况的判断。 答:根据微孔堵塞的程度,将分为完全堵孔可不完全堵孔两种。堵孔判断:当检测器小孔管的微孔完全阻塞或泵管损坏时,血细胞不能通过微孔而不能计数,仪器在屏幕上显示“CLOG”,为完全堵孔。而不完全堵孔主要通过下述方法进行判断:1 观察计数时间;2 观察示波器波形;3 看计数指示灯闪动;4 听仪器发
18、出的不规则间断声音等进行判断。13BCA 常见的堵孔原因有哪些?如何处理?答:常见堵孔原因与处理:1 仪器长时间不用,试剂中水分蒸发,盐类结晶堵孔,可用去离子水浸 泡,完全溶解后,按 CLEAN 键清洗;2 未梢采血不顺或用棉球擦拭微量取血管;3 抗凝剂量与全血不匹 配或静脉采血不顺,有小凝块;4 小孔管微孔蛋白沉积多,需清洗;5 样品杯未盖好,空气中的灰尘落 入杯中。后四种原因,一般按 CLEAN 键清洗,如果不行须按说明书卸下检测器进行清理。14血凝仪常用检测原理有哪些?半自动与全自动在使用方法上有何不同? 答:血凝仪常用的检测原理主要:有凝固法、底物显色法、免疫学方法、干化学技术法检测原
19、理等。凝固法原理是最基本、最常用的方法。半自动血凝仪以凝固法原理测量为主,全自动血凝仪除了使用凝固法外,还使用其他的分析方法,如底物显色法、免疫学法等。15简述血凝仪光学法检测原理。光学法血凝仪从光路结构上分哪两类? 答:光学法属凝固法的一种;是利用一束光线通过样品杯,样品杯中的血浆在凝固过程中导致血浆浊度发生变化;透射光或散射光的强度也发生改变;仪器根据光强度的变化来判断血浆凝固终点的检测方法称为光学法检测原理。 根据仪器光路结构的不同又可分为散射比浊法和透射比浊法;1 散射比浊法:根据待测样品在凝固过程中散射光的变化来确定凝固终点;其光源、样本、接收器成直角排列;接收器得到的完全是浊度测量
20、所需的散射光。2 透射比浊法:根据待检样品在凝固过程中吸光度的变化来确定凝固终点;其光 源、样本、接收器成一直线排列;接收器得到的是很强的透射光和较弱的散射光。16简述双磁路磁珠法的测定原理。 答:属磁电检测原理。在测试杯的两侧各有一组驱动线圈,它们产生恒定的交替电磁场,使测试杯内特制的去磁小钢珠保持等幅振荡运动;凝血激活剂加入后,随着纤维蛋白的增多,小钢珠的运动振幅 逐渐减弱;另一组测量线圈感应到小钢珠运动的变化;仪器将运动幅度衰减到 50%时确定为凝固终点。17简述凝固法与免疫学方法中的透射比浊、散射比浊的区别。答:凝固法是检测血浆在凝固过程中所致一系列物理量的变化,来反映相关因子的活性,
21、也称生物 物理法。凝固法中的透射比浊、散射比浊是根据血浆中的纤维蛋白原逐渐转变成纤微蛋白,导致血浆浊度发生变化,进行光电比浊测定。而免疫学方法中的透射比浊、散射比浊虽属光电比浊原理的光学法, 但有抗原抗体参与。前者是血浆凝固过程中纤维蛋白形成所致的浊度,后者是相应的抗原抗体反应形成 的复合物所致的浊度。18简述全自动血凝仪的主要特点及其维护与保养。答:主要特点:自动化程度高;检测方法多;速度快;项目任意组合,随机性;测量精 度好,易于质控和标准化;智能化程度高,功能多;价格昂贵;对操作人员的素质要求高。维护与保养:清洗或更换空气过滤器;检查及清洁反应槽;清洗洗针池及通针;检查冷却 剂液面水平;
22、清洁机械运动导杆和转动部分并加润滑油;及时保养定量装置;更换样品及试剂针;数据备份及恢复等。19血凝仪光学法与双磁路磁珠法主要区别及优缺点是什么?答:主要区别在于:前者是检测血浆凝固过程中光信号的变化,后者是检测该过程中磁电信号的变 化。光学法血凝仪测试的优点在于灵敏度高、仪器结构简单、易于自动化。缺点是样本的光学异常、测 试杯的光洁度、加样中的气泡等都会成为测量的干扰因素。双磁路磁珠法不受溶血、黄疸、高血脂症及 气泡的严重影响;该法有利于血浆和试剂的充分混匀。及试剂分配系统、检测 系统、计算机、输出设备及附件等。20.简述血凝仪的临床应用。临床应用主要有:凝血系统的检测,常规筛选实验和单个凝
23、血因子含量及活性的 测定。抗凝系统的检测。纤维蛋白溶解系统的检测。临床用药监测等。21.简述血凝仪的的性能评价。 答:血凝仪性能评价的内容主要有:重复性、线性范围、准确性、携带污染率、干扰因素、可比性分析评价等几方面22.血凝仪的进展体现在哪几个方面? 答:主要体现在:多方法、多功能、快速高效;智能化程度高,软件开发进一步完善;全自动血凝分析仪工作站;床旁分(即时检);在临床中的应用日趋广泛。第七章 临床尿液检验仪器1尿干化学分析试剂带:它以滤纸为载体,将各种试剂成分浸渍后干燥,作为试剂层,再在其表 面覆盖一层纤维素膜作为反射层。一般把这样一条上面附有试剂块的塑料条叫做试剂带。2试剂带的反射率
24、:R=R试纸R空白=TmCs100Ts CmTm 为试纸快对测量波长的反射强度,Ts为试纸快对参比波长的反射强度。Cs为空白对测量波长的反射强度,Cm 为空白对参比波长的反射强度。3尿11项分析仪:可以检测包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿 pH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C的尿液分析仪。4尿液分析仪光学系统:包括光源、单色处理、光电转换三部分。光线照射到反应区表面产生反射光,反射光的强度与各个项目的反应颜色成正比。不同强度的反射光再经光电转换器件转换为电信号 进行处理。5尿液分析仪的调校:为保证检验质量,新仪器安装后,或每次大维修之后,必须对仪器技术性 能进行
25、测试、评价,这一过程称为尿液分析仪的调校。6影像式尿沉渣分析仪:是将尿液标本的粒子影像展示在计算机的屏幕上,由检验人员加以鉴别 或由计算机图象处理系统进行自动识别分析的仪器。7.流式细胞术尿沉渣分析仪:是应用流式细胞术和电阻抗的原理进行分析的仪器。8尿沉渣细胞的识别分析:仪器通过对前向散射光波形(散射光强度和散射光脉冲宽度)前向荧 光波形(荧光波长和荧光脉冲宽度)和电阻抗值的大小综合分析,得出细胞的形态、细胞横截面积、染 色片段的长度、细胞容积等信息并绘出直方图和散射图。仪器通过分析每个细胞信号波形的特性来对其 进行分类。9前向散射光脉冲宽度:前向散射光脉冲宽度(FscW)反映细胞的长度。Fs
26、cw 可用下式表示:CLBWFscw=V式中,CL 代表细胞长度;BW 是激光束宽度;V 为流动速度。三、简答题1尿液分析的临床意义是什么? 答:尿液分析是临床诊断泌尿系统疾病的重要措施之一,通过对尿液物理学检查和化学检查,可观察尿液物理性状和化学成份的变化。在尿沉渣检查中能够看到的有形成份为红细胞、白细胞、上皮细胞、 管型、巨噬细胞、肿瘤细胞、细菌、精子以及由尿液中沉析出来的各种结晶(包括药物结晶)等。这些 检查资料对肾和尿路疾患的诊断、鉴别诊断以及疾病的严重程度和预后的判断,都有极重要的意义2简述尿液分析技术的进展。答:尿液分析是最古老的医学检验之一。公元前 400 年,古希腊Hippoc
27、rates 已注意到人发热 时,尿液颜色和气味的变化。此后,人们对尿液检验与疾病之间关系的认识逐渐加深。真正科学的尿液 检验始于 18 世纪-19 世纪,1827 年,Bright,最早把尿液检验用于患者的诊断和护理,成为尿液常规 分析最早期的开拓者和支持者;20 世纪 40 年代,逐渐出现了尿液干化学试剂带法,并成为筛检健康人 或患者尿液的首选方法;20 世纪 70 年代,第一台尿液化学分析仪问世,从此在相当程度上改变了传统 尿液检验繁琐费时的操作方式,成为现代尿液分析的标志;20 世纪 80 年代,逐渐将色谱和免疫技术用 于干化学试纸中,生产出具有检测敏感性和特异性极高的单克隆抗体的试剂带
28、;20 世纪 90 年代以来, 尿液分析仪自动化程度、性能得到迅猛发展。3简述我国现代尿液分析技术的发展过程。答:我国的尿液分析仪的研制起步较晚,1966 年,北京协和医院和上海医学化学研究所开始研制尿 液试剂带,1985 年广西桂林医疗电子仪器厂从日本引进当时具有国际先进水平的 MA-4210 型尿液分析仪 和专用试剂带的生产技术及设备,由此填补了国内空白。经过近三年的努力,实现了部分国产化,1990 年尿液分析仪达到全部国产化。目前我国也已经能够生产功能齐全的尿液分仪。4尿液分析仪是如何进行分类的?答:尿液分析仪按工作方式可分为湿式尿液分析仪和干式尿液分析仪。其中干式尿液分析仪主要着 眼于
29、自动评定干试纸法的测定结果,因其结构简单、使用方便,目前临床普遍应用。尿液分析仪按测试项目的数量可分为 8 项尿液分析仪、9 项尿液分析仪、10 项尿液分析仪、11 项尿液分析仪和 12 项尿液分析仪。检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿 pH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素 C 和浊 度 。尿液分析仪按自动化程度可分为半自动尿液分析仪和全自动尿液分析仪。5简述试剂带结构。 答:采用了多层膜结构,第一层尼龙膜起保护作用,防止大分子物质对反应的污染;第二层绒制层,包括碘酸盐层和试剂层,碘酸盐层可破坏维生素 C 等干扰物质,试剂层含有试剂成分,主要与尿液中所测定物
30、质发生化学反应,产生颜色变化;第三层是固定有试剂的吸水层,可使尿液均匀快速地浸入,并 能抑制尿液流到相邻反应区;最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。6尿液分析仪的检测项目有哪些?答:检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿 pH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿 白细胞、尿比重、维生素 C 和浊 度 。7尿液分析仪的检测原理是什么? 答:把试剂带浸入尿液中后,除了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光 量值越大,反射光量值越小,反射率也越小。反之,反射率越大。即颜色的深浅与光
31、的反射率成比例关 系,而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系。所以只要测得光的反射率即可以求得尿液中 各种成分的浓度。8简述尿液分析仪的结构。答:尿液分析仪一般由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。9现代尿液分析仪的光学系统有几种? 答:有三种。滤光片分光系统:采用光源灯(卤灯)发出的白光通过球面积分仪的通光筒照射到试剂带上,试剂带把光反射到球面积分仪中,透过滤色片,得到特定波长的单色光,照射到光电二极管上,实现光电转换。LED 系统:采用了可发射特定波长的发光二极管(LED)作为检测光源,两个检测头上都有三个不同 波长的光电二极管,对应于试剂带上特定的检测项目分别为红、橙、绿单色
32、(660nm、620nm、555nm), 它们相对于检测面以 60照射在反应区上。作为光电转换器件的光电二极管直安装在反应区的上方, 在检测光照射的同时接收反射光。CCD 系统:采用了目前比较尖端的光学元件 CCD 技术进行光电转换。它是把反射光分解为红绿蓝(RGB610nm、540nm、460nm)三原色,又将三原色中的每一种颜色分为 2592 色素,这样整个反射光分为 7776 色素,可精确分辨颜色由浅到深的各种微小变化。CCD 的基本单元是 MOS(金属氧化物半导体),当光照 射到 CCD 硅片上时,在栅极附近的半导体内产生电子-空穴对,其多数载流子被栅极电压排开,少数载 流子则被收集在
33、势阱中形成信号电荷。将一定规则变化的电压加到 CCD 各电极上,电极上的电子或空穴(信号电荷)就能沿着半导体表面按一定方向移动,形成电信号。10尿液分析仪的安装注意事项有哪些?答: (1)避免安装在有水分、潮湿的地方。应安装在清洁、通风处,室内温度应在 10-30, 相对湿度应80;(2)安装在稳定的水平实验台上(最好是水泥台)。禁止安装在高温、阳光直接照 射处,要远离高频、电磁波干扰源、热源及有煤气产生的地方;(3)应安装在大小适宜、有足够空间便 于操作的地方;(4)要求仪器接地良好,电源电压稳定。11如何进行尿液分析仪的调校? 答:(1)首先应该用标准的校正带对仪器进行测定,对仪器的光路、
34、状态进行校正,以达到最佳状态;(2)应该对尿液分析仪及试剂带的准确度进行评价。准确度的评价应根据仪器制造商规定的测定范 围配制成一定浓度的标准物,在仪器上严格按说明书操作,每份标准物测定 3 次,看测定结果是否与标 准物浓度相符合的程度;(3)用传统的方法与尿液分析仪测定作对比分析,对尿液分析仪的敏感性和特 异性进行评价。与传统湿化学法对比分析时,应注意两种方法测试原理不同带来的实验误差;(4)了解 该仪器对每项测试指标的测试范围,并建立该仪器的正常人的参考值范围。12尿液分析仪使用注意事项是什么? 答:(1)保持仪器的清洁;(2)保证使用干净的取样杯;(3)使用新鲜的混合尿液,标本留取检查应
35、不超过 2h;(4)不同类型的尿液分析仪使用不同的尿试带,在试带从冷藏温度变成室温时,不要打开 盛装试剂带的瓶盖,防止试剂带受潮变质;(5)试剂带浸入尿样的时间为 2s,试剂带过多的尿液标本应 用滤纸吸走,所有试剂块包括空白块在内都要全部浸入尿液中;(6)仪器使用最佳温度应在 20-25 室温,尿液标本和试剂带最好也维持在这个温度范围内;(7)在观看仪器测试结果时,不能单独以符号 代码结果来解释,要结合半定量值进行分析,以免因定性结果的报告方式不够妥当,给临床解释带来混 乱。13如何进行尿液分析仪的维护和保养?答:不规范地操作仪器,会扰乱仪器的正常工作,引起不良结果。仪器应避免阳光长时间的照射
36、及 温度过高湿度过大。日常维护在常规工作中必须严格按一定的操作规程进行操作,否则会因使用不当影响实验结果。(1)操作前应仔细阅读分析仪说明书及尿试剂带说明书,每台尿液分析仪应建立操作程序,并按其进 行操作;(2)对尿液分析仪要有专人负责,建立专用的仪器登记本,对每天仪器操作的情况、出现的问 题,以及维护、维修情况逐项登记;(3)每天测定开机前,要对仪器进行全面检查,确认无误时才能开 机,测定完毕,要对仪器进行全面清理保养;(4)开瓶但未使用的尿试剂带,应立即收入瓶内盖好瓶 盖,根据要求妥善保存,以免下次使用影响结果。每日保养仪器表面应用清水或中性清洗剂擦拭干净;试剂带托盘,每日测定完毕,使用无
37、腐蚀性的洗涤剂清洗,也可用清水或中性清洗剂擦拭干净;不要使用有机溶剂清洗传送带,清洗时勿使水滴入 仪器内,有些仪器的试剂带托盘是一次性的,应注意更换;废物(废水废试剂带)装置,每日用完应 清除干净,并用水清洗干净。每周或每月保养各类尿液分析仪的每周或每月保养,要根据仪器的具体情况而定。14简述引起尿液分析仪故障的原因。答:仪器的故障分为必然性故障和偶然性故障。必然性故障是各种元器件零部件经长期使用后, 性能和结构发生老化,导致仪器无法进行正常的工作;偶然性故障是指各种元器件结构等因受外界条 件的影响,出现突发性质变,而使仪器不能进行正常的工作。通常出现故障的原因分为以下几类。(1)人为引起的故
38、障是由于操作不当引起的,故障轻者导致仪器不能正常工作,重者可能损害仪器。因此在操作使用前,必须熟读用户使用说明书,了解正确的使用操作步骤;(2)仪器设备质量缺 陷引起的故障是指仪器元器件质量不好、设计不合理、装配工艺上因疏忽造成的故障;(3)长期使用 后的故障这类故障与元器件使用寿命有关,所以是必然性故障,如光电器件、显示器的老化,传送机 械系统的逐渐磨损等等;(4)外因所致的故障是由仪器设备的使用环境条件不符合要求所引起的,常常是造成仪器故障的主要原因。一般指的是电压、温度、电场、磁场及振动等。15尿沉渣分析仪有几大类型? 答:迄今为止尿沉渣分析仪大致有两类,一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影
39、像分析,得出相应的技术资料与实验结果;另一类是流式细胞术分析。16简述流式细胞术尿沉渣分析仪的结构。 答:它包括光学检测系统、液压系统、电阻抗检测系统和电子系统。17简述流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理。 答:测定是应用流式细胞术和电阻抗的原理进行的。当一个尿液标本被稀释并经染色液染色后,靠液压作用通过鞘液流动池。反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时,被一种无粒子颗粒的鞘液包围,使每个细胞以单个纵列的形式通过流动池的中心(竖直)轴线,在这里每个尿液细胞被氩激光光束照射。 每个细胞有不同程度的荧光强度、前向散射光强度和电阻抗的大小。仪器将这种荧光散射光等光信号 转变成电信号,并对各种信号进行分
40、析,最后得到每个尿液标本产生出的直方图(histogram)和散射 图(scattergram)。通过分析这些图形,即可区分每个细胞并得出有关细胞的形态18尿沉渣分析仪的安装、使用注意事项是什么?答: (1)安装仪器必须安装在通风好,远离电磁干扰源、热源,防止阳光直接照射,防潮的稳 定水平实验台上(最好是水泥台上)。环境大小应适宜,仪器两侧至少有 0.5m 空间,仪器后面最少有 0.2m 空间。最好安装在有空调装置的房间内(室内温度为 15-30,最适温度为 25,相对湿度应为 30-85)。(2)使用和注意事项安装新仪器时或每次仪器大维修之后,必须对仪器技术性能进行调试,这 对保证检验质量起
41、着重要的作用。全自动尿沉渣分析仪的鉴定必须由仪器制造公司的工程师来进行。每 天开机前,操作者要对仪器的状态进行全面检查,确认无误后方可开机。开机时严格按说明书进行操作, 仪器先进行自检,自检通过后,仪器再进行自动冲洗并检查本底。本底检测和质控通过后,方可进行样 品测试。下列情况应禁止上机测试:尿液标本血细胞数2000/l 时,会影响下一个标本的测定结果; 尿液标本使用了有颜色的防腐剂或荧光素,可降低分析结果的可信性;尿液标本中有较大颗粒的污染物,可引起仪器阻塞。19简述 UD 自动染色尿沉渣分析仪的主要功能和特点。 答:(1)仪器定量准确,具有极高的重复性;(2)系统自动化、智能化程度高,具备
42、灵活的操作方 式;(3)克服了不染色方法易误认、漏检的缺点,提高了典型沉渣成分的检出率;(4)符合标准化要求,克服人为因素后,使尿沉渣分析达到尿沉渣分析的规范化、标准化的要求;(5)安全洁净,减少了对实 验室及操作人员的污染;(6)智能控制,软件功能强大,可全面实现人机对话;(7)功能齐备,人性化 设计,环保节约、易于摆放和观察。20自动尿液分析质控物选择的要求有哪些?答:对质控物的要求必须达到以下几点:(1)质控物应成分稳定,批内分装均匀,易于保存和运输, 复溶后成分无变化。(2)选择质控物时,最好使用多项复合控制品。有条件的实验室最好同时使用高低 两个值的质控物。也有人利用红细胞白细胞醛化
43、固定,霉菌孢子固定,作为有形成分的质控物。(3) 在一天内做质控时最好使用同一份质控物,并采用高低两种质控物对照。(4)根据各实验室的具体情 况每天或隔日随机做质控检测,使用不同批号的试剂带前均需做质控,并对仪器进行校正。(5)质控物 的测定结果由于某些原因超出质控要求的范围表示失控,则需从检查试剂带、质控物、校准仪器等方面 查找原因。第九章 电化学临床技术和临床相关仪器一、名词解释1电化学分析法:利用溶液电化学性质将被测物质的浓度转变成电学参数而进行检测的方法。2. 离子选择性电极:用特殊敏感膜制成的、对溶液中特定离子具有选择性响应的电极。3. 电解质分析仪:通常采用离子选择性电极(ISE)
44、测定生物样品中离子浓度的仪器。4. 血气分析仪:利用电极对人全血中的酸碱度(pH)、二氧化碳分压(PCO2)和氧分压(PO2)进行 测定的仪器。5. 定标或校准:确定电极系统工作曲线的过程。6. 气路系统:提供 PCO2 和 PO2 两种电极定标时所用的两种气体系统。7. 压缩气瓶供气方式:由两个压缩气瓶供气,一个含有 5的二氧化碳和 20的氧;另一个含 10 的二氧化碳,不含氧。经减压阀后输出的气体。8. 气体混合器供气方式:用气体混合器将空气压缩机产生的压缩空气和气瓶送来的纯二氧化碳气 体进行配比、混合,最后产生定标气的方式。9. 基流:当 PO2 的值为零时,电路中存在的微小电流值。10
45、. PO2 电极:PO2 电极是一种气敏电极,电流的大小与血液样品中 PO2 值相关。11. PCO2 电极:又称为“Severinghaus”电极,主要由玻璃电极、参比电极以及 CO2 渗透膜组成的, 电位值随血液 PCO2 的大小变化而改变。三、简答题1什么是电化学分析法?它利用哪些电化学特性进行检测? 答:电化学分析法是利用溶液电化学性质将被测物质的浓度转变成电学参数而进行检测的方法。 电化学分析法利用的电化学特性包括电位、电流、电导和电量等。2pH 测定的基本原理是什么?常使用什么电极进行检测?答: pH 值检测常用参比电极为正极,以指示电极为负极,组成一个电化学电池,通过测量电池的
46、电动势 E 而测得相应溶液的 pH 值。电池的电动势 E 样本中 pH 值得大小之间有下列关系式:E = K +2.303RTpHF常利用玻璃电极检测血液样品的 pH 值。3离子选择性电极的工作原理是什么?其基本组成部分有哪些? 答:离子选择性电极是一种用特殊敏感膜制成的,对溶液中特定离子具有选择性响应的电极。其电极电位与血液样品离子的浓度 Cx 之间有如下关系:2.303RTE ISEk ln C x f xnF将 ISE 与参比电极浸入样品溶液中构成原电池,通过测量电动势 E,便可求得被测离子的活度或浓度。离子选择性电极通常由电极管、内参比电极、内参比溶液和敏感膜四个部分组成。4PO2 电
47、极属于何类电极?简述其工作原理。答:PO2 电极是氧化还原电极,对氧的测量是基于电解氧的原理实现的。血液样品中的 O2 借助电极外的 PO2 梯度透过渗透膜而进入电极。当外加电压0.4V0.8V 范围内时,O2 在铂阴极表面被还原。当 PO2 梯度相对稳定时,就产生一个稳定的电解电流,称之为极限扩散电流。 极限扩散电流的大小取决于膜外的 PO2。因此,通过测定电流变化即可测定血液标本中的氧气分压。5简述电解质分析仪的基本构成。答:电解质分析仪由离子选择性电极、参比电极、分析箱、测量电路、控制电路、驱动电机和显示 器等组成。6干式电解质分析仪测试样品的特点是什么?答: 电解质的干化学测定法目前主
48、要有两类:一类是基于反射光度法,另一类基于离子选择性电极(ISE)方法。其中最常用的是基于离子选择性电极(ISE)的干式电解质分析仪。 干式电解质分析仪具有使用简单、方便、快速等优点。7PCO2 属于何种电极?简述其组成。答:PCO2 电极是气敏电极,是由 pH 玻璃电极和银-氯化银电极组装在一起的复合电极。复合电极装 入有机玻璃圆筒中,塑料套上有气体渗透膜,内装 PCO2 电极外缓冲液(含 NaHCO3-NaCl),它的 pH 可以 因血液的 PCO2 而改变。8常见的电解质分析仪怎样进行分类? 答:如果按自动化程度分类,电解质分析仪可分为半自动电解质分析仪和全自动电解质分析仪;按工作方式分
49、类,电解质分析可分为湿式电解质分析仪和干式电解质分析仪;按常见电解质分析仪分类, 电解质分析仪可分为自动电解质分析仪、含电解质分析的血气分析仪和含电解质分析的自动生化分析 仪。9. 决定湿式电解质分析仪测定结果的准确度和灵敏度的包括哪些系统? 答:分析仪的电极系统是测定样品结果的关键,决定测定结果的准确度和灵敏度。电极系统包括指示电极和参比电极。指示电极包括 pH、Na+、K+、Li+、Cl-、Ca2+、Mg2+等离子选择性电极。参比电极一般 是银/氯化银电极。10简述电解质分析仪的液路系统组成。 答:电解质分析仪的液路系统通常由标本盘、溶液瓶、吸样针、三通阀、电极系统、蠕动泵等组成。蠕动泵为
50、各种试剂的流动提供动力,标本盘、三通阀和蠕动泵的转动、转换均由微机自动控制。液路系 统中的通路由定标液/冲洗液通路、标本通路、废液通路、回水通路、电磁阀通路等组成。不同类型的电解质分析仪具有不同的液流系统。液路系统直接影响到样品浓度测定的准确性和稳定性。11电解质分析仪的电路系统由哪几个模块组成?答:其电路系统基本模块一般均由电源电路模块、微处理器模块、输入输出模块、信号放大及数据 采集模块、蠕动泵和三通阀控制模块等五大模块组成。12控制电解质分析仪运行的是哪个系统?它可提供哪些操作程序? 答:控制电解质分析仪运行的是软件系统,是控制仪器运作的关键。它提供仪器微处理系统操作程序、仪器设定程序、
51、仪器测定程序和自动清洗操作程序等。13电解分析仪的日常维护包括哪几个方面? 答:仪器日常维护保养应按照使用说明书上的要求,进行每日维护、每周维护、半年维护和停机维护。14电解分析仪流路系统的保养包括哪些内容? 答:电解分析仪流路系统的保养主要分为两类,即流路保养和全流路清洗。15在电解分析仪中,如何进行电极系统的保养?答:电极系统的保养主要包括钠电极、钾电极、氯电极和参比电极的保养 。 坚持每日用厂家提供的清洁液和钠电极调整液进行清洗和调整是最基本的保养。钾电极为选择性膜电极,使用过程中会吸附蛋白质,影响电极的响应灵敏度。每月至少更换一次内充液。氯电极为选择性膜 电极,使用过程中亦会吸附蛋白质
52、,最好用物理法进行膜电极的清洁。每周均需检查参比电极内是否有足够的饱和氯化钾溶液及氯化钾残片。一般三个月要换一次参比电 极膜。16在电解分析仪中,仪器的哪些部位最易发生管路堵塞?如何排除故障?答:易堵塞的地方主要有采样针与空气检测器部分、电极腔前端与末端部分、混合器部分以及泵管 和废液管的堵塞 4 个部分。这些故障的排除方法是:(1)采样针与空气检测器部分确定阻塞后,可直接用清洗液进行保养管 路,亦可拆下空气检测器,用 NaClO 溶液反复冲洗进样针和空气检测器即可;(2)电极腔前端与末端部分可用清洗液进行管路清洗保养,亦可将电极全部拆下,将电极腔用 NaClO 溶液浸泡 2 分钟左右,再反
53、复清洗即可;(3)混合器部分主要用清洗液或去蛋白液进行混合器清洗程序,亦可将混合器拆下,用注射器将 NaClO溶液注入混合器浸泡几分钟,然后反复冲洗即可;(4)泵管和废液管的堵塞可将废液泵管放松,CO2 电极 上端废液管拔出,用注射器吸入清洗液或蒸馏水冲吸管路,即可。17在电解分析仪中,引起电极斜率降低的主要原因是什么? 答:引起电解分析仪电极斜率降低的主要原因有:电极膜板上吸附蛋白过多;空气湿度太大;温度太低;。寿命限将至,需要更换电极。18简述血气分析仪的基本结构及工作原理。 答:血气分析仪的基本结构可分为电极、管路和电路三大部分。 其工作原理是:被测血液样品在管路系统的抽吸下,进入样品室
54、内的测量毛细管中。测量毛细管的管壁上开有四个孔,孔内分别插有 pH、PCO2 和 PO2 三支测量电极和一支参比电极。其中,pH 和 pH 参比电极共同组成对 pH 值的测量系统。血液样品进入样品室的测量管后,管路系统停止抽吸,样品同时被 四个电极所感测。电极产生对应于 pH、PCO2 和 PO2 三项参数的电信号。这些电信号分别经放大、模数转 换后送到微处理机。经微机处理系统处理、运算后,再分别被送到各自的显示单元显示或打印机打印出 测量结果。测量系统的所有部件包括温度控制、管道系统的动作等均由微机或计算机芯片控制。19血气分析仪液路系统具有哪两种功能?气路系统的供气方式有几种? 答:血气分
55、析仪液路系统具有的两种功能,一是提供 pH 值电极系统定标用的两种缓冲液,二是自动将定标和测量时停留在测量毛细管中的缓冲液或血液冲洗干净。 血气分析仪气路系统的供气方式有两种,一种是压缩气瓶供气方式,又叫外配气方式;另一种是气体混合器供气方式,又叫内配气方式。20血气分析仪可以测定的血液中哪些结果?可计算得到哪些有用的数据? 答:血气分析仪可以测定人全血中的酸碱度(pH)、二氧化碳分压(PCO2)和氧分压(PO2)。 根据所测得的 pH、PCO2、PO2 参数及输入的血红蛋白值,血气分析仪还可进行计算而求出血液中的其它参数,如血液中的实际碳酸氢根浓度(AB)、标准碳酸氢根浓度(SB)、血液缓冲
56、碱(BB)、血浆二氧 化碳总量(TCO2)、血液碱剩余(BEblood)、细胞外液碱剩余(BEECF)、血氧饱和度(SO2)等。21血气分析时,标准液和标准气分别用于何种电极的定标?答:血气分析时,pH 电极使用 7.383 和 6.840 两种标准缓冲液来进行定标;PO2 和PCO2 电极用两种 混合气体来进行定标。第一种混合气中含 5的 CO2 和 20的 O2;第二种含 10的 CO2,不含 O2。22. 一般的血气分析仪使用哪 4 种电极?答:一般的血气分析仪使用 pH、PCO2、PO2 电极和 pH 参比电极等 4 种电极。23. 血气分析仪内部具有哪两个泵?简述其功能。答: 血气分
57、析仪内部具有两个泵,一为真空泵,另一为蠕动泵。可利用这两个泵来完成仪器的定标、 测量和冲洗。真空泵用来产生负压,使废液瓶内维持负压,靠此负压去吸引冲洗液和干燥空气,用于冲洗和干燥 测量毛细管。真空泵还用于湿化器的快速充液。蠕动泵用于抽吸样品和定标液。在定标时用来抽取缓冲液到测量室。在测血样时用来抽样品。24. 简述血气分析仪电路系统的工作原理。答:电路系统工作原理是:被测样品通过 S 型的样品预热器,被吸入到电极测量室内,样品分别被+-2+由 pH、PCO2、PO2、Hct、Na 、K 、Cl 、Ca、GLU 和参比电极所组成的电极测量系统有选择的检测,并转化成相应的电极信号,这些信号经各种的频道被放大,再经模数转换后变成数字信号,经微机处理、运 算后,由荧光屏显示出来或从打印机打印出结果。25. 在血气分析仪中,如何对 pH 电极进行保养?答:pH 电极的保养方法是:如果 pH 电极在空气中暴露 2h 以上,应将其放在缓冲液中浸泡 6h24h 才能使用。血液中的蛋白质容易粘附在电极表面,必须经常按血液缓冲液(或生理盐水)水空气 的顺序进行清洗。亦可用随机附送的含蛋白水解酶的清洗液或自配的 0.1%胃蛋白酶盐酸溶液浸泡 30 分钟以上,用生理缓冲液洗净后浸泡备用。若清洗后仍不能正常工作,应更换电极。26. 在血气分析仪中,若样品输入通道发生堵塞故障时,如何排除? 答:在血气
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